Isolates of Trichoderma spp. collected from Pleurotus ostreatus and P. eryngii beds, which included loosened substrate compactness and development of green colour, were grouped into three species. The occurrence of different species of Trichoderma was as T. cf. virens(70.8%), T. longibrachiatum(16.7%) and T. harzianum(12.5%). The conidia of Trichoderma spp. were ellipsoidal, obovoid and phialides were bowling pins, lageniform and the length of phialides was $3.5{\sim}10.0{\times}1.3{\sim}3.3{\mu}m$. Phialides of T. cf. virens and T. harzianum were tending clustered, but it was solitary disposition in T. longibrachiatum. T. cf. virens was characterized by predominantly effuse conidiation, sparingly branched, and fertile to the apex and it was penicillate type. RAPD analysis could detect variability amongst three different species of Trichoderma using two newly designed URP-primers. However, intra-specific variation could not be detected in all the isolates except for rDNA sequence data classified Trichoderma isolates into three distinct groups representing three species. The profiles of rDNA sequences of isolates representing a species showed high similarity in T. cf. virens and T. harzianum. However, there was a variation in rDNA sequences of isolates representing T. longibrachiatum. The results of present study reveals that molecular techniques of RAPD and rDNA sequencing can greatly aid in classification based on morphology and precise identification of fast evolving species of Trichoderma.
Biofilms are of vital significance in bioconversion and biotechnological processes. In this work, sugarcane molasses was used to enhance biofilms for the improvement of the production of fumigaclavine C (FC), a conidiation-associated ergot alkaloid with strong anti-inflammatory activities. Biofilm formation was more greatly induced by the addition of molasses than the addition of other reported biofilm inducers. With the optimal molasses concentration (400 g/l), the biofilm biomass was 6-fold higher than that with sucrose, and FC and conidia production was increased by 5.8- and 3.1-fold, respectively. Moreover, the global secondary metabolism regulatory gene laeA, FC biosynthetic gene fgaOx3, and asexual central regulatory genes brlA and wetA were upregulated in molasses-based biofilms, suggesting the upregulation of both asexual development and FC biosynthesis. This study provides novel insight into the stimulatory effects of molasses on biofilm formation and supports the widespread application of molasses as an inexpensive raw material and effective inducer for biofilm production.
Magnaporthe oryzae, the causal agent of rice blast, forms a specialized infection structure, called an appressorium, which is crucial for penetration and infection of the host plant. Pharmacological data suggest that calcium/calmodulindependent signaling is involved in appressorium formation in this fungus. To understand the role of the calcium/calmodulin-activated protein phosphatase on appressorium formation at the molecular level, MCNA, a gene encoding the catalytic subunit of calcineurin, was functionally characterized in M. oryzae. Transformants expressing sense/antisense RNA of MCNA exhibited significant reductions in mycelial growth, conidiation, appressorium formation, and pathogenicity. cDNA of MCNA functionally complemented a calcineurin disruptant strain (cmp1::LEU2 cmp2::HIS3) of Saccharomyces cerevisiae. These data suggest that calcineurin A plays important roles in signal transduction pathways involved in the infection-related morphogenesis and pathogenicity of M. oryzae.
Cylindrocarpon destructans is an ascomycete soil-borne pathogen that causes ginseng root rot. To identify effective biocontrol agents, we isolated several bacteria from ginseng cultivation soil and evaluated their antifungal activity. Among the isolated bacteria, one isolate (named JH7) was selected for its high antibiotic activity and was further examined for antagonism against fungal pathogens. Strain JH7 was identified as a Chromobacterium sp. using phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences. This strain was shown to produce antimicrobial molecules, including chitinases and proteases, but not cellulases. Additionally, the ability of JH7 to produce siderophore and solubilize insoluble phosphate supports its antagonistic and beneficial traits for plant growth. The JH7 strain suppressed the conidiation, conidial germination, and chlamydospore formation of C. destructans. Furthermore, the JH7 strain inhibited other plant pathogenic fungi. Thus, it provides a basis for developing a biocontrol agent for ginseng cultivation.
Kwang Ho Lee;Adiyantara Gumilang;Teng Fu;Sung Wook Kang;Kyoung Su Kim
Mycobiology
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제50권6호
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pp.467-474
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2022
Autophagy serves as a survival mechanism and plays important role in nutrient recycling under conditions of starvation, nutrient storage, ad differentiation of plant pathogenic fungi. However, autophagy-related genes have not been investigated in Colletotrichum scovillei, a causal agent of pepper fruit anthracnose disease. ATG8 is involved in autophagosome formation and is considered a marker of autophagy. Therefore, we generated an ATG8 deletion mutant, ΔCsatg8, via homologous recombination to determine the functional roles of CsATG8 in the development and virulence of C. scovillei. Compared with the wild-type, the deletion mutant ΔCsatg8 exhibited a severe reduction in conidiation. Conidia produced by ΔCsatg8 were defective in survival, conidial germination, and appressorium formation. Moreover, conidia of ΔCsatg8 showed reduced lipid amount and PTS1 selectivity. A virulence assay showed that anthracnose development on pepper fruits was reduced in ΔCsatg8. Taken together, our results suggest that CsATG8 plays various roles in conidium production and associated development, and virulence in C. scovillei.
Rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, is the most destructive pathogen of rice in the world. This fungus has a biotrophic phase early in infection and switches to a necrotrophic lifestyle after host cell death. During the biotrophic phase, the fungus competes with host for nutrients and oxygen. Continuous uptake of oxygen is essential for successful establishment of blast disease of this pathogen. Here, we report transcriptional responses of the fungus to oxygen limitation. Transcriptome analysis using RNA-Seq identified 1,047 up-regulated genes in response to hypoxia. Those genes were involved in mycelial development, sterol biosynthesis, and metal ion transport based on hierarchical GO terms and well-conserved among three different fungal species. In addition, null mutants of three hypoxia-responsive genes were generated and tested for their roles on fungal development and pathogenicity. The mutants for a sterol regulatory element-binding protein gene, MoSRE1, and C4 methyl sterol oxidase gene, ERG25, exhibited increased sensitivity to hypoxia-mimetic agent, increased conidiation, and delayed invasive growth within host cells, suggesting important roles in fungal development. However, such defects did not cause any significant decrease in disease severity. The other null mutant for alcohol dehydrogenase gene, MoADH1, showed no defect in the hypoxia-mimic condition and fungal development. Taken together, this comprehensive transcriptional profiling in response to a hypoxia condition with experimental validations would provide new insights on fungal development and pathogenicity in plant pathogenic fungi.
A common post-harvest disease of sweetpotato tuber is root rot caused by Fusarium solani in Korea as well as the other countries. Storage root rot disease was monitored earlier on sweetpotato (Ipomoea batatas) in storehouses of different locations in Korea. In the present study, an isolate SPL16124 was choosen and collected from Sweetpotato Research Lab., Bioenergy Crop Research Institute, NICS, Muan, Korea, and confirmed the identification as Fusarium solani by conidial and molecular phylogenetic analysis (internal transcribed spacer ITS and translation elongation factor EF 1-α gene sequences). The isolate was cultured on potato dextrose agar, and conidiation was induced. The fungus was screened for Fusarium root rot on tuber of 14 different varieties. Among the tested variety, Yenjami, Singeonmi, Daeyumi, and Sinjami showed resistant to root rot disease. Additionally, the pathogen was tested for pathogenicity on stalks of these varieties. No symptom was observed on the stalk, and it was confirmed that the disease is tissue specific.
Protein phosphatase 2A (PP2A), a family of serine/threonine protein phosphatases, plays an important role in balancing the phosphorylation status of cellular proteins for regulating diverse biological functions in eukaryotic organisms. Despite intensive studies in mammals, limited information on its role is available in filamentous fungi. Here, we investigated the functional roles of genes for a putative B' delta regulatory subunit (FgPP2AR) and a catalytic subunit (FgPP2AC) of PP2A in a filamentous ascomycete, Fusarium graminearum. Molecular characterization of an insertional mutant of this plant pathogenic fungus allowed us to identify the roles of FgPP2AR. Targeted gene replacement and complementation analyses demonstrated that the deletion of FgPP2AR, which was constitutively expressed in all growth stages, caused drastic changes in hyphal growth, conidia morphology/germination, gene expression for mycotoxin production, sexual development and pathogenicity. In particular, overproduction of aberrant cylindrical-shaped conidia is suggestive of arthroconidial induction in the ${\Delta}FgPP2AR$ strain, which has never been described in F. graminearum. In contrast, the ${\Delta}FgPP2AC$ strain was not significantly different from its wild-type progenitor in conidiation, trichothecene gene expression, and pathogenicity; however, it showed reduced hyphal growth and no perithecial formation. The double-deletion ${\Delta}FgPP2AR;{\Delta}FgPP2AC$ strain had more severe defects than single-deletion strains in all examined phenotypes. Taken together, our results indicate that both the putative regulatory and catalytic subunits of PP2A are involved in various cellular processes for fungal development in F. graminearum.
Fusarium verticillioides is an important pathogen of maize, being responsible for ear rots, stalk rots, and seedling blight worldwide. During the past decade, F. verticillioides has caused several severe epidemics of maize seedling blight in many areas of China, which lead to significant losses. In order to understand the molecular mechanisms regulating fungal development and pathogenicity in this pathogen, we isolated and characterized the gene fpk1 (GenBank Accession No. EF405959) encoding a homolog of the cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit, which included a 1,854-bp DNA sequence from ATG to TAA, with a 1,680-bp coding region, and three introns (lengths: 66 bp, 54 bp, and 54 bp), and the predicated protein precursor had 559 aa. The mutant ${\Delta}fpk1$, which was disrupted of the fpkl gene, showed reduced vegetative growth, fewer and shorter aerial mycelia, strongly impaired conidiation, and reduced spore germination rate. After germinating, the fresh hypha was stubby and lacking of branch. When inoculated in susceptible maize varieties, the infection of the mutant ${\Delta}fpk1$ was delayed and the infection efficiency was reduced compared with that of the wild-type strain. AU this indicated that gene fpk1 participated in hyphal growth, conidiophore production, spore germination, and virulence in F. verticillioides.
Fu, Teng;Park, Gi-Chang;Han, Joon Hee;Shin, Jong-Hwan;Park, Hyun-Hoo;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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제35권6호
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pp.564-574
/
2019
Like many fungal pathogens, the conidium and appressorium play key roles during polycyclic dissemination and infection of Magnaporthe oryzae. Ran-binding protein microtubule-organizing center (RanBPM) is a highly conserved nucleocytoplasmic protein. In animalia, RanBPM has been implicated in apoptosis, cell morphology, and transcription. However, the functional roles of RanBPM, encoded by MGG_00753 (named MoRBP9) in M. oryzae, have not been elucidated. Here, the deletion mutant ΔMorbp9 for MoRBP9 was generated via homologous recombination to investigate the functions of this gene. The ΔMorbp9 exhibited normal conidial germination and vegetative growth but dramatically reduced conidiation compared with the wild type, suggesting that MoRBP9 is involved in conidial production. ΔMorbp9 conidia failed to produce appressoria on hydrophobic surfaces, whereas ΔMorbp9 still developed aberrantly shaped appressorium-like structures at hyphal tips on the same surface, suggesting that MoRBP9 is involved in the morphology of appressorium-like structures from hyphal tips and is critical for development of appressorium from germ tubes. Taken together, our results indicated that MoRBP9 played a pleiotropic role in polycyclic dissemination and infection-related morphogenesis of M. oryzae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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