With the shortage of edible fats and oils and depletion of fossil fuels in many countries, microbial lipids is emerging as one of the most promising sources of fats and oils in the global market. Oleaginous microorganisms, also called single cell oils (SCOs), can accumulate lipids more than 25% in the cell volume. Triacylglycerols are the major storage lipids. SCOs offer several advantages for lipid production as follows: SCOs have short life span which would shorten production time, cultivation conditions are not affected by climate and place; the production process is easy to control. There are a number of oleaginous yeasts, molds, and microalgae. Furthermore, the lipid productivity of SCOs can be enhanced through strain improvement and the optimization of cultivation conditions. The new strains developed using recent advanced biotechnical methods showed greatly improved oleaginicity. Further, hydrolysates of lignocellulosic materials can be used as carbon sources for economic production of SCO.
Protopectinase (PPases) are heterologous group of enzymes that degrade pectin from the insoluble protopection which is constituent of the middle lamella and primary cell wall of higher plants by restricted depolymerization. From the previous report[6], enzymatically separated plant cells, which are produced from plant tissues by PPases treatment, showed well-conserved cellular components with their rigid cell wall and this characteristic is applicable to preparation of novel food material. The purpose of this study is to investigate the effect of medium composition of PPase production from Bacillus subtilis EK11 which was selected as a PPase producer. Various carbon sources and concentrations on PPase production were studied and corn starch at 0.7% was the most effective for production of PPase. Among the nitrogen sources, yeast extract was the most effective for PPase production and the effect of (NH4)2SO4 was notable as inotganic nitrogen source. Inorganic compounds such as KH2PO4, K2HPO4, Na3-citrate.2H2O and MgSO4 were optimized for PPase production. PPase activity was inhibited by the adition of Ba2+ or Zn2+. The optimal medium for PPase production was devised: 0.7% corn starch, 0.3% yeast extract, 1.4% KH2PO4, 0.6% K2HPO4, 0.1% Na3-citrate.2H2O and 0.02% MgSO4. PPase production by using the optimum medium was carried out with shaking cultivation at 37$^{\circ}C$. The maximum PPase activity of 256unit/ml could be obtained after the cultivation for 48hrs. The activity was increased about 2.2timesthan the activity, 112 unit/ml, in basal medium.
In the present study, the biomass productivity of two green microalgae (Chlorella sp. and Dunaliella salina DCCBC2) were assessed in a 12 L tubular photobioreactor under optimum culture conditions. In the batch culture optimization process, the Chlorella sp. biomass was obtained as 1.2 g/L under atmospheric air as a sole $CO_2$ source and other culture conditions as follows: light intensity, temperature, pH, $NH_4Cl$ and $K_2HPO_4$ were 100 ${\mu}E/m^2/s$, $27^{\circ}C$, 7.0, 20.0 mM and 2.0 mM, respectively. On the other hand, 2.9 g/L of D. salina DCCBC2 biomass production was observed under the following conditions: light intensity, temperature, pH, $KNO_3$ and $K_2HPO_4$were 80 ${\mu}E/m^2/s$, $27^{\circ}C$, 8.0, 3.0 mM and 0.025 mM, respectively. At 1% $CO_2$ supply to the reactor, the Chlorella sp. production was reached 1.53 g/L with 25% increment under the same operating conditions. In addition, the maximum D. salina DCCBC2 biomass was observed as 3.40 g/L at 3% $CO_2$ concentration. Based on the aforementioned optimized conditions, the dilution rate and maximal biomass productivity of Chlorella sp. and D. salina DCCBC2 in the continuous cultivation were 0.4/d and 0.6 g/L/d and 0.6/d and 1.5 g/L/d, respectively.
Acetobacter xylinum KJ1 efficiently producing bacterial cellulose(BC) in shaking culture was isolated from a rotten grape. The strain was used to investigate optimum operating conditions for increasing BC production and factorial design model was employed for the optimization. The results of experiments were statistically analyzed by SAS program. Reciprocal effects of each factors(carbon source concentration, shaking speeds(rpm), oxygen pressure, and CSL concentration) and culture condition of BC production were examined by getting regression equation of the dependent variable. Comparisons between experimental results and predicted results about BC concentration were done in total 24 experiments by combination of each factors using SAS program, and the correlation coefficients of BC concentration and BC yield were 0.91 and 0.81, respectively. The agitated cultures were performed in various operation conditions of factors which affected considerably to BC production in jar fermentor. The results showed that BC concentration was 11.67g/ L in 80 hours cultivation under the condition of carbon source concentration shaking speeds(rpm) : oxygen pressure: CSL concentration = 4% : 460rpm : 0.28 : 6%. On the other hand BC yield was 0.42g/g in 80 hours cultivation under the condition of carbon source concentration shaking speeds(rpm) : oxygen pressure: CSL concentration = 4% : 564rpm : 0.21 : 2%. The BC production could be enhanced up to more than 65.3% by factorial design. The result of a verifying experiment under the optimal conditions determined by the factorial design to the BC production showed that the model was appropriate by obtaining BC concentration of 11.02g/L in the optimum condition
Bang, Hyun Bae;Lee, Yoon Hyeok;Lee, Yong Jae;Jeong, Ki Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.2
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pp.356-363
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2016
Human papillomavirus (HPV), a non-enveloped, double-stranded DNA tumor virus, is a primary etiological agent of cervical cancer development. As a potential tool for prophylactic vaccination, the development of virus-like particles (VLPs) containing the HPV16 L1 capsid protein is highly desired. In this study, we developed a high-level expression system of the HPV16 L1 in Escherichia coli for the purpose of VLP development. The native gene of HPV16 L1 has many rare codons that cause the early termination of translation and result in the production of truncated forms. First, we optimized the codon of the HPV16 L1 gene to the preferable codons of E. coli, and we succeeded in producing the full-size HPV16 L1 protein without early termination. Next, to find the best host for the production of HPV16 L1, we examined a total of eight E. coli strains, and E. coli BL21(DE3) with the highest yield among the strains was selected. With the selected host-vector system, we did a fed-batch cultivation in a lab-scale bioreactor. Two different feeding solutions (complex and defined feeding solutions) were examined and, when the complex feeding solution was used, a 6-fold higher production yield (4.6 g/l) was obtained compared with that with the defined feeding solution.
Monacolin K and yellow pigment, produced by Monascus sp., have each been proven to be beneficial compounds as antihypercholesterolemic and anti-inflammation agents, respectively. However, citrinin, a human toxic substance, was also synthesized in this fungus. In this research, solidstate fermentation of M. purpureus TISTR 3541 was optimized by statistical methodology to obtain a high production of monacolin K and yellow pigment along with a low level of citrinin. Fractional factorial design was applied in this study to identify the significant factors. Among the 13 variables, five parameters (i.e., glycerol, methionine, sodium nitrate, cultivation time, and temperature) influencing monacolin K, yellow pigment, and citrinin production were identified. A central composite design was further employed to investigate the optimum level of these five factors. The maximum production of monacolin K and yellow pigment of 5,900 mg/kg and 1,700 units/g, respectively, and the minimum citrinin concentration of 0.26 mg/kg were achieved in the medium containing 2% glycerol, 0.14% methionine, and 0.01% sodium nitrate at $25^{\circ}C$ for 16 days of cultivation. The yields of monacolin K and yellow pigment were about 3 and 1.5 times higher than the basal medium, respectively, whereas citrinin was dramatically reduced by 36 times.
Lipase catalyzes the hydrolysis of glycerides into fatty acids and glycerol. The study of microbial lipases has been stimulated in resent years. It is due to the potential uses of lipases in esterification of oils to glycerol, alcohols and carbohydrates. Development of lipase producing yeast has been focused concerning to the utilization of yeast culture for animal feed. In this study, yeast like cells was isolated from a waste oil and sludge. A strain having higher lipase activity was selected by random mutagenesis using UV-radiation. The optimal cultivation conditions in submerged culture were examined in terms of lipase production. 2.0% of high fructose syrup, 1,0% of CSL, and 1.0% of olive oil were selected as the nutritional media for the production of lipase. The maximum lipase activity of 1.12 U/ml and viable cell number of 8.8${\times}$10$\^$7/ cells/mL were obtained at 27$^{\circ}C$ with an initial pH of 5.0.
Dominant lactic acid bacteria (LAB) strains were isolated from traditional fermented foods to obtain rare ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA)-producing LAB. Out of 147 isolates, 23 strains that could produce GABA with 1% (w/v) L-monosodium glutamate (MSG) were first isolated. After further screening of these rare GABA-producing LAB by analysis of the glutamate decarboxylase and 16S rRNA gene sequences, Enterococcus faecium JK29 was isolated, and 1.56 mM of GABA was produced after 48 h cultivation in basic de Man, Rogosa, and Sharpe (MRS) medium. To enhance GABA production by E. faecium JK29, the culture conditions were optimized. When E. faecium JK29 was cultivated in optimized MRS medium containing 0.5% (w/v) sucrose and 2% (w/v) yeast extract with 0.5% (w/v) MSG, GABA production reached 14.86 mM after 48 h cultivation at initial conditions of pH 7.5 and $30^{\circ}C$.
Bacillus subtilis JK-1 showed degradation activity against crude oil, gasoline, kerosene, and light oil, and this strain was used as a crude biosurfactant producing microorganism in this study. To optimize the culture medium for production of crude biosurfactant, the influences of various carbon, nitrogen and mineral sources were assessed. The highest biosurfactant production by B. subtilis JK-1 was observed after 96 h cultivation, containing 1.0% (w/v) soluble starch as a carbon source and 0.5% (w/v) skim milk as a nitrogen source, and carbon to nitrogen concentraion (C/N) ratio was 2.0. For the biosurfactant production 0.1% (w/v) of $KNO_3$ was the most effective mineral source. Comparison of biosurfactant production indicates that B. subtilis JK-1 produces more biosurfactant in the optimum medium established in this study than LB and TSB. Under the optimum medium, the surface tension of culture broth of B. subtilis JK-1 was decreased from 47.3 dyne/cm to 24.0 dyne/cm after cultivation of 48 h.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.23
no.2
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pp.53-60
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2015
Newly, nutrients recovery by bioconversion in the swine waste which caused serious problems due to its high organic fraction and content of nutrients such as phosphorus and nitrogen is viewed as a considerable approach since it produces valuable product as well as recycling of resources. Consequently, it is necessary to find new methods to treat swine waste. One possible solution to this problem is to use this potential pollutant as a growth substrate for economically valuable products. The study for the fundamental improvement of bioconversion efficiency by finding optimum growth conditions using statistical models and biotechnology was performed. A novel approach to utilize swine waste by cultivating mycelia of the mushroom Phellinus linteus are described. A central composite face-centered design (CCF) for the experiments was used to develop empirical model providing a quantitative interpretation of the relationships among the three variables, which were substrate concentration, pH, and temperature. The maximal radial extension rate (2.78mm/d) of P.linteus was determined under the condition of 5.0 g COD/L, pH 5.0, and temperature $29.7^{\circ}C$. The results of this study suggest that swine waste could be utilized as a growth substrate for the cultivation of mushroom mycelia enhancing an efficiency of utilizing this by-product of the livestock industry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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