It is widely recognized that the embryonic or fetal loss after breeding is common in the cattle and that it is an important factor affecting reproductive efficiency. The causes of this loss have been subject of extensive researches and the results indicate that the embryonic mortality may he primary factor responsible for low pregnancy rates in non-embryo transfer bovine populations as well as embryo transfer programs. However, it's causes are still not clearly understood. The embryonic mortality or pregnancy rate has been influenced by various embryonic and maternal effects related to genetic and environmental factors. The timing and extent of embryonic mortality vanes greatly according to authors and estimating methods, because it is difficult to make direct measurements. The major important factors that may influence the embryonic losses or pregnancy rates after embryo transfer can be summeirized. 1.When an embryo is transferred to unmated recipients, the contralateral transfer to corpus luteum results in a lower survival rate than ipsilateral deposition. When the embryos are transferred for the production of twin calves, their survivals and twin pregnancies have quite inconsistent according to the transfer methods either to the unmated-synchronized or already mated recipients and more works are needed to accurrately clarify the previous results. 2.Although embryos can be cultured in vitro some hours without the great declines in pregnancy rates, the rates differ markedly among culture times and media but may be improved by co-transfer systems. 3.Embryo developmental stages and quality grades clearly affect the survival rate following freezing and the pregnancy rate after transfer and the selection of embryos without chromosome abnormalities and of high fertile semen may also be considered to increase the pregnancy rates. 4.Many researches have attempted to relate the plasma progesterone levels to pregnancy rates and others have done either direct progesterone supplementation or luteal stimulation by hCG treatment in order to increase the pregnancy rates. However, these effects on pregnancy rates are inconsistent and also contradictory. 5.The asynchrony between donors or embryos and recipients may he a major cause of embryo death and low pregnancy rate and the sensitivity to uterine asynchyony differs in according to the quality and stages of embryos. 6.The extremes of poor or over nutrition during early pregnancy in the recipients are detrimental to the survival of embryos and the good body condition is required to prevent a reduejion of pregnancy rates. The uterine pathogens in embryonic mortality or fertility have been questioned but the infection of C.pyogenes and Campylobacter fetus is still important pathogens. 7.The heat stress during early pregnancy may reduce conceptus weight and possibly increase the embryonic mortality.
A study was carried out to define the relationship between the N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase(NAGase) levels and isolated pathogenic bacteria in 379 quarter fore milk of mastitis suspected samples collected in this clinics. All samples were tested the NAGase, California mastitis test(CMT), Somatic cell count(SCC) and bacterial culture. Except 111 from 379 samples, 268 bacteria-positive quarter fore milk samples were classified into the latent and mastitis infection group by SCC($500,000cells\;per\;m{\ell}$), and the mean NAGase levels($nmol/min/m{\ell}$) of each isolated pathogen in mastitis infection group were Staphylococcus aureus 3.067, Coagulase-negative staphylococci 4.083, Staphylococcus aureus 3.594, Str. uberis 3.513, Str. dysgalactiae 1.640, E coli 4.441 and gram negative rods 4.560, respectively. Most of the relationship between mean SCC and NAGase in each pathogen group were highly significant using a student t test(p<0.05). When the mastitis pathogens were classified into minor(Coagulase-negative staphylococci, Corynebacterium sp.) and major pathogen group(Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Str. uberis, Str. dysgalactiae, gram negative rods), the NAGase levels were higher at major than minor pathogen group. On the other hand, when the mastitis milk samples were classified by SCC($500,000cells\;per\;m{\ell}$) and by the presence of pathogen(IDF scheme), the NAGase levels were also higher at the mastitis than latent infection. The possibility of combining SCC and NAGase data in order to give the more difinitive diagnosis is discussed.
Diarrhea is the most common cause of death in calves, and remains a major health challenge. Although there are many studies on the related pathogens, the understanding of the clinicopathological changes is limited. This study aimed to identify the pathogens and observe the clinicopathological changes in electrolytes and acute phase proteins (APPs) associated with diarrhea. Blood samples and fecal samples were collected from 141 calves for the determination of APPs, electrolyte and acid-base status and identification of enteropathogens, respectively. Single or co-infections with enteropathogens, including virus (bovine viral diarrhea virus, coronavirus, and rotavirus), Eimeria, Cryptosporidium, and Escherichia coli K99 were detected in both non-diarrheic and diarrheic calves. Levels of APPs such as serum amyloid A, haptoglobin and fibrinogen were comparable between diarrheic and non-diarrheic calves. Hypoglycemia, high blood urea, electrolytes and acid-base imbalance (hyponatremia, hypochloremia, and decreased bicarbonate), and strong ion difference (SID) acidosis showed a significant association in diarrheic calves (p < 0.01). Particularly, significant hyponatremia, bicarbonate loss, SID acidosis, hypoglycemia, and elevated blood urea nitrogen were found in rotavirus-infected calves. Monitoring the clinicopathological parameters of APPs and electrolyte levels could be vital in the clinical management of diarrheic calves.
We identified mastitis-causing pathogens using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) in an organic dairy farm and evaluated the effects of antimicrobial restriction on antimicrobial susceptibility. A total of 43 Holstein cows without any clinical sign of mastitis were used in this study, and 172 quarter milk samples were cultured on blood agar plates for 24 hours at 37℃. Subsequently, bacterial species were identified and antimicrobial susceptibility tests were performed. The subclinical mastitis infection rates in the cows and quarters were 58.1% (25/43) and 25.6% (44/172), respectively. In the species identification, Staphylococcus aureus (40.9%) was the most prominent isolate, followed by S. chromogenes (22.7%), S. epidermis (18.2%), S. simulans (11.4%), S. haemolyticus (2.3%), S. muscae (2.3%), and S. xylosus (2.3%). In the antimicrobial susceptibility test, all isolates were 100% susceptible to 24 of 28 antibiotics, except for benzylpenicillin, cefalotin, cefpodoxime, and trimethoprim/sulfamethoxazole. The resistance rates of S. aureus, S. chromogenes, and S. muscae isolates to trimethoprim/sulfamethoxazole were 27.8%, 10%, and 100%, respectively, and the resistance rates of S. epidermis and S. xylosus to benzylpenicillin were 50% and 100%, respectively. S. chromogenes, S. epidermis, S. simulans, S. haemolyticus, and S. xylosus were resistant to cefalotin and cefpodoxime. In conclusion, restrictions on antimicrobial use for organic dairy farm certification have resulted in a high Staphylococcus spp. infection rate. Therefore, our study indicates the importance of mastitis management strategies implemented by farmers together with veterinary practitioners, even if mastitis does not appear clinically in organic dairy farms.
Background: A new, extended long-acting tilmicosin (TLAe) preparation was tested against intramammary ceftiofur (CEF) using a non-inferiority trial model during dry-cow therapy (DCT) in a farm with high bovine population density and deficient hygiene application. Objectives: To evaluate the possibility that TLAe administered parenterally can achieve non-inferiority status compared to CEF administered intramammary for DCT. Methods: Cows were randomly assigned to TLAe (20 mg/kg subcutaneous; n = 53) or CEF (CEF-HCl, 125 mg/quarter; n = 38 cows) treatment groups. California mastitis testing, colony-forming unit assessment (CFU/mL), and number of cases positive for Staphylococcus aureus were quantified before DCT and 7 d after calving. A complete cure was defined as no bacteria isolated; partial cure when CFU/mL ranged from 150 to 700, and cure-failure when CFU/mL was above 700. Results: TLAe and CEF had overall cure rates of 57% and 53% (p > 0.05) and S. aureus cure rates of 77.7% and 25%, respectively (p < 0.05). The pathogens detected at DCT and 7 days after calving were S. aureus (62.71% and 35.55%), Staphylococcus spp. (22.03% and 35.55%), Streptococcus uberis (10.16% and 13.33%), and Escherichia coli (5.08% and 15.55%). Non-inferiority and binary logistic regression analyses revealed a lack of difference in overall efficacies of TLAe and CEF. Apart from S. aureus, S. uberis was the predominant pathogen found in both groups. Conclusions: This study is the first successful report of parenteral DCT showing comparable efficacy as CEF, the gold-standard. The extended long-term pharmacokinetic activity of TLAe explains these results.
소의 혈액, 세포, 조직, 기관 등 소유래 물질을 원료로 사용한 생물의약품, 조직공학제제, 세포치료제의 경우 소유래 원료물질에 다양한 바이러스가 오염된 사례가 있기 때문에 바이러스 안전성 검증이 필수적이다. BPIV3는 동물 세포주, 우혈청 등에 가장 흔하게 오염되는 바이러스이다. 소유래 물질을 원료로 하는 생물의약품, 조직공학제제, 세포치료제 등에서 BPIV3 안전성을 확보하기 위해, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 BPIV3를 정량적으로 검출하고, 제조공정에서 BPIV3 제거 검증을 위한 시험법으로 활용이 가능한 BPIV3 real-time RT-PCR 시험법을 확립하였다. BPIV3에 특이적인 primer를 선별하였으며, 형광염료 SYBR Green I을 사용하여 BPIV3 RNA 정량 검출 시험법을 최적화하였다. 세포배양법에 의한 감염역가와 비교한 결과 real-time RT-PCR 민감도는 2.8 $TCID_{50}/mL$이었다. 확립된 시험법의 신뢰성 (reliability)을 보증하기 위해 시험법 검증을 실시한 결과 특이성 (specificity)과 재현성 (reproducibility)이 우수함을 확인하였다. 확립된 real-time RT-PCR을 생물의 약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인하기 위하여 인위적으로 BPIV3를 오염시킨 CHO 세포주와 소유래 콜라겐에서 BPIV3 검출 시험을 실시하였다. BPIV3를 감염시킨 CHO 세포와 세포배양 상청액에서 BPIV3를 정량적으로 검출할 수 있었다. 소유래 콜라겐에서도 7.8 $TCID_{50}/mL$ 까지 정량적으로 검출할 수 있었다. 위와 같은 결과에서 확립된 BPIV3 real-time RT-PCR 시험법은 생물의약품 안전성 보증을 위한 세포주 검증, 생물의약품 생산 공정 검증, 바이러스 제거 공정 검증 등에서 감염역가 시험법과 같은 생물학적 시험법을 대신할 수 있는 신속하고, 특이성과 민감성이 우수한 시험법임을 확인하였다.
In the event of an outbreak of a livestock epidemic, it has been considered that the existing burial-centered carcass disposal method should be improved ecofriendly for prevention of leachate and odors from burial basically in regard of pathogen inactivation. Therefore, the aim of this study is whether it was possible to treat the carcass of cattle and chickens using the chemical carcass treatment method. It was conducted to establish detailed treatment standards for the chemical treatment method of cattle and chicken carcasses based on the results of the proof of the absence of infectious diseases in cattle chickens. After inoculating cattle carcass with 10 pathogens (foot and mouth disease virus, bovine viral diarrhea virus, Mycobacterium bovis, Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis, Brucella abortus, Bacillus anthracis, Clostridium chauvoei, Clostridium perfringens, Escherichia coli, and Salmonella Typhimurium) and chicken carcasses with low pathogenic avian influenza virus, Clostridium perfringens type C, E. coli and Salmonella Typhimurium, these were treated at 90℃ for 5 hours in a potassium hydroxide liquid solution corresponding to 15% of the body weight. This method liquefies all cadaveric components and inactivates all inoculated pathogens by PCR and culture. Based on these results, it was possible to prove that chemical treatment of cattle and chicken carcasses is effective in killing pathogens and is a safe method without the risk of disease transmission. The chemical treatment method of livestock carcasses can be suggested as an alternative to the current domestic burial-centered livestock carcass treatment method, preventing environmental pollution, and contributing to public health.
본 연구에서는 성체 한우의 도축과정 중에 채혈된 혈액으로부터 분리 정제한 혈청의 생물학적 안전성을 검증하기 위하여 세균, 마이코플라즈마 및 바이러스의 검출과 동정을 실시하였다. 검사를 실시한 대부분의 혈청에서 전염성 병원체가 검출되지 않았고 두 개의 혈청에서 토양 유래의 것으로 추정되는 Bacillus thuringiensis가 검출 되었다. 본 연구의 결과는 국내에서 도축되는 한우는 생물학적 안전성을 담보할 수 있는 최소한의 기본적인 안전장치를 통해 도축된다는 사실을 보여주며 한우의 도축과정에서 부산물로 얻을 수 있는 혈액을 안전한 생물학적 제제로 개발할 수 있다는 가능성을 보여주는 것으로 생각된다.
Outbreaks of tick-borne disease cases in Santa Catarina, Brazil are known, but the presence of the pathogen DNA has never been determined. In this study, the first survey of Anaplasma marginale, Babesia bigemina, and Babesia bovis DNA on blood samples of 33 cattle from an outbreak in Ponte Alta Municipality, Santa Catarina, Brazil, has been carried out. A multiplex PCR detected 54.5% of animals were co-infected with 2 or 3 parasites, while 24.2% were infected with only 1 species. The most prevalent agent was B. bigemina (63.6%) followed by A. marginale (60.6%). This is the first report of tick-borne disease pathogens obtained by DNA analysis in Southern Brazil.
Heat shock proteins serve as chaperone by preventing the aggregation of denatured proteins and promote survival of pathogens in harsh environments. In this study, heat shock gene encoding a 84-kDa (p84) protein, which is one of the three major heat shock proteins in S. pneumoniae, was cloned and characterized. PCR with a forward primer derived from N-terminal amino acid sequence of the p84 and a reverse primer derived from the conserved second ATP-binding region of Clp family was used for amplification of the gene encoding the p84 and subsequently the PCR product was used for sequence determination. Sequence analysis of the p84 gene demonstrated that it is a member of ClpL. The deduced amino acid sequence of pneumococcal ClpL shows homology with other members of the Clp family, and particularly, even in variable leader region, with bovine Clp-like protein and L. lactis ClpL. S. pneumoniae clpL is the smallest clop member (701 amono acids) containing the two conserved ATP-binding regions, and hydrophilic N-terminal variable region of pneu-mococcal Clp ATPase is much shorter than any known Clp ATPases. Histidine tagged ClpL was overexpressed and purified from E. coli. Immunoblot analysis employing antisera raised against pneumococcus p84 demonstrated no cross-reactivity with Clp analog in Eschericha coli, Staphylococcus aureus and human HeLa cells. Preimmunization of mice with ClpL extended mice life partially but did not protect them from death.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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