Objectives: This study was performed to assess the protective effect of Polygonum multiflorum(PM) on UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes damage. Methods: The protective effects of Polygonum multiflorum(PM) were determined by UVB-irradiated HaCaT assay. We assessed protective effects of Polygonum multiflorum(PM) on LDH release and nitrite production from HaCaT. COX-2, Bcl-2, Bax, $TNF{\alpha}$, c-jun, c-fos, NF-${\kappa}B$, iNOS, Bcl-xL gene expression were determined in HaCaT using real-time PCR method. Results: 1. PM inhibited LDH Release in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 2. PM inhibited Nitrite Production in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 3. PM suppressed the Gene Expression of COX-2 in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 4. PM increased the Gene Expression of Bcl-2 in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 5. PM didn't increase the Gene Expression of Bax in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 6. PM suppressed the Gene Expression of $TNF{\alpha}$ in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 7. PM suppressed the Gene Expression of c-jun in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 8. PM suppressed the Gene Expression of c-fos in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 9. PM suppressed the Gene Expression of NF-${\kappa}B$ in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 10. PM suppressed the Gene Expression of i-NOS in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes. 11. PM didn't increase the Gene Expression of Bcl-xL in UVB-irradiated HaCaT Keratinocytes Conclusions: In conclusion, these results suggest that PM inhibited the cell damage in UVB-irradiated HaCaT.
Ral GDP dissociation stimulator (Ral GDS) has been found to be an effector protein of Ras, and Ral, a member of small GTP-binding protein (G protein) superfamily, has been suggested to act downstream of Ras. Ral GDP dissociation stimulator-like (RGL) shares 50% amino acid identity with Ral GDP dissociation stimulator, and assumed to possess similar functional role. Using yeast two-hybrid screening, we found that dopamine D3 receptor interacts with RGL. Since RGL is known to regulate the expression of c-fos promoter, effects of D3R on gene expression of c-fos promoter was studied. (omitted)
Objectives: This study was performed to elucidate the effects of Danchisoyo-san (DS) on cell damage and gene expression in UVB-exposed dermal fibroblast. Methods: To demonstrate the inhibitory effects of DS on aging of the skin, we used human dermal fibroblast(F6) and UVB light(30 mJ/$cm^2$) was used to damage to dermal fibroblast. We measured the nitrite production, LDH release, and gene expression in UVB-irradiated dermal fibroblast to elucidate the actionmechanism of DS. Also, we evaluated the amount of increased PICP, TIMP-1 in dermal fibroblast. PICP, TIMP-1 concentration was measured using EIA kit, and gene expression (MMP-1, procollagen, c-fos, c-jun, NF-kB, Bcl-2, Bcl-xL, iNOS) were determined using real-time PCR. Results: 1. DS inhibited LDH-release, nitrite production in UVB-irradiated dermal fibroblast. 2. DS suppressed the gene expression of MMP-1 in UVB-irradiated dermal fibroblast. 3. DS increased the gene expression of procollagen in UVB-iradiated dermal fibroblast. 4. DS suppressed the gene expression of c-jun, c-fos, NF-kB, iNOS in UVBirradiated dermal fibroblast. 5. DS increased the gene expression of Bcl-2 in UVB-iradiated dermal fibroblast. 6. DS increased the cell proliferation of dermal fibroblast. Conclusions: From the results, we concluded DS increases the cell proliferation and collagen synthesis in dermal fibroblast. So we suggest that DS has the antiwrinkle effects.
Jin Guang-Shi;Lee Jae-Hyo;Lee Jae-Hee;Lee Moon-Young;Kim Min-Sun;Jin Yuan Zhe;Song Jeong-Hoon;Park Byung-Rim
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.11
no.1
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pp.1-7
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2007
Altered environmental gravity, including both hypo- and hypergravity, may result in space adaptation syndrome. To explore the characteristics of this adaptive plasticity, the expression of immediate early gene c-fos mRNA in the vestibular related tissues following an exposure to hypergravity stimulus was determined in rats. The animals were subjected to a force of 2 g (twice earth's gravity) for 1, 3, or 12 h, and were examined poststimulus at 0, 2, 6, 12, and 24 h. RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction) and real-time quantitative RT-PCR were adopted to analyze temporal changes in the expression of c-fos mRNA. The hypergravity stimulus increased the expression of c-fos mRNA in the vestibular ganglion, medial vestibular nucleus, inferior vestibular nucleus, hippocampus, cerebellum, and cortex. The peak expression occurred at 0 h poststimulation in animals stimulated with hypergravity for 1 h, and at 6 h poststimulus in those stimulated for 3 h. In contrast, those stimulated for 12 h exhibited dual peaks at 0 and 12 h poststimulus. Bilateral labyrinthectomy markedly attenuated the degree of c-fos mRNA expression. Glutamate receptor antagonist also dramatically attenuated the degree of c-fos mRNA expression. These results indicate that expression of c-fos mRNA in response to hypergravity occurs in the vestibular related tissues of the central nervous system, in which peripheral vestibular receptors and glutamate receptors play an important role. The temporal pattern of c-fos mRNA expression depended on the duration of the hypergravity stimulus.
Immunohistochemical technique of the c-fos primary gene protein, Fos, was used to analyze the effects of external factors on the neuronal activities in the periaqueductal gray(PAG) of the intact rats, sham-operated rats and post-operated stress control rats. In addition, the number of Fos positive neurons has been evaluated to verify the effects of cannula implantation and veratridine treatment on the neuronal activities in PAG area. The results were summerized as follow : 1. There was no significant difference in the number of Fos positive neurons observed in the caudal and middle portion of lateroventral PAG from cannula implanted rats and sham operated rats. 2. The number of Fos positive neurons in the PAG was not changed by the stress induced by connection of collecting tube to rats for 12 hours as compared to that of intact rats. 3. In the saline treated group, the Fos immunoreactivity in the PAG did not changed at 30 minutes and 1 hour after saline treatment as compared to that of intact rats. However, the number of Fos positive neurons was significantly increased at 2 hours after treatment compared to that of saline treated rats at 30 minutes after treatment. 4. The Fos immunoreactivity was dramatically increased at 30 minutes, 1 hour and 2 hours after veratridine treatment as compared to those of saline treated groups. The number of Fos immunoreative neurons showed the maximal level at 2 hours after veratridine treatment. 5. The Fos positive neurons induced by saline and veratridine treatment were mainly distributed in front of the microdialysis window. These results suggest that new microdialysis demonstrated in this study improves efficiency and accuracy to confine the neuronal activity in front of microdialysis window site. Moreover, this directional specificity allows us to locate probe tips adjacent to the brain area of the interest site rather than centering the probes within that brain area. Finally, This microdialysis method can be used to dialyse the neurotransmitters using concious and freely moving rats.
Hyun Sung Park;Mi-Kyung Oh;Joong Won Lee;Dong-Hoon Chae;Hansol Joo;Ji Yeon Kang;Hye Bin An;Aaron Yu;Jae Han Park;Hee Min Yoo;Hyun Jun Jung;Uimook Choi;Ji-Won Jung;In-Sook Kim;Il-Hoan Oh;Kyung-Rok Yu
International Journal of Stem Cells
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v.15
no.2
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pp.203-216
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2022
Background and Objectives: Epidemiological investigations have shown positive correlations between increased diesel exhaust particles (DEP) in ambient air and adverse health outcomes. DEP are the major constituent of particulate atmospheric pollution and have been shown to induce proinflammatory responses both in the lung and systemically. Here, we report the effects of DEP exposure on the properties of human Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells (WJ-MSCs), including stemness, regeneration, and immunomodulation. Methods and Results: Non-apoptotic concentrations of DEP (10 ㎍/ml) inhibited the migration and osteogenic differentiation capacity of WJ-MSCs. Gene expression profiling showed that DEP increased intracellular reactive oxygen species (ROS) and expression of pro-inflammatory and metabolic-process-related genes including cFos. Furthermore, WJ-MSCs cultured with DEP showed impaired suppression of T cell proliferation that was reversed by inhibition of ROS or knockdown of cFos. ERK inhibition assay revealed that DEP-induced ROS regulated cFos through activation of ERK but not NF-κB signaling. Overall, low concentrations of DEP (10 ㎍/ml) significantly suppressed the stemness and immunomodulatory properties of WJ-MSCs through ROS/ERK/cFos signaling pathways. Furthermore, WJ-MSCs cultured with DEP impaired the therapeutic effect of WJ-MSCs in experimental colitis mice, but was partly reversed by inhibition of ROS. Conclusions: Taken together, these results indicate that exposure to DEP enhances the expression of pro-inflammatory cytokines and immune responses through a mechanism involving the ROS/ERK/cFos pathway in WJ-MSCs, and that DEP-induced ROS damage impairs the therapeutic effect of WJ-MSCs in colitis. Our results suggest that modulation of ROS/ERK/cFos signaling pathways in WJ-MSCs might be a novel therapeutic strategy for DEP-induced diseases.
Kang, Shin Ae;Chun, Sung Sik;Kang, Shin Kwon;Chung, Young Chul;Cheon, Eun Woo;Cho, Sang Uk;Jung, Kyung Hwa;Ahn, Soon Cheol;Yu, Hak Sun
Journal of Life Science
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v.24
no.5
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pp.567-572
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2014
Extracts of Platycodon grandiflorum have been reported to show anti-inflammatory, antioxidant, anti-metastatic, and hepato-protective effects. This study was designed to evaluate T-cell activation and M1/M2 differential macrophage activation by extracts of P. grandiflorum or P. grandiflorum containing various medicinal herbs. Using real-time RT-PCR, we analyzed expression levels of c-fos, and CD40L (T-cell activation markers) in splenocytes and iNOS, Ym1, and ARG1 in RAW 246.7 cells after treatment of CC (hot water extract of P. grandiflorum), MAEK (hot water extract of P. grandiflorum [82%] and six different plants), and HWAL (hot water extract of P. grandiflorum [7%] and eight different plants. The results showed that MAEK significantly elevated the expression of T-cell activation markers of splenocytes, with the c-fos gene activated more than 10-fold and the CD40L gene activated more than 6-fold. Although CD40L was significantly increased by CC and HWAL, the increase was only about 2-fold. In addition, CC and HWAL did not significantly activate the expression of the c-fos gene. On the other hand, CC elevated the M1 activation marker iNOS, and HWAL elevated the M2 activation marker Ym1 and ARG1 gene expression. In conclusion, MAEK could be used as an immune stimulant because of its ability to activate T cells (elicited c-fos and CD40L gene expression), whereas HWAL could serve as an anti-inflammatory agent because of its differential activation of M2 macrophages.
ATF2 is a cellular transcription factor which belongs to the CREB/ATF class and it is leucine zipper protein which generally binds to DNA as dimers. This paper presents the procedure for subcloning the ATF2 gene and the results of experiment used the expressed ATF2. The pET expression vector was used since it produced 6xHis fusion protein for easy purification using affinity column. The Nickel chelating chromatography was used for Purifying the expressed ATE2 from E- codi BL2l. Subsequen시y In vitro binding pull-down assay showed the binding specificity of ATF2 with AP-1 family factors such as BATF, c-Fos, c-Jun and ATF2 itselgf. ATF2 forms homodimer as well as strong heterodimer with BATF. It also forms stable dimer with c-Jun but barely binds with c-Fos.
Park, Hyung-Hoon;Lee, Jang-Suk;Yun, Hyuk;Hwang, Gwi-Seo;Chong, Myong-Soo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.26
no.3
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pp.330-337
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2012
This study was performed to assess the Effect of SCF(Schisandrae Chinensis Fructus) on Keratinocyte Damage by UV irradiation. The effect of SCF were determined in UV irradiated HaCaT. We measured LDH release and NO release from HaCaT to elucidate the effect of SCF. And iNOS, TNF-${\alpha}$, COX-2, Bax, Bcl-2, Bcl-xL, c-jun, c-fos gene expression were determined in HaCat using real time PCR method. The results are as follows. SCF inhibited LDH-release, NO production in UV irradiated HaCaT. SCF increased the gene expression Bax, Bcl-2 and Bcl-xL protein in UV irradiated HaCaT. SCF suppressed the gene expression TNF-${\alpha}$ in UV irradiated HaCaT. SCF suppressed the gene expression iNOS, c-fos, and c-jun in UV irradiated HaCaT. SCF not affected the suppression of the gene expression COX-2 in UV irradiated HaCaT. The study showed SCF inhibited the cell damage in UV irradiated HaCaT.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.5
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pp.1299-1303
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2008
Since exercise training induces mechanical stress to the heart, we examined the activation pattern of mitogen-activated protein kinase(MAPK)s signaling pathway by immunohistochemistry. The immunoreactions of MAPKs signaling with c-fos and Schiff's reaction were increased in the cardiac muscle of exercised rat compared to normal one except immunoreaction for MEK1/2 and ERK1/2 and p38. However, the immunoreaction of phospho-JNK and phospho-p38 with early gene c-fos were arrested markedly in water extract of Alliium sativum (WEAS) treated rat compared to exercised one. Since MAPKs signaling does play a protective role in response to pathological stimulus in the heart, results in the present study suggest that WEAS may act as a alleviating agent for exercise-induced stress to. heart through regulating MAPKs signaling activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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