• 제목/요약/키워드: collagen assay

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Medimin A를 함유한 O/W 에멀전의 주름 개선 효과 (Changes of Facial Wrinkle after Topical Application of On Emulsion Containing Medimin A)

  • 박선규;장민열;김영득;정봉열;원영호;김진준;강세훈
    • 대한화장품학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.23-36
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    • 1999
  • Medimin A는 경피 흡수성과 안정성을 높이기 위해 retinoic acid와 polyethylene glycol(PEG)를 결합시켜 개발한 비타민 A 유도체이다. Medimin A의 주름 완화 효과를 확인하기 위하여 콜라겐 합성능 및 임상 평가를 실시하였다. Invitro 콜라겐 합성능은 섬유아세포를 배양하여 생산되는 단백질 중에서, collagenase에만 특이적으로 분해되는 단백질에 함유된 [$^3$H]-proline의 양을 측정하여 평가하였으며, 임상 평가는 피부주형(replica)의 영상분석, 주름의 육안적 관찰, 피시험자의 자가 판단에 의하여 평가하였다. Medimin A를 섬유아세포에 처리한 결과 104% 농도에서 약 40%의 콜라겐 합성 증진을 보였다. Medimin A가 0.2%함유된 O/W 에멀젼을 10주간 피시험자에 도포한 결과, 피부 주형에서 가장 깊은 주름이 약 38.4% 가 감소되었으며, 육안적 관찰에 의한 눈가 주름은 25.5% - 44.1%가 감소되었다. 또한 피시험자의 자가 진단에 의하면 전체 피시험자 중 93%가 10주간 도포 후 주름이 호전되었다고 응답하였다. 이상과 같은 결과에서, Medimin A는 객관적 평가법(in vitro 콜라겐 합성능, 피부 주형의 영상분석) 및 주관적 평가법(육안적 관찰, 피시험자의 자가 진단)에서 모두 유의하게 주름을 완하시키는 물질임이 확인되었다.

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섬유아세포(CCD-986sk)에서 청미래덩굴의 pro-collagen type-1 활성 및 MMP-1의 유전자 발현 저해능 (Inhibitory Efficacy of Smilax china L. on Pro-collagen Type-1 Activity and MMP-1 Gene Expression in Fibroblasts (CCD-986sk))

  • 이수연;이진영
    • 생명과학회지
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    • 제23권10호
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    • pp.1239-1245
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    • 2013
  • 청미래덩굴 추출물의 주름개선 효과를 확인하기 위해 elastase 저해활성을 측정한 결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 41.1%, 16.3%의 활성을 나타내었으며, collagenase 저해활성 측정결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 96.6%, 60.0%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴의 에탄올 추출물의 세포생존율을 확인하기 위하여 섬유아세포(CCD-986sk)로 MTT assay에 의해 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$ 농도에서 71.7%의 세포 생존율을 확인할 수 있었다. 섬유아 세포에서 청미래덩굴 에탄올 추출물의 pro-collagen type-1 생합성량을 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 139% 이상의 우수한 효과를 나타내었으며, MMP-1 저해활성을 측정한 결과 $50{\mu}g/ml$의 각각의 농도에서 74.9%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴 에탄올 추출물을 처리한 섬유아 세포에서 MMP family 중 MMP-1의 단백질 발현 및 mRNA 발현 억제 효과를 확인한 결과 MMP-1 단백질 발현과 mRNA 발현 모두 $50{\mu}g/ml$에서 각각 35%, 45%의 저해율을 나타내었다. 이러한 결과로 미루어 보아 청미래덩굴 에탄올 추출물이 주름개선용 화장품 소재로 응용이 가능할 것으로 판단된다.

산채류로부터 혈소판응집 억제물질의 검색 (Screening of Inhibitors of Platelet Aggregation from Edible Plants)

  • 윤민호;임치환;오진환;이종철;최우영
    • 농업과학연구
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    • 제24권2호
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    • pp.267-274
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    • 1997
  • 산채류를 비롯한 식물자원으로부터 항혈전 성분을 탐색하기 위하여 전국일원의 농산시장 및 농촌지도소, 평창산채시험장과 한국인삼연초연구원의 실험포장으로부터 약 160점의 시료를 수집하였으며, modified smear method를 적용하여 그 methanol 추출물의 혈소판응집 저해활성을 비교하였다. Platelet rich plasma 즉 혈소판 혈장을 이용하는 modified smear method는 응집유도물질로서 ADP와 collagen을 사용하였을때 electrical impedence method와 높은 상관성을 나타내었고, 재현성도 비교적 우수하여 정제하지 않은 식물체의 조추출물의 항혈전 활성을 효율적으로 검색할 수 있었다. 참취, 개미취, 곤달비, 산마늘, 산도라지, 영양부추, 산뽕, 쇠비름, 생열귀등이 ADP와 collagen 모두 혈소판응집 저해활성을 나타내었으며, 곰취, 사철쑥, 씀바귀, 민들레, 산지치, 갯완두, 참대등은 collagen을 사용한 경우에는 저해활성이 다소 낮게 검출되었다. 반면에 참나물, 옥잠, 냉이, 메밀, 매실, 복분자, 해란초등은 오히려 혈소판응집 촉진효과를 나타내었다. 한편 DPPH법으로 활성산소 억제율을 비교한 결과 산채류중에는 고사리, 참취, 곰취, 구절초, 사철쑥, 고려엉겅퀴, 달개비, 냉이 그리고 생약재중에서는 적작약, 음양곽, 복분자등이 항산화활성이 높았다.

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진동이 성대세포주의 세포외기질 변화에 대한 연구 (Change of Extracellular Matrix of Human Vocal Fold Fibroblasts by Vibratory Stimulation)

  • 김지민;신성찬;권현근;천용일;노정훈;이병주
    • 대한후두음성언어의학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.15-23
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    • 2021
  • Background and Objectives During speech, the vocal folds oscillate at frequencies ranging from 100-200 Hz with amplitudes of a few millimeters. Mechanical stimulation is an essential factor which affects metabolism of human vocal folds. The effect of mechanical vibration on the cellular response in the human vocal fold fibroblasts cells (hVFFs) was evaluated. Materials and Method We created a culture systemic device capable of generating vibratory stimulations at human phonation frequencies. To establish optimal cell culture condition, cellular proliferation and viability assay was examined. Quantitative real time polymerase chain reaction was used to assess extracellular matrix (ECM) related and growth factors expression on response to changes in vibratory frequency and amplitude. Western blot was used to investigate ECM and inflammation-related transcription factor activation and its related cellular signaling transduction pathway. Results The cell viability was stable with vibratory stimulation within 24 h. A statistically significant increase of ECM genes (collagen type I alpha 1 and collagen type I alpha 2) and growth factor [transforming growth factor β1 (TGF-β1) and fibroblast growth factor 1 (FGF-1)] observe under the experimental conditions. Vibratory stimulation induced transcriptional activation of NF-κB by phosphorylation of p65 subunit through cellular Mitogen-activated protein kinases activation by extracellular signal regulated kinase and p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs) phosphorylation on hVFFs. Conclusion This study confirmed enhancing synthesis of collagen, TGF-β1 and FGF was testified by vibratory stimulation on hVFFs. This mechanism is thought to be due to the activation of NF-κB and MAPKs. Taken together, these results demonstrate that vibratory bioreactor may be a suitable alternative to hVFFs for studying vocal folds cellular response to vibratory vocalization.

혈부축어탕(血府逐瘀湯)이 암전이(癌轉移) 억제(抑制)에 미치는 영향(影響) (Anti-metastastic Effects of Xuefezhuyutang)

  • 이진화;심범상;안규석;최승훈
    • 대한한방종양학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.61-75
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    • 1999
  • To examine the effect of Xuefuzhuyutang on the metastasis of cancer, the following experiments were carried out. Before the main experiments, the cytotoxicity was measured by putting Xuefuzhuyutant sample in HT1080. Then zymography was made to examine the change of gelatinolytic activity. Western blotting was carried out to examine the changes of Fos, Jun, Ets, Erk, md JNK. In vitro invasion assay with transwells coated by collagen and matrigel was carried out. From the above results the following conclusions were obtained. 1. The experimental result about cytotoxicity of Xuefuzhuyutang agaitst HT1080 was a below. The stained cell count after being treated by by Xuefuzhuyutang sample $400{\mu}g/ml$ for 24 hours was 0.9% of total cells, and the stained cell count by Xuefuzhuyutang sample $100{\mu}g/ml$ was 1.5% of total cells. Both were near the level of control group which showed 0.6% stained. 2. The result of collagenase assay was as below. In Xuefuzhuyutang sample $400{\mu}g/ml$, MMP2 was reduced as compared with TPA control group, and the band of MMP-9 induced by TPA disapappeared. In Xuefuzhuyutang samle $800{\mu}g/ml$ both bands of MMP-2 and MMP-9 disapeared. 3. The results of western blots for Jun, Fos, Ets, Erk, JNK were a below. In Xuefuzhuyutang sample $200{\mu}g/ml$, Ets was reduced, and Jun, Fos were increased. 4 The result of invasion assay was as below. The number of cells which migrated across transwell membrane in Xuefuzhuyutang-treated group was less than that of control(+TPA) group. From the above results, it was concluded that Xuefuzhuyutang might inhibit the activity of collagenase not by the MMP-2, MMP-9 promoter but by the other way.

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Age-related Reference Intervals for Total Collagen-I-N-terminal Propeptide in Healthy Korean Population

  • Yoo, Jun-Il;Park, Ae-Ja;Lim, Yong Kwan;Kweon, Oh Joo;Choi, Jee-Hye;Do, Jae Hyuk;Kim, Sunjoo;Kim, Youngri;Ha, Yong-Chan
    • 대한골대사학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.235-241
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    • 2018
  • Background: Procollagen type I N-terminal propeptide (PINP) is one of the most clinically useful bone formation biomarkers. Therefore, the purpose of this study was to independently evaluate the performance of automated total PINP assay and established age- and gender- specific reference intervals for PINP in healthy Korean population. Methods: The imprecision, linearity, and detection capability of Elecsys total PINP assay was determined and reference interval was established using 599 serums from Korean population with normal bone mineral densities based on bone densitometry. Age groups were divided into 20s, 30s, 40s, 50s, 60s and over. Results: Elecsys total PINP had excellent performance in imprecision, linearity, and detection capability. When partitioning age groups in Korean male and female populations, there was significant difference in total PINP between different age groups. In male populations, PINP level was decreased with increasing age, then it remained steady after middle-age. In female populations, there was a decreasing tendency similar to that in the male population with a sharp increase in the 50 to 59 age group. Conclusions: Elecsys total PINP assay showed precise and reliable performance in our study. We established age-related PINP reference intervals for Korean male and female population with normal bone mineral densities.

DETECTION OF DNA SINGLE-STRAND BREAKS AND UNSCHEDULED DNA SYNTHESIS INDUCED BY PROCARCINOGENS IN PRIMARY CULTURES OF RAT HEPATOCYTES

  • Kim, D.H.;Kim, Bok-Ryang;K. H. Yang
    • Toxicological Research
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    • 제2권1호
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    • pp.1-7
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    • 1986
  • Procarcinogen induced DNA single-strand breaks and unschduled DNA synthesis were measured in primary rat hepatocytes culture. For DNA single-strand breaks assay, rat liver DNA was prelabeled by injection 3H-thymidine during the peak of DNA synthesis following partial hepatectomy. Hepatocytes were isolated from the rat 2 weeks after surgery by a collagenase perfusion techinique and maintained as monolayers in serum free medium on collagen-coated culture dishes. DNA sigle-strand breaks were measured by the alkaline elution techinique.

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말의 활액 및 혈청 분석을 통한 관절질환의 생화학적 예측 인자 (The Investigation of Synovial Fluid and Serum for Biochemical Markers of Joint Diseases in the Horse)

  • 배종환;김갑수;유영춘;이회영;이경복
    • 한국임상수의학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.304-310
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    • 2001
  • The joint disease including osteoarthris (OA) and rheumatoid arthritis (RA) are common in the horse. Many studies have been performed to develop biochemical markers reflecting the abnormalities of cartilage and synovial membrane. However, no specific, sensitive and clinically well established assay systems have been yet available to characterize the severity of joint diseases. Indeed, radiography is still doctor's best choice of assessing joint damage in OA/RA. This review focuses on biochemical molecules such as proteoglycan, collagen, matrix metalloproteinases (MMPs), lectin and cytokine to assess their potential value for not only predicting stage of joint disease but also monitoring treatment efficacy.

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Inhibitory effect of DA-125 on cancer metastasis by downregulating MMPs and CAMs

  • Park, Hyen-Joo;Hwang, Hye-Jin;Kim, Won-Bae;Kim, Soon-Hoe;Lee, Sang-Kook
    • 대한약학회:학술대회논문집
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    • 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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    • pp.68.3-69
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    • 2003
  • Matrix metalloproteinases (MMPs) play an important role in tumor invasion and metastasis by extracellular matrix degradation. To analyze the effect of DA-125, a anthracyclin derivative, on the invasion or metastasis of cancer cells the expression of matrix metalloproteases (MMPs) was investigated in human fibrosarcoma HTl080 cells by RT-PCR or gelatin zymographic methods. As result, DA-125 suppressed the expression of MMP-2 and 9 as well as tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) TIMP-2 and MT1-MMP with a time- and dose-dependent manner. Inaddition, DA-125 inhibited cancer cell migration and colony formation, and also exhibited the inhibitory activities of invasion and motility with a matrigel and type I collagen assay. (omitted)

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천년초 추출물이 조골세포의 증식과 ROS소거능에 미치는 영향 (ROS Scavenging Effect and Cell Viability of Opuntia humifusa Extract on Osteoblastic MC3T3-E1 Cells)

  • 황현정;정복미;김미향
    • 생명과학회지
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    • 제21권12호
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    • pp.1752-1760
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    • 2011
  • 우리나라에서 자생하고 있는 천년초는 새로운 생리활성 물질을 생산할 수 있는 소재로 각광받고 있으며, mouse calvaria 유래의 MC3T3-E1 세포는 골세포의 세포 활성과 관련된 연구에서 유용하게 이용되어 왔다. 따라서 본 연구에서는 MC3T3-E1 세포를 이용하여 천년초 추출물이 세포 증식에 미치는 영향과 ALP 활성, 조골세포의 골 형성을 위한 필수 인자인 collagen 합성에 대한 영향을 검토하고 세포사의 주요 인자인 ROS 에 미치는 영향에 대해 검토하였다. 각 추출물의 수율은 껍질 열수 추출물이 35.2%로 가장 수율이 높았고, 다음으로 줄기 열수 추출물, 껍질 에탄올 추출물, 씨 열수 추출물, 줄기 에탄올 추출물 순으로 나타났으며, 수율이 가장 낮은 씨 에탄올 추출물은 20.6%였다. 각 추출물의 농도(1, 10 50, $100{\mu}g/ml$)에 따른 조골세포 성장에 미치는 영향을 MTT assay로 분석한 결과, 모든 군에서 대조군과 비교하여 유의적인 증식률을 나타내었으며 특히, $100{\mu}g/ml$ 씨 열수 추출물을 첨가하였을 때, 대조군과 비교하여 가장 높은 120% 정도의 증식률을 나타내었다. 천년초 추출물이 ALP 활성에 미치는 영향을 조사한 결과, 천년초 추출물을 $10\sim50{\mu}g/ml$ 첨가하였을 때, 대조군과 비교하여 유의적으로 증가하였으며 특히, 씨 에탄올 추출물을 $50{\mu}g/ml$ 첨가하였을 때, 130% 이상의 ALP 활성을 증가시켜 조골세포의 분화에 영향을 줄 가능성이 제시 되었다. 천년초 추출물이 조골세포의 collagen 합성에 미치는 실험결과에서는 천년초 씨 열수 추출물과 씨 에탄올 추출물의 $50\sim100{\mu}g/ml$ 농도에서 높은 합성능을 나타내었으며 그 중 씨 열수 추출물 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 가장 높은 collagen 합성능을 보였다. 천년초 추출물이 세포내 ROS생성에 미치는 영향을 실험한 결과에서는 모든 천년초 추출물 처리에 의해 농도 의존적으로 형광 강도가 감소하는 경향을 보였으며 특히, 씨 열수 추출물의 $100{\mu}g/ml$ 경우, 대조군에 비해 54% 정도 ROS가 감소되어 천년초씨 추출물이 세포 내에서 높은 항산화력이 있는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 천년초 추출물이 조골세포의 증식, ALP 활성, collagen 합성 및 ROS 생성 저해를 촉진하여 골 생성에 영향을 줄 수 있는 것이 확인되었으며, 추출 용매와 관계없이 씨 추출물이 가장 높은 활성을 나타내었다. 천년초 씨 중의 활성 성분 구명을 위해 향후 구체적 기작 연구와 in vivo 연구가 병행된다면, 골다공증 예방과 관련된 기능성 식품의 천연소재 개발이 가능할 것이라 사료된다.