Intra-articular injection of ELHLD peptide is considered to have a therapeutic effect in osteoarthritis (OA) through the inhibition of transforming growth factor-β1. This study aimed to assess the efficacy of intra-articular injections of high-dose ELHLD peptide (100 ㎍/kg) in canine stifle OA. Six client-owned dogs diagnosed with stifle OA were included. Selected dogs were treated with an intra-articular injection of high-dose ELHLD peptide (100 ㎍/kg). Outcome measures, including orthopedic examination, gait analysis, and Canine Brief Pain Inventory (CBPI) score, were evaluated four times after injection. Orthopedic examination, gait analysis, and owner's assessment (CBPI) improved significantly from 4 weeks after injection. In conclusion, we obtained sufficient evidence from this small sample that high-dose ELHLD peptide improves clinical signs of canine OA not only through subjective assessment but also through objective evaluation.
Kim, Dongyub;Jeong, Seong Mok;Kwon, Youngsam;Yun, Sungho
한국임상수의학회지
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제36권4호
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pp.200-206
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2019
This study was performed to assess the anti-inflammatory and cartilage regenerative effects of platelet-rich plasma (PRP) on canine chondrocytes. Proliferation and migration assays under both normal and lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory conditions were performed with various concentrations of PRP (1% to 10%). The expression levels of genes related to osteoarthritis were evaluated in the following groups: PRP group, LPS group and LPS + PRP group. mRNA expression levels were detected using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). Proliferation assays showed significantly enhanced proliferation in all PRP-treated groups compared with the no serum group. Compared with 10% fetal bovine serum (FBS), PRP concentrations above 3% in the normal condition and 1% to 7% PRP in the LPS-induced inflammatory condition were found to significantly promote chondrocyte proliferation. In the normal condition, all PRP-treated groups showed significantly increased cell migration compared with the no serum group. Chondrocyte migration was decreased with LPS-induced inflammation, but PRP treatment resulted in significantly enhanced migration compared with the other groups in this condition. According to RT-PCR, the LPS + PRP group showed significantly higher levels of COL1A1, IL-6, aggrecan and lower levels of $TNF-{\alpha}$, MMP-1, MMP-3 mRNA expression compared to the LPS group. The results of this study suggest that PRP application can enhance the proliferation and migration of canine chondrocytes and improve canine articular cartilage regeneration.
Apoptotic death of articular chondrocytes has been implicated in the pathogenesis of osteoarthritis. Tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) has been used for several years as a marker enzyme of bone-resorbing osteoclasts. This study investigated the activity of TRAP in media of apoptotic cell death-induced canine chondrocyte. We exposed canine chondrocyte to capsaicin and the results showed that capsaicin induced cell death in a dose dependent manner. And we measured TRAP activity in media of chondrocyte death induced by capsaicin treatment and the results capsaicin significantly increased the activity of TRAP in media for dose dependent. We also investigated whether the combination treatment with capsaicin and TRAIL enhance apoptotic cell death in canine chondrocyte. We exposed canine chondrocyte to capsaicin for 24 hrs at the indicated dose, and then treated with recombinant TRAIL protein for 24 hrs. TRAIL alone did not induce cell death after 24 hours, but the combined treatment of both induced more cell death compared with capsaicin alone in a dose dependent manner. Also, the combination treatment with capsaicin and TRAIL increased the activity of TRAP in culture media. These results suggest that TRAP can flow out into extracellular after chondrocyte damage, and TRAP may be a successful biomarker for detection of joint disease such as osteoarthritis.
개에서 방사선 검사로 확진한 둔부 골관절염 증례에 대하여 hyaluronic acid의 관절강내 주사 및 caprofen의 경구투여를 2주간 치료를 하였으나, 임상증상이 개선되지 않았다. 봉독 수침요법(5일 간격, 7회)과 압통점 치료를 병용하였다. 수침에 사용된 혈위는 이환 된 우측 환지의 5개 혈위를 사용하였다: GB30(국소혈), ST35, GB33, BL40 및 LIV08(원위혈). 수침재료(0.2 ml/혈위, 전체 1 ml/회)는 apitoxin $100{\mu}g+2%$ 리도카인 (1:1)+생리식염수로 제조하였고, 5개 혈위에 각각 0.2 ml씩 수침하였다. 또한 우측 환지의 대퇴사두근의 압통점에 2% 리도카인(0.2ml/압통점)을 매회 치료 시 각각 수침하였다. 봉침 수침 요법은 임상증상을 급속하게 개선시켰는데, 파행 및 보행실조가 7회 치료(30일) 후 소실되었으며, 우측 후지의 근육 위축이 많이 호전되었고, 치료 종료 2주 후(44일)에 방사선 검사 상 환부는 거의 정상소견을 나타내었다. 본 환축은 봉독 수침 요법과 압통점 치료의 병용으로 양호한 치료반응을 나타난 개의 둔부 골관절염의 증례이었다.
퇴행성관절염(Osteoarthritis,OA)은 관절 부위의 퇴행성 변화가 특징이며, 이를 진단하기 위해서는 연골세포나 활액에서 유래된 표지인자가 일반적으로 사용된다. 이번 연구에서는 개를 이용하여 실험적으로 퇴행성관절염을 유도하고, 활액과 연골세포에서 단백질 분해 효소인 matrix metalloproteinase(MMPs)와 MMPs의 활성을 억제시키는 것으로 알려진 tissue inhibitors of metalloproteinases(TIMPs)의 발현 정도를 조사하였다. 20마리의 비글견이 퇴행성관절염 모델로 사용되었으며 MMP-2 와 -9은 Western blot 분석에 의해서, TIMP-2의 농도는 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assays)에 의해 결정하였다. 퇴행성관절염 유도 4주 후에 연골에서 분리한 연골세포에서 MMP-2의 발현은 증가되었지만 MMP-9의 발현은 감소되었다. 그러나, 퇴행성관절염을 유도한 개의 활액에서는 MMP-2와 -9의 발현이 모두 증가하는 것을 보였다. TIMP-2의 농도는 퇴행성관절염을 유도한 연골에서 분리한 연골세포에서는 높았지만, 활액에서는 낮은 농도를 보였다. 이러한 결과는 MMP-9가 퇴행성관절염 시 연골 조직의 변성에 따른 연골세포의 손상에 의해 MMP-2보다 더 활액으로 방출된다는 것을 보여주며, 활액 내 TIMP-2의 감소에 따른 MMPs의 활성이 퇴행성관절염을 더욱 악화시키는 것을 제안해준다. 결국 MMPs의 활성은, 특히 MMP-9, 개의 퇴행성관절염의 조기 진단과 치료를 위한 표지인자로서 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
Background: The TightRope System is a device developed to provide extracapsular stabilization of the cranial cruciate ligament (CCL) rupture in canine stifles. I was then also employed for the extra-articular treatment of shoulder instability and for the intra-articular treatment of hip luxation in dogs and cats. Objectives: To evaluate the feasibility of the Mini-TightRope (mTR) System for the intraarticular treatment of CCL rupture in small breed dogs. Methods: A cadaveric canine model was used to record the steps of the surgical procedure. Five client owned dogs weighing from 8 to 10 kg and from 2 to 12 years of age were enrolled in the prospective study in which the mTR device was implanted in the stifle joint to replace the ruptured CCL. The dogs were graded using the Bologna Healing Stifle Injury Index (BHSII) and radiographic osteoarthritis (OA) scores. Results: The outcomes obtained at the time of the surgery (T0) and for the following 12 months (T12) showed an improvement in the functional parameters (BHSII from a median of 74.3 [range, 58.1-82.4] at T0 to 95.6 [range, 94.1-99.3] at T12]). The OA did not change in 3 dogs and increased by only 1 point in 2 dogs. Conclusions: In this preliminary study, the mTR was a successful and repeatable intraarticular surgical procedure for all dogs. Additional studies related to the clinical application of the technique in medium-large dogs should be encouraged.
본 연구는 개에서 수술적으로 짧은 기간 동안 관절의 불안정성을 최대로 유도하여 수술후 운동 없이 관절의 퇴행성 변화의 유무 및 정도와 골관절염 모델로 적합한지를 평가 하였다. 10두의 비글견을 본 실험에 사용하였다. 실험군은 오른쪽 무릎관절의 앞십자인대 및 내측 곁인대의 절제와 내측 반월 연골 절제술을 시행하였으며, 왼쪽 무릎관절을 대조군으로 사용하였다. 수술 12주 후 연골의 손상, 윤활막의 염증 정도와 윤활액의 생화학적 변화를 평가 하였다. 조직 검사에서 연골의 비후, 연골 세포의 분화, 프로테오글리칸의 소실 및 윤활막의 염증이 대조군과 비교하여 유의성 있는 증가가 관찰되었다. 윤활액의 생화학적 검사에서 유의성 있게 증가된 MMP-2, -9의 농도를 실험군에서 관찰 하였다. 이상의 결과로부터 본 연구에 수행한 관절염 모델은 골관절염 유도가 가능하며, 술후 운동으로 소모되는 시간 및 비용을 줄 일수 있는 장점 있어 골관절염 모델로서 유용하게 활용될 것으로 판단된다.
Park, Se-il;Bae, Jae-sung;Kwon, Young-sam;Jang, Hwan-soo;Li, Wen-xue;Lim, Jae-hyun;Eom, Ki-dong;Kim, Jung-eun;Jang, Kwang-ho
한국임상수의학회지
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제20권3호
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pp.278-285
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2003
개에서 실험적으로 앞쪽 십자인대 중간부를 절단한 다음 초기 병변을 관찰하고 그 초기 병변에 대한 conjugated linoleic acid (CLA), carprofen 그리고 두 약물의 병용에 따른 효과를 비교하고자 본 실험이 수행되었다. 실험견은 앞쪽 십자인대를 파열한 CLA 처치군, Carprofen 처치군, CLA와 Carprofen 병용처치군 그리고 양성대조군과 파열하지 않은 정상견으로 구성된 음성대조군으로 총 5개군으로 분류하고 각 군에 5두씩 배치하였다. 실험견의 무릎관절 외측 피부를 절개하고 관절낭 외측을 절개한 다음 앞쪽 십자인대 중간부로 판단되는 부위를 절단하였다. Carprofen과 CLA는 수술 후 4주부터 4주 동안 경구 투여하였다 수술후 8주 후에 육안적, 조직학적 평가를 실시하였다. 조직학적 검사로는 hematoxylin and eosin 염색, standard toluidine blue, PAS 그리고 Masson trichrome 염색법을 이용하였으며 혈액학적, 그리고 방사선학적 검사를 실시하였다. 조직학적 검사와 혈액학적 검사에서 유의적인 변화는 나타나지 않았다. 방사선 검사에서는 앞쪽 십자인대 파열에 따른 대퇴골과 경골의 정렬이상과 부종이 모든 군에서 나타났으며 육안적 검사에서는 대부분 실험견의 대퇴 연골 표면상이 엷은 황색을 보였다. 이상의 결과를 통하여 실험적으로 유발된 개의 앞쪽 십자인대 파열에 대해 CLA, carprofen그리고 이들의 합제는 초기 변화상에서 뚜렷한 변화를 나타내지 않았다.
관절염은 증상 발현 이후 치료 효과가 매우 더디게 나타나기 때문에 조기 발견과 그에 따른 적절한 처치가 무엇보다도 중요하다. 따라서 많은 연구자들은 관절염 질환모델을 통한 조기 진단 인자의 발견을 위해 그 동안 지속적으로 연구해 오고 있는 실정이다. 개에서 고관절 탈구와 이형성은 정형외과에서 흔한 질병으로 고관절의 관절염과 관련이 있는 것으로 알려져 있다. 관절염 유발을 위해서는 흔히 대퇴골두인대의 절단이 필요한데 이는 대퇴골두인대의 절단을 통해 관절의 움직임을 극대화 시키기 위한 방법이다. 지금까지 유발 관절염에 대한 관절액의 분석을 위해서 프로테오믹스를 이용한 연구는 매우 드물다. 실험동물은 열 마리의 건강한 수컷 비글견을 사용하였으며, 나이는 2-3세 (평균 $2.57{\pm}0.20$ 살), 몸무게는 10 - 16kg (평균 $11.90{\pm}1.68 kg$) 이었다. 실험 기간 동안 방사선검사, 일반혈액검사, 혈청화학검사상 특이사항이 없었다. 실험동물은 술 후 평균 일주일에 보행을 하였다. Proteomic 검사 상, 관절액의 단백질 변화가 보여졌으며 단백질의 변화의 유의성검증을 위해 ANOVA (p < 0.05)테스트를 실시하였다. 실험 결과로는 프로테오믹스 검사에서는2개의 단백질 점(Vitamin D-binding protein precursor, ANOVA (p < 0.004); Kinogen-1, ANOVA (p < 0.039))이 유의성 있게 증가되는 모습이 확인하였다(ANOVA (p < 0.05)). 이 두 단백질은 류마티스 관절염, 혹은 퇴행성 관절염에서도 증가하는 경향이 있는 것으로 알려져 있다. 이 실험에서 관절염 유발 방법으로 이용한 대퇴골두인대의 절단은 관절염 유발에 적절한 모델이었으며 또한 고관절에서 관절액 단백질의 변화를 유도할 수 있는 적합한 방법이라고 생각된다. 따라서 관절염 유발 모델에서 프로테오믹스를 이용한 관절액 변화의 관찰은 실제 임상에 있어서 관절염 조기 진단방법으로 매우 유용성이 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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