Irradiation with high doses of gamma rays induced the reduction of mycelial weight and anaylase activity, and increased relative amylase activity in surface cultures. Biphase in growth curves was shown in aeration-agitation cultures but the behavior of the first phase of growth could be eliminated by replacing the amylasehydrolysed starch substrates, so that enzyme production was shortened ca. 40 hours and relative amylase activity was increased about 3 times higher before onset of autolysis. In the effect of gibberellin on amylase production, the positive stimulation was appeared to only surface culturs of the liquid medium and the negative effect to shake-cultures in a mutant. Trials of various continuous culture were resulted not only the approalch to the value of amylase activity in surface cultures of liquid medium, but also higher productivity than in batch cultures. The culture-degeneration was observed in two-stage continuous culture, but did not appear in continuous elevation culture.
Repeated-batch and continuous cultures of Lactococcus sp. 1112-1 were carried out for bacteriocin production using a glucose-casein medium. Repeated-batch culture did not efficiently enhanced the bacteriocin production. Continuous production was possible at the dilution rate of 0.4 $h^{-1}$. Maximum specific production rate ($Q^p$), bacteriocin production and biomass at the dilution rate were 347, 136 IU/g/h, 2, 121 IU/ml and 2.45 g/L, respectively.
Plant cell immobilization can protect plant cells from shear forces and increase the stability of gene. An additional advantage of immobilization is the easiness for performing continuous culture with cell recycling. Therefore plant cell immobilization can overcome the limitations of plant cell applications. In addition, target protein should be selected from pharmaceutical proteins to get rid of low expression level problem. The enhanced production of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) was investigated in immobilized Nicotiana tabacum suspension cell cultures. When the cells were immobilized in polyurethane foam, specific production of hGM-CSF was higher than that in alginate bead immobilization. Optimum continuous culture condition was the addition of 60 g/L sucrose in growth media with exchanging media every 6 day. Under the same condition, specific hGM-CSF production was 7 times higher in a 500-mL spinner flask than that in 100-mL Erlenmeyer flasks. Therefore, development of an effective immobilization process would be possible when the advantage of easy cell recycling was used. Consequently, enhanced production of target proteins could be possible in immobilized continuous cultures when the advantages of immobilization were applied.
Critical cell density (CCD), the maximum cell concentration without mutual shading in algal cultures, can be used as a new operating parameter for high-density algal cultures and for the application of the flashing light effect on illuminated algal cultures. CCD is a function of average cell volume and light illumination area. The CCD is thus proposed as an index of estimation of mutual shading in algal cultures. Where cell densities are below the CCD, all the cells in photobioreactors can undergo photosysnthesis at their maximum rate. At cell densities over CCD, mutual shading will occur and some cells in the illumination chamber cannot grow photoautotrophically. When the cell concentration is higher than the CCD, specific oxygen production rates under flashing light were higher than those under continuous light. The CCD was found to be a useful engineering parameter for the application of flashing light, particularly in high-density algal cultures.
Succinic acid-producing Anaerohiospirillum succinkiproducens was anaerobically grown in glucose-fed continuous cultures using glucose as a carbon source, and the metabolic flexibility of A. succiniciproducens in response to varying glucose concentrations and dilution rates was examined Both succinic acid (SA) and acetic acid (AA) formation was growth-associated, and their growth-rate-related coefficients ($K_{SA/X}$, $K_{AA/X}$) and nongrowth-rate-related coefficients ($K'_{SA/X}$, $K'_{AA/X}$) were slightly influenced by glucose concentrations. A high glucose concentration (38 g/l) and high growth rate ($0.63\;h^{-1}$) did not induce by-product formation.
Kim, T.W.;Choi, N.J.;Hwangbo, J.;Hsu, Jih-Tay;Lee, Sang S.;Song, M.K.;Seo, I.J.;Kim, Y.J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.18
no.10
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pp.1425-1429
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2005
Megaspahera elsdenii YJ-4, which was previously isolated as a producer of trans-10, cis-12 CLA, was studied for its carbon source on the CLA production. M. elsdenii YJ-4, was incubated with glucose and lactose, and cultured in batch and continuous culture systems with linoleic acid at various pHs to investigate CLA production. Batch cultures of the ruminal bacterium, M. elsdenii YJ-4, were resistant to stearic acid and linoleic acid, and little growth inhibition was observed even when the fatty acid concentration in the culture was as much as 4 mg $ml^{-1}$. Stationary phase batch cultures (0.25 mg bacterial protein $ml^{-1}$) that had been grown on lactate and incubated with linoleic acid (0.20 mg $ml^{-1}$) produced approximately 12 ${\mu}g$ trans-10, cis-12 CLA mg $protein^{-1}$ and little cis-9, trans-11 CLA was detected. Some linoleic acid was converted to hydrogenated products (chiefly stearic acid), but these fatty acids were less than 5 ${\mu}g$ mg bacterial $protein^{-1}$. Stationary phase batch cultures that had been grown on glucose produced at least 3-fold less trans-10, cis-12 CLA than ones grown on lactate. Cells from lactate-limited continuous cultures produced less trans-10, cis-12 CLA than those from batch culture, but only if the pH was greater than 6.4. When the pH of the lactate-limited continuous cultures was lower than 6.4, trans-10, cis-12 CLA and hydrogenated products declined. Cells from glucose-limited continuous cultures produced less trans-10, cis-12 CLA and hydrogenated products than the cells that had been limited by lactate, but pH had little impact on this production. These results support the idea that M. elsdenii YJ-4 could be one of the major producers of trans-10, cis-12 CLA which causes cows to produce milk with a low fat content.
Low efficiency in microalgal biomass production was largely attributed to the low density of algal cell cultures. Though mutations that reduced the level of chlorophyll or pigment content increased efficiency of photon usage and thus the cell-culture density under high-illumination growth conditions (e.g., >$500{\mu}mol\;photon\;m^{-2}\;s^{-1}$), it was unclear whether algae could increase cell-culture density under low-illumination conditions (e.g., ${\sim}50{\mu}mol\;photon\;m^{-2}\;s^{-1}$). To address this question, we performed forward genetic screening in Chlamydomonas reinhardtii. A pool of >1,000 insertional mutants was constructed and subjected to continuous subcultures in shaking flasks under low-illumination conditions. Complexity of restriction fragment length polymorphism (RFLP) pattern in cultures indicated the degree of heterogeneity of mutant populations. We showed that the levels of RFLP complexity decreased when cycles of subculture increased, suggesting that cultures were gradually populated by high cell-culture density (HCD) strains. Analysis of the 3 isolated HCD mutants after 30 cycles of subcultures confirmed that their maximal biomass production was 50-100% higher than that of wild type under low-illumination. Furthermore, levels of chlorophyll content in HCD mutant strains were similar to that of wild type. Inverse polymerase chain reaction analysis identified the locus of insertion in two of three HCD strains. Molecular and transcriptomic analyses suggested that two HCD mutants were a result of the gain-of-function phenotype, both linking to the abnormality of mitochondrial functions. Taken together, our results demonstrate that HCD strains can be obtained through continuous subcultures under low illumination conditions.
A proper flashing light is expected to enhance microalgal biomass productivity and photosynthetic efficiency. The effect of flashing light on high-density Chlorella kessleri (UTEX 398) cultures was studied using light-emitting diodes. A frequency modulator was designed to flash LEDs, and the device successfully provided wide range of frequencies and various duty cycles of flashing. A relatively high frequencies of 10, 20 and 50 kHz were used in this study. These frequencies have very short flashing time ($2-50{\mu}s$), which corresponded to the time constant of the light reaction of photosynthesis. The specific oxygen production rates of photosynthesis under flashing light were compared with those under an equivalent continuous light in specially designed illumination cuvette. The specific oxygen production rates under flashing light were 5-25% higher than those under the continuous light. A range of cell concentration was discovered, where the benefit of flashing light was maximized. The photosynthetic efficiency was also higher under flashing light with frequencies of over 1 kHz, which was a clear indication of flashing light effect and the degree of mutual shading could by overcome by flashing lights, particularly at high-density algal cultures.
It has been reported that flashing light enhances microalgal biomass productivity and overall photosynthetic efficiency. The algal growth kinetics and oxygen production rates under flashing light with various flashing frequencies (5Hz-37 kHz) were compared with those under equivalent continuous light in photobioreactors. A positive flashing light effect was observed with flashing frequencies over 1kHz. The oxygen production rate under conditions of flashing light was slightly higher than that under continuius ligth. The cells under the hight, particularly at higher cell concentrations. When 37kHz flashing light was applied to an LED-based photobioreactor, the concentration was higher than that obtained under continuous light by about 20%. Flashing light may be a reasonable solution to overcome mutual shading, particularly in high-density algal cultures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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