• Archives of Pharmacal Research
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• 제21권5호
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• pp.555-558
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• 1998

chondroitin sulfates were isolated from the mud snail. For the quantitative analysis of enzymatic digestion products of isolated chondroitin sulfates, strong anion exchange-high performance liquid chromatography (SAX-HPLC) was performed. by the action of chondroitinase ABC, three unsaturated disaccharides$ 2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-D-galactose $$({\Delta}Di-OS), $2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-6-O-sulfo-D-galactose ({\Delta}Di-6S) and 2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-4-O-sulfo-D-galactose ({\Delta}Di-4S)$ were produced from the mud snail chondroitin sulfates. The analysis showed that relative proportion of ${\Delta}Di-OS/{\Delta}Di-6S/{\Delta}Di-4S$ was 58.7/3.1/38.2. The immunomodulating activity of chondroitin sulfate was examined by cell proliferation assay and these results suggest that it might be a immunosuppressant.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권4호
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• pp.641-645
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• 2004

단회경구독성시험에서 미더덕 및 멍게 유래 crude콘드로이틴황산의 LD$_{50}$는 2g/kg 이상으로서 판명되어, 단회경구독성 측면에서 는 안전한 원료로 판단되었다. 비록 기니픽을 이용한 감작성시험은 미더덕 유래 crude 콘드로이틴황산만을 사용하여 실시하였고, 시험 농도는 GAGs의 임상 사용 예정량이 0.03∼0.15%임을 고려하여 inductiuon 농도는 임상사용 예정량의 10배인 3.0%, challenge 적용 농도를 0.3% 이하로 잠정 설정하여 3.0%, 0.3%, 0.03%농도에서 실시하였다. 그 결과 0.03% 및 0.15% 농도에서는 반응을 나타낸 개체가 없었으나, 양성대조군과 비교할 때 0.3% 농도에서는 24시간 후에는 10% 그리고 48시간 후에는 5%의 반응율을 나타냈지만 사용가능범위에 해당되어 미더덕의 GAGs은 감작성 측면에서 안전성이 높은 원료로 0.3%이하 농도에서는 사용 가능하다고 판단되었다. 토끼를 이용한 안점막 자극시험에서는 미더덕과 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산 및 bovine trachea 콘드로이틴황산의 3.0% 적용 시 모두 A.O.I.가 기준치 이하로 나타나 실제 사용 시 눈에 자극성이 없음이 판명되었다. 토끼를 이용한 피부일차자극 시험에서는 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산을 3.0% 및 1.5%는 무자극을 보였지만, 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산에서는 미약하게 보이던 피부반응이 미더덕 유래 crude 콘드로이틴황산에서는 3.0% 적용에서 다소 강한 반응을 보였다. 광독성 및 광감작성을 위한 UV 흡광 실험결과 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산과 대조군으로서 사용한 표품 콘드로이틴황산 모두 자외선영역(280∼420 nm)에서 흡광을 보이지 않아서 광독성 및 광감작성 시험을 시행하지 않았다. 실험동물을 사용하여 조사한 결과 화장품 원료로서의 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산은 3.0% 이내에서는 사용이 안전함이 증명되었고, 멍게가 미더덕 유래의 콘드로이틴황산에 비교하여 생체반응에 나은 것으로 나타났다.다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권4호
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• pp.646-652
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• 2004

CCD 1108Sk를 이용한 세포 활성을 조사한 결과 Sigma사 제품(Bovine Trachea에서 얻어진 콘드로이틴황산)은 80 $\mu\textrm{g}$/mL에서 높은 활성을 보였으나, 미더덕 및 멍게로부터 추출한 콘드로이틴황산은 400∼600 $\mu\textrm{g}$/mL에서 높은 활성을 보였다. 이러한 활성의 차이는 순도의 차이에 기인하거나 서로 다른 구조에 기인한다고 여겨졌다. 그러나 MDD F2은 1,000 $\mu\textrm{g}$/mL에서 활성이 증가하는 모습이 보였지만 MDD F2는 미약하게 증가하는 모습을 보여 fraction들간에 차이가 있음을 보였다. A 431 주화세포를 이용한 실험에서는 Sigma사 제품과 미더덕과 멍게에서 추출한 crude 콘드로이틴황산의 경우는 CCD 1108Sk에서 보여준 결과와 비슷하였으나, MDD F1과 F2는 모두 600∼1,000 $\mu\textrm{g}$/mL 사이에서 최고의 활성을 보였다. Collagen 한성에 있어서는 bovine trachea, MDD F1과 F2는 조사 범위에서는 특이 활성을 보이지 않았다. 그러나 멍게에서 추출한 콘드로이틴황산의 경우는 100 $\mu\textrm{g}$/mL에서, 미더덕에서 추출한 콘드로이틴황산의 경우는 50 $\mu\textrm{g}$/mL 에서 CCD 1108Sk세포에서 각각 최고의 활성을 보였다. 그러나, A 431세포에서는 검사한 모든 물질에 대하여 특이 반응을 확인할 수 없었다. 자외선 손상에 대한 회복능 조사는 세포 상층액과 세포 자체가 생성한 LDH를 조사한 결과, 멍게와 미더덕에서 추출한 콘드로이틴황산의 경우는 400 $\mu\textrm{g}$/mL에서 CCD 1108Sk 세포의 상층액에서 높은 LDH를 보였으나, 다른 물질의 경우 조사범위에서는 반응을 보이지 않았고, 세포 자체에서도 LDH는 조사 물질간 큰 차이를 나타내지는 않았다. 멍게와 미더덕에서 추출한 crude 콘드로이틴황산의 경우는 400 $\mu\textrm{g}$/mL에서 최고의 활성을 보였다. 전체적으로 멍게에서 추출한 콘드로이틴황산이 미더덕에서 추출한 콘드로이틴황산의 경우보다 세포활성이 높게 나타났다. 그렇지만 두 해양생물로부터 추출한 콘드로이틴황산은 화장품 원료로서의 사용이 가능함이 판명되었다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제23권2호
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• pp.182-186
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• 2000

Chondroitin sulfates proteoglycans were isolated from human placenta. For the identification of enzymatic digestion products of isolated proteoglycan, strong anion exchange-high performance liquid chromatography (SAX-HPLC) was performed. By the action of chondroitin ABC and chondroitin B lyase, three unsaturated disaccharides 2-acetamide-2-deoxy-3-O-($\beta$-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-D-galactose ($\delta$Di-OS), 2-acetamide-2-deoxy-3-O-($\beta$-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-6-O-su lfo-D-galactose ($\delta$Di-6S) and 2-acetamide-2-deoxy-3-O-($\beta$-D-gl uco-4-enepyranosyluronic acid)-4-O-sulfo-D-galactose ($\delta$Di-4S) were produced from the human placenta proteoglycan. The anticoagulant activity of chondroitin sulfate proteoglycan was evaluated by activated partial thromboplastin time (aPTT) assay and thrombin time (TT) assay. The clotting times of aPTT and TT were increased from 72 to 144 sec and 19 to 27 sec, respectively. The Immune-modulating activity of chondroitin sulfate proteoglycan was examined by cell proliferation assay and these results suggest that it may play a role in suppression of the function of immune-related cells.

• 한국식품영양과학회지
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• 제27권2호
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• pp.350-358
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• 1998

The antimutagenic and anticancer activities of glycoprotein(GP) and chondroitin sulfate(CS) from sea cucumbers were studied using Ames mutagenicity test and human cancer cells culture test. The GP's inhibitory effect toward aflatoxin B1(AFB1) and 3, 2'-dimethyl-4-amino-biphenyl(DMAB) increased with the higher added concentrations up to 5% level(w/w) regardless fractionation methods. The GP from sea cucumbers through DEAE-cellulose column chromatography showed an inhibitory effect ranged from 84 to 98%, and the maximum antimutagenicities resulted in red sea cucumber with 98% (AFB1) and 95% (DMAB). But 5% level of CS from various sea cucumbers had an inhibitory effect toward those both indirect mutagens ranged from 79% to 85%. However, in case of direct mutagens(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG and 4-nitroquinoline-1-oxide, 4-NQO), the GP's inhibitory effect was 55∼78% and the CS had a low inhibitory effect(58∼70%) at the added level of 5%. The GP from sea cucumbers exhibited the strong inhibitory effects with 89∼95% and 82∼92% on the growth of HT-29 human crcinoma cells and AZ-521 human gastric cancer cells (at 5% level).

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제13권3호
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• pp.210-215
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• 2010

In an effort to isolate a bacterium producing chondroitin sulfate (CS), a marine bacterium, KS-1, which produces mucopolysaccharides, was isolated from seawater and identified as Marinobacter sp. based on analyses of its morphological and biochemical traits and 16S rDNA sequence. Agarose-gel electrophoresis showed that the KS-1 strain produces a CS-like mucopolysaccharide. Structural analysis using Fourier transform infrared spectroscopy revealed that the structure of the CS-like mucopolysaccharide produced by Marinobacter sp. KS-1 is similar to that of dermatan sulfate (CS B). However, the molecular mass of the CS-like mucopolysaccharide is higher than that of standard chondroitin sulfates. Considering the above results, we conclude that the Marinobacter sp. KS-1 produces a CS-like mucopolysaccharide that differs somewhat from CS B in molecular mass.

• 한국식품영양과학회지
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• 제26권1호
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• pp.72-80
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• 1997

식용 및 약용으로 이용한 역사가 오래인데도 불구하고 구성성분의 조성에 대하여 충분한 연구가 되어 있지 않은 해삼에서 당단백질과 황산콘드로이친을 추출정량하여 이들의 화학적 조성과 구조적 특성을 GC. MS및 IR로 검토하였다. 동결건조 해삼분말의 화학적인 조성은 sulfate esters함량이 0.90~l.21%, 다당류 함량이 23.08~26.97%였고 이를 구성하고 있는 구성단당류는 fucose의 함량이 30%이상을 차지하는 것을 비롯하여 glucose, N-acetylglucosamine, mannuronic acid, ribose의 5종이 거의 88%이상을 차지하고 있었고 그외 mannose, galactose, N-acetylgalactosaminne, D-glucuronic acid도 소량 검출되었다. 추출당단백질의 sulfate esters의 함량은 0.96~l.13%, 다당류의 함량은 58.7%~62.7%로 나타나고 주요 구성당은 fucose가 30%내외로 가장 많았으며 mannose, glucose와 ribose가 86%이상을 차지하며 galactose, N-acetylgalactosamine, D-glucuronic acid, N-acetylglucosamine도 소량 함유하고 있었다. 동결건조 해삼분말에서 추출한 황산콘드이친의 황산기의 함량은 3.52~3.72%이었다. 이들의 구성성분은 fucose, N-acetylgalactosamine 및 D-glucuronic acid 이며 IR spectrum에서 1240$cm^{-1}$ /의 S=0신축진동과 850$cm^{-1}$ /나 820$cm^{-1}$ /의 C-O-S 신축진동이 나타나 fucose의 $C_4$의 결합위치를 나타내고 있었다.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2000년도 춘계총회 및 학술대회
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• pp.144.1-144.1
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• 2000

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권4호
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• pp.872-877
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• 2009

By-products of marine organisms including salmon, skate, flatfish, and yellow goosefish were investigated to search for new source of chondroitin sulfate (CS). Agarose gel electrophoresis with chondroitinase depolymerization showed that purified chondroitin sulfate did not contain any other glycosaminoglycans. 1H-nuclear magnetic resonance (NMR) spectra were acquired to confirm the structure and purity. The average molecular weight ranging from 22 to 64 kDa was determined by high performance size exclusion chromatography. Disaccharide compositions and purities were determined by strong anion exchange-high performance liquid chromatography (SAX-HPLC) after chondroitinase ABC depolymerization. SAX-HPLC data exhibited that the purity was from $81.7{\pm}1.3$ to $114.2{\pm}2.5%$ and the yield was from 1.3 to 12.5%. All analytical results indicate that salmon cartilage, skate cartilage, and yellow goosefish bone could be promising sources of CS to substitute shark cartilage CS in commercial neutraceuticals.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제44권2호
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• pp.140-144
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• 2016

사람의 분변으로부터 분리한 Bacteroides stericoris HJ-15로부터 chondroitinase ABC 유전자를 클로닝하였다. 클로닝한 chondroitinase ABC 유전자는 3,090 bp, 1,029 아미노산으로 구성되어 있었다. B. stercoris chondroitinase ABC 유전자는 이미 보고된 chondroitinase ABC 유전자들과 호몰로지가 없었으나, 아미노산서열에서는 82% 호몰로지를 보였다. T7 promoter를 가진 pET-26b+ expression vector에 클로닝한 chondroitinase ABC 유전자를 Escherichia coli BL21 (DE3)에서 발현하여 정제한 재조합 chondroitinase ABC는 chondroitin sulfate A, B 및 C를 모두 분해하였다.