Resistance to induction of apoptosis is a major obstacle for bladder cancer treatment. Bcl-2 is thought to be involved in anti-apoptotic signaling. In this study, we investigated the effect of Bcl-2 overexpression on apoptotic resistance and intracellular reactive oxygen species (ROS) generation in bladder cancer cells. A stable Bcl-2 overexpression cell line, BIU87-Bcl-2, was constructed from human bladder cancer cell line BIU87 by transfecting recombinant Bcl-2 [pcDNA3.1(+)-Bcl-2]. The sensitivity of transfected cells to adriamycin (ADR) was assessed by MTT assay. Apoptosis was examined by flow cytometry and acridine orange fluorescence staining. Intracellular ROS was determined using flow cytometry, and the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were also investigated by the xanthinoxidase and visible radiation methods using SOD and CAT detection kits. The susceptibility of BIU87-Bcl-2 cells to ADR treatment was significantly decreased as compared with control BIU87 cells. Enhanced expression of Bcl-2 inhibited intracellular ROS generation following ADR treatment. Moreover, the suppression of SOD and CAT activity induced by ADR treatment was blocked in the BIU87-Bcl-2 case but not in their parental cells. The overexpression of Bcl-2 renders human bladder cancer cells resistant to ADR-induced apoptosis and ROS might act as an important secondary messenger in this process.
Leaves of two-week old seedlings of tomato (Lycopersicon esculentum) were treated with various concentrations (0∼100 M) of $CdCl_2$ for up to 9 days and subsequent growth of seedlings, symptoms of oxidative stress and isozyme activities of antioxidant enzymes including superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), ascorbate peroxidase (APX) and peroxidase (POX) were investigated. Compared with the non-treated control, Cd exposure decreased biomass but increased Cd accumulation, hydrogen peroxide production and lipid peroxidation as malondialdehyde (MDA) formation in leaves and roots. Further studies on the developmental changes of isozyme activities showed that Fe-SOD, Cu/Zn-SOD and one of three APX isozymes decreased and CAT and one of four POX isozymes increased in leaves, whereas Fe-SOD, one of three POX isozymes and two of four APX isozymes decreased and CAT increased in roots, showing different expression of isozymes in leaves and roots with Cd exposure level and time. Based on our results, we suggest that the reduction of seedling growth by Cd exposure is the oxidative stress resulting from the over production of $H_2O_2$ and the insufficient activities of antioxidant enzymes particularly involved in the scavenging of $H_2O_2$. Further, the decreased activities of SOD and APX isozymes of chloroplast origin, the increased activities of CAT and POX and high $H_2O_2$ contents with Cd exposure might indicate that Cd-induced oxidative stress starts outside chloroplast.
Skin is constantly exposed to air, solar radiation, ozone and other air pollutants formulating free radicals. The reactive oxygen species(ROS), formed under these conditions, are associated with skin cancers, cutaneous photoaging, and cutaneous inflammatory disorders. In this study, we sought to establish an animal model for UVB-induced skin alteration using BALB/c mice. The level of UVB irradiation used in this model was within physiological dose. BALB/c mice were exposed to a single dose of UVB ($200mJ/cm^2$ and were sacrificed at 3, 6, 24, and 48 hours following the irradiation. The effect of a single exposure to UVB irradiation on skin catalase(CAT), superoxide dismutase(SOD), and glutathione peroxidase(GPx) activities were examined. Significant decrease in the activity of all enzymes were observed at 6 hours after irradiation(p<.05). The activity of CAT decreased more sharply than those of SOD and GPx, and then remained depressed until 48 hours after UVB irradiation, whereas the activity of GPx recovered to basal level at 48 h after UVB irradiation. Our results indicate that BALB/c mouse could be an adequate animal model of UVB irradiation experiment. These results will also provide fundamental knowledge for the effective nursing strategies in reducing UV-induced skin disorders.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.33
no.3
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pp.435-440
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2016
This study was carried to investigate the antioxidative effect of ethanol extract of Arctium lappa(Al) root in Streptozotocin(STZ)-induced diabetic rats. Diabetes was induced by intravenous injection of STZ at a dose of 45mg/kg.body wight(b.w) dissolved in citrate buffer. The ethanol extract of Al root was orally administrated once a day for 7 days at a dose of 1,000mg/kg.b.w. The contents of malondialdehyde(MDA) and activities of catalase (CAT), glutathione peroxidase(GSH-Px) were significantly decreased(p<0.05) in Al treated group compared to the those of STZ-control group. The content of glutathione(GSH) and activity of glutathione-s-transferase(GST) was significantly increased(p<0.05). These results indicated that ethanol extract of Al root would have antioxidative effect in STZ-induced diabetic rats.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.21
no.6
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pp.1520-1524
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2007
The purpose of this study was to investigate the effects of Houttuynia cordata Thunb and Oriental Herb Mixture Extract (HCTM) through anti-oxidation against the hepatotoxicity-inducing lipopolysaccharide (LPS) in HCTM and LPS-treated rats. HCTM of 100 mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5 ml/kg for 20 days. On the day 21, 1.5 ml/kg of LPS was injected 5 hours before anesthetization. The activity of superoxide dismutase (SOD) was measured in mitochondrial fraction and malondialdehyde (MDA), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) were measured in liver homogenate. LPS-treatment markedly increased the levels of MDA and significantly decreased those of SOD, CAT and GPx. But HCTM pretreatment significantly increased those of SOD, CAT and GPx by 86.9%, 57.2% and 72.7% respectively. Moreover HCTM pretreatment decreased the levels of MDA. These results showed the HCTM had the effects against the hepatotoxicity-inducing LPS in the anti-oxidation. This suggested that HCTM could be used for functional beverage.
This study was performed to investigate the antioxidative effect of Ligusticum chuanxiong Hort extracts (LCE) against the hyperlipidemia of high-fat diet-fed obese rats. The rats were divided into the three groups (normal group, control group and sample group) to perform the experimental research. 1.5 ml/kg of LCE was intraperitoneally administered into the sample group for 21 days. The equal dose of 0.9% saline was intraperitoneally administered into the normal group and the control group. On day 22, they were anesthetized with ether and dissected. The levels of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) were examined in serum of rats. Superoxide dismutase (SOD) was measured in mitochondrial fraction. Malondialdehyde (MDA), catalase (CAT), and glutamate peroxidase (GPx) were determined in liver homogenate. High-fat diet markedly increased the levels of AST, ALT and MDA, significantly decreasing those of SOD, CAT and GPx. But Ligusticum chuanxiong Hort-pretreatment decreased the levels of AST, ALT, and MDA. increasing those of SOD, CAT and GPx. These results demonstrated the antioxidative effects, suggesting that LCE could be the candidate for the functional material.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.6
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pp.1524-1529
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2006
The fruits of Cornus officinalis have been used in traditional Oriental medicine for treatment of inner ear diseases, such as tinnitus and hearing loss. In the present study, we showed that the ursolic acid obtained from Corni fructus protected HEI-OC1 auditory cells from hydrogen peroxide cytotoxicity in a dose-dependent fashion. In addition, to investigate the protection mechanism of ursolic acid on hydrogen peroxide cytotoxicity toward HEI-OC1, we measured the effects of ursolic acid on lipid peroxidation and activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPX) in hydrogen peroxide treated cells. Ursolic acid (0.05 - 2 ${\mu}g/ml$) had protective effect against the hydrogen peroxide-induced HEI-OC1 cell damage and reduced lipid peroxidation in a dose-dependent manner. Pre-treatment with ursolic acid significantly attenuated the decrease in activities of CAT and GPX, but SOD activity was not affected by the ursolic acid or hydrogen peroxide. These results indicate that ursolic acid protects hydrogen peroxide-induced HEI-OC1 cell damage through inhibition of lipid peroxidation and induce the antioxidant enzymes CAT and GPX.
Cadmium is a strong toxic heavy metal which presents in paints and liquid wastes and causes oxidative stress in fish. On the other hand, lead is widely used for different purposes, e.g. lead pipes, it targets vital organs such as liver and kidney causing biochemical alterations. The present study evaluates the effects of 60 days exposure to Cd and Pb either single or combined together in African catfish. Sixty-four fishes were divided into 3 groups and exposed to $CdCl_2$ (7.02 mg/L) or $PbCl_2$ (69.3 mg/L) or a combination of them along with control group. Activities of acid phosphatase (ACP), lactate dehydrogenase (LDH) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-PDH) were estimated. Moreover, gill, liver and kidney were assayed for activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and levels of glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA). Individual exposure showed that both Cd and Pb significantly decreased LDH activity and SOD activity in the kidney. Pb significantly increased G-6-PDH activity and decreased GSH level in the gill. CAT activity in liver and kidney elevated significantly on Cd exposure while lead caused a significant depletion in the liver and significant elevation in the kidney. Both Cd and Pb significantly increased MDA levels in liver and kidney while Pb increased its level in gills. The combined exposure resulted in normalization of LDH, G-6-PDH activity, and CAT activity in liver and kidney as well as GSH level in both tissues and MDA in gill and kidney. The combination increased SOD activity and MDA level in liver and decreased SOD activity in kidney and GSH level in gills. In conclusion, the antioxidant system of African catfish was adversely affected by prolonged exposure to Cd and Pb. The combined exposure caused less damage than individual exposure and returned most parameters to those of controls.
The effect of catalase on in-vitro maturation in porcine oocytes with or without cumulus cells were studied. The maturation rates were not significantly different in medium with and without catalase during in vitro maturation of oocytes. However, the maturation rates of oocytes with cumulus cells were significantly higher (P<0.05) than in oocytes without cumulus cells regardless of the presence of catalase. On the other hand, the maturation rate in oocytes cultured with cumulus cells for 48 h (57%) was significantly (P<0.05) higher than in oocytes with cumulus cells for first 24 h period (42%) only. In another experiment, the maturation rate was significantly (P<0.05) higher in medium containing catalase for last 24 h period only than in medium containing catalase for first 24 h period during in vitro maturation of ooytes with or without cumulus cells. But the oocytes matured to M-II stage were observed at 24 h of culture of oocytes without cumulus cells only. When oocytes with cumulus cells were cultured for 72 h, the maturation rates was significantly (P<0.05) higher in medium with (79%) than without (65%) catalase during in vitro maturation. These results indicate that cumulus cells are necessary for in vitro maturation of porcine oocytes, catalase have effect according to the addition periods and can prevent aging of porcine oocytes during maturation in vitro.
Background: To assess the antioxidant effects of gamma-oryzanol on human prostate cancer cells. Materials and Methods: Cytotoxic activity of gamma-oryzanol on human DU145 and PC3 prostate cancer cells was determined by proliferation assay using 3-(4, 5-dimethylthiazol, 2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reagent. mRNA levels of genes involved in the intracellular antioxidant system, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPX) and glutathione reductase (GSR) were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Cancer cell lysates were used to measure lipid peroxidation using thiobarbituric acid reactive substance (TBARS). Glutathione contents of the cell lysates were estimated by the reaction between sulfhydryl group of 5, 5'-dithio (bis) nitrobenzoic acid (DTNB) to produce a yellow-color of 5-thio-2-nitrobenzoic acid using colorimetric assay. Catalase activity was also analysed by examining peroxidative function. Protein concentration was estimated by Bradford's assay. Results: All concentrations of gamma-oryzanol, 0.1-2.0mg/ml, significantly inhibited cell growth in a dose- and time-dependent fashion in both prostate cancer cell lines, DU145 and PC3. Gene expression of catalase in DU145 and PC3 exposed to gamma-orizanol at 0.5mg/ml for 14 days was down regulated, while mRNA of GPX was also down regulated in PC3. The MDA and glutathione levels including catalase activity in the cell lysates of DU145 and PC3 treated with gamma-oryzanol 0.1 and 0.5mg/ml were generally decreased. Conclusions: This study highlighted effects of gamma-oryzanol via the down-regulation of antioxidant genes, catalase and GPX, not cytotoxic roles. This might be interesting for adjuvant chemotherapy to make prostate cancer cells more sensitive to free radicals. It might be useful for the reduction of cytotoxic agents and cancer chemoprevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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