It is extremely important to destroy the antigenicity of milk proteins for dietetic treatment of infants with milk allergy. Enzymatic digestion of milk protein is not only effective for destroying antigenicity, but it also is less liable to alter the nutritive value. Bovine casein was hydrolyzed with eight different commercial proteases derived from bacterias or fungi, either individually or in combination to eliminate protein allergenicity. The average molecular weight of casein hyrdolysates determined by size exclusion chromatography is about 550${\sim}$2,300 dalton range. Antigenicity of the casein hyrdolysates was not detected by heterologous passive cutaneous anaphylaxis in guinea pig-rabbit antiserum system. The inhibition test on the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) showed that the antigenicity of casein hydrolysates is lowed up to 1/8,000 than that of intact bovine casein. As the enzyme reaction was carried out by the combination of bacterial and fungal protease, casein hydrolysates showed much lower bitterness and antigenicity. It suggests that these hydrolysates will be applied to many kinds of foods including the development of hypo-allergenic infant formula.
Lee Sang-Hoon;Lee Ki-Won;Kim Do-Hyun;Lee Dong-Gi;Won Sung-Hye;Kim Ki-Yong;Lee Byung-Hyun
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.26
no.2
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pp.69-76
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2006
To optimize tissue culture responses for genetic transformation of Kentucky bluegrass, the effects of culture medium supplements on tissue culture responses were investigated with mature seeds of a cultivar 'Newport' as explant tissues. The optimal concentration of 2,4-D (2.4-dichloro phenoxy acetic acid) for the induction of embryogenic callus from mature seed was 3 mg/L. Plant regeneration frequency was 54% when embryogenic callus was cultured on the regeneration medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L of BA (6-benzyladenine). Addition of 1 g/L of casein hydrolysate and 500 mg/L of L-proline improved frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 60.8% and 58.3%, respectively. Regenerated plants were grown normally when shoots transplanted to the soil. A rapid and efficient plant regeneration system established in this study. We suggest that the results may be useful for molecular breeding of Kentucky bluegrass through genetic transformation.
Kim, Joo-Hee;Park, Ju-Yeon;Hong, So-Young;Kim, Mi-Kyung
Nutrition Research and Practice
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v.3
no.3
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pp.200-207
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2009
This study examined the effects of com gluten (CG) and its hydrolysate consumptions on weight reduction in rats fed a high-fat diet. Eight-month-old male Sprague-Dawley rats (n=40) were fed a high-fat diet (40% calorie as fat) for 4 weeks. They were then randomly divided into four groups and fed the isocaloric diets with different protein sources for 8 weeks. The protein sources were casein (control group), intact CG (CG group), CG hydrolysate A (CGHA group, 30% of protein as peptides and 70% as free amino acids) and CG hydrolysate P (CGHP group, 93% of protein as peptides and 7% as free amino acids). Body weight gain, adipose tissue weights, nitrogen balance, absorptions of energy, protein and fat, lipid profiles in plasma, liver and feces and hepatic activities of camitine palmitoyl transferase (CPT), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) were assessed. The CGHA diet had the highest amount of BCAAs, especially leucine, and most of them existed as free amino acid forms. The CGHA group showed significant weight reduction and negative nitrogen balance. Protein absorption and apparent protein digestibility in the CGHA group were significantly lower than those in other groups. Adipose tissue weights were the lowest in the CGHA group. Activity of CPT tended to be higher in the CGHA group than in other groups and those of FAS, ME and G6PDH were significantly lower in the CGHA group than in other groups. In conclusion, the CGHA diet which had relatively high amounts of free amino acids and BCAAs, especially leucine, had a weight reduction effect by lowering adipose tissue weight and the activities of FAS, ME and G6PDH in experimental animals, but it seemed to be a negative result induced by lowering protein absorption, increasing urinary nitrogen excretion and protein catabolism.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1992.05a
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pp.25-25
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1992
1.형질전환 조건 설정: 페염균을 casein hydrolysate배지에서 배양하여 550nm에서의 흡광도가 0.1이 되었을 때 pH를 7.0으로 낮추고 형질전환 능력이 나타나도록 할 때에는 pH를 7.6으로 높여 줌으로써 형질전환이 원하는 시기에 발현되도록 함. 2.돌연변이원에 대한 감수성 측정: com- mutant는 야생형보다 돌연변이가 일어난 위치에 따라 UV에 대한 감수성의 차이가 나타났으나 EMS에 대해서는 야생형과 큰 차이가 얼었음. 3.온도민감성: 5시간동안 43$^{\circ}C$에서는 37$^{\circ}C$에서의 생장율의 5%만 증가되었으나 5$0^{\circ}C$에서는 전혀 성장하지 않음.
Kim, Joo-Hee;Lee, Hyo-Jung;Kim, Ji-Yeon;Kim, Mi-Kyung;Kwon, O-Ran
Preventive Nutrition and Food Science
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v.17
no.3
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pp.223-227
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2012
This study examined the effects of corn gluten (CG), wheat gluten (WG), and soybean protein isolate (SPI), as well as their hydrolysates, on weight reduction in rats fed a high-fat diet. Eight-month-old male Sprague-Dawley rats (n=70) were fed a high-fat diet (40% of the calories were fat) for 4 weeks. Rats were then randomly divided into seven groups and were fed isocaloric diets with different protein sources for 8 weeks. The protein sources were casein (control group), intact CG (CG group), CG hydrolysate (CGH group), intact WG (WG group), WG hydrolysate (WGH group), intact SPI (SPI group), and SPI hydrolysate (SPIH group). Body weight gain, adipose tissue weights, lipid profiles in plasma and liver; and hepatic activities of carnitine palmitoyl transferase, fatty acid synthase (FAS), malic enzyme, and glucose-6-phosphate dehydrogenase were assessed. The CGH group showed significant weight reduction compared with the other groups. Epididymal fat pad and plasma triglycerides in the CGH group were the lowest and were significantly different than those in the control group. FAS activity in the CGH group was significantly lower than that in the other groups. In conclusion, the CGH diet of these experimental animals demonstrated a weight-reducing effect by lowering the adipose tissue weight and by affecting the activities of hepatic lipogenic enzymes.
In order to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of orchardgrass (Dactylis glomerata L.), the effects of culture medium supplements on tissue culture responses were investigated with mature seeds of a cultivar, 'Roughrider', as explant tissues. The optimal concentration of 2,4-D for the induction of embryogenic callus from mature seeds was 3 mg/L. Plant regeneration frequency was 36.3% when embryogenic calli were cultured on the regeneration medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 3mg/L BA. Addition of 1 g/L casein hydrolysate and 300 mg/L L-proline improved frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 57.3 and 60.7%, respectively. Supplementation of the media with 10 mga $\textrm{AgNO}_3$ and 40 mg/L cysteine enhanced frequencies of callus induction and plant regeneration. Efficient regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of orchardgrass through genetic transformation.
Leaf mesophyll protoplasts of Dianthus superbus were cultured in MSP1 liquid medium supplemented with 0.5 mg/L BAP, 2.0 mg/L NAA and 9% mannitol. Protoplast-derived colonies were formed after 3 to 4 weeks of culture in the dark at 27$^{\circ}C$. These colonies were kept under continuous illumination (21.5 $\mu$E. m-2 sec-1) for 2 weeks and finally most of the colonies became green microcalli, about 3 mm in diameter. When green microcalli were transferred to MS solidified medium with 2.0 mg/L 2,4-D, they formed embryogenic calli after 4 week of culture. These calli were then transferred onto $N_{6}$ medium containing 0.1mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA, 2.0 mg/L kinetin and 2.0 g/L casein hydrolysate and cultured under illumination. After 5 weeks of culture the calli gave rise to multiple shoots of 10 to 15 per callus. Upon transfer onto MS medium containing 2.0 mg/L NAA, they were noted. The regenerates were successfully transplanted into potting soil.
Kim, Myoung-Dong;Lee, Woo-Jong;Park, Kwan-Hwa;Rhee, Ki-Hyeong;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.2
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pp.273-278
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2002
Two-step fed-batch fermentations were carried out to overproduce Bacillus licheniformis maltogenic amylase (BLMA) in recombinant Escherichia coli. The first step was to increase the cell mass by controlling the feeding of a glucose solution, while the second step was designed to improve the amylase expression efficiency by supplementing organic nitrogen sources. The linear gradient feeding method was successfully adopted to maintain the glucose concentration below 0.2 g/l during the fed-batch mode, as effectively minimizing acetic acid formation. When the dissolved oxygen (DO) level became limiting, an accumulation of acetic acid and drastic decrease in specific BLMA productivity were observed. Glucose and organic nitrogen sources consisting of yeast extract and casein hydrolysate were simultaneously supplied in the pH-stat mode to further increase the specific BLMA expression efficiency. An organic nitrogen source consisting of 200 g/1 yeast extract and 100 g/1 casein hydrolysate was found to be the best among the various combinations tested. The feeding of an organic nitrogen source in the second-step fed-batch period was highly beneficial in enhancing the BLMA production. The optimized two-step fed-batch culture resulted in 78 g/l maximum dry cell mass and 443 U/ml maximum BLMA activity, corresponding to 1.5-fold increase in the dry cell mass and 3.7-fold enhancement in BLMA production, compared with the simple fed-batch fermentation.
Sleep is the most basic and essential physiological requirement for mental health, and sleep disorders pose potential risks of metabolic and neurodegenerative diseases. Tryptic hydrolysate of ${\alpha}_{S1}$-casein (${\alpha}_{S1}-CH$) has been shown to possess stress relieving and sleep promoting effects. However, the differential effects of ${\alpha}_{S1}-CH$ on electroencephalographic wave patterns and its effects on the protein levels of ${\gamma}$-aminobutyric acid A ($GABA_A$) receptor subtypes in hypothalamic neurons are not well understood. We found ${\alpha}_{S1}-CH$ (120, 240 mg/kg) increased sleep duration in mice and reduced sleep-wake cycle numbers in rats. While ${\alpha}_{S1}-CH$ (300 mg/kg) increased total sleeping time in rats, it significantly decreased wakefulness. In addition, electroencephalographic theta (${\theta}$) power densities were increased whereas alpha (${\alpha}$) power densities were decreased by ${\alpha}_{S1}-CH$ (300 mg/kg) during sleep-wake cycles. Furthermore, protein expressions of $GABA_A$ receptor ${\beta}_1$ subtypes were elevated in rat hypothalamus by ${\alpha}_{S1}-CH$. These results suggest ${\alpha}_{S1}-CH$, through $GABA_A$ receptor modulation, might be useful for treating sleep disorders.
Ha, Go Eun;Chang, Oun Ki;Han, Gi Sung;Ham, Jun Sang;Park, Beom-Young;Jeong, Seok-Geun
Food Science of Animal Resources
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v.35
no.3
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pp.360-369
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2015
Milk proteins have many potential sequences within their primary structure, each with a specific biological activity. In this study, we compared and investigated the bioactivities of hydrolysates of the domestic (A, B) and imported (C, D) skim milk powders generated using papain digestion. MALDI-TOF analysis revealed that all milk powder proteins were intact, indicating no autolysis. Electrophoretic analysis of hydrolysates showed papain treatment caused degradation of milk proteins into peptides of various size. The antioxidant activity of the hydrolysates, determined using 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) and total phenolic contents (TPC) assays, increased with incubation times. In all skim milk powders, the antioxidant activities of hydrolysates were highest following 24 h papain treatment (TPC: A, 196.48 μM GE/L; B, 194.52 μM GE/L; C, 194.76 μM GE/L; D, 163.75 μM GE/L; ABTS: A, 75%; B, 72%; C, 72%; D, 57%). The number of peptide derived from skim milk powders, as determined by LC-MS/MS, was 308 for A, 283 for B, 208 for C, and 135 for D. Hydrolysate A had the highest antioxidant activity and the most potential antioxidant peptides amongst the four skim milk powder hydrolysates. A total of 4 β-lactoglobulin, 4 αs1-casein, and 56 β-casein peptide fragments were identified as potential antioxidant peptides in hydrolysate A by LC-MS/MS. These results suggest that domestic skim milk could have applications in various industries, i.e., in the development of functional foods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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