Oxidative stress is a critical factor affecting the quality and viability of sperm during boar semen storage. Oxidative stress is also a significant concern during the process of freezing semen. The process of semen storage involves exposing the sperm to various stressors, including temperature changes, cryoprotectants, and extended periods of incubation. In addition, oxidative stress can lead to the production of reactive oxygen species (ROS) within the sperm, resulting in oxidative damage to cellular components, such as lipids, proteins, and DNA. Striking a balance between ROS production and the antioxidant defense system is crucial for maintaining sperm viability and functionality during semen storage. Moreover, the prolonged storage of boar semen leads to an increase in ROS levels, which can impair sperm motility, membrane integrity, and DNA integrity. ROS-induced lipid peroxidation affects the fluidity and stability of sperm membranes, leading to decreased sperm motility. Moreover, oxidative damage to the DNA can result in DNA fragmentation, compromising the genetic integrity of the sperm. In conclusion, oxidative stress is a significant challenge in maintaining sperm quality during boar semen storage. Understanding the mechanisms underlying oxidative stress and their impacts on sperm function is crucial for developing effective strategies to minimize oxidative damage and improve sperm storage outcomes.
Oxidative stress is one of the major causes of failure of in vitro storage of boar semen. Reactive oxygen species (ROS) are one of the important mediators of oxidative stress during in vitro storage of boar semen. Our study examined the effects of taurine on sperm characteristic and on in vitro developmental embryos during in vitro storage of boar semen for 7 days. Semen was randomly aliquoted into 3 centrifuge tubes and treated with different concentrations of taurine (25-100 mM). The characteristics of boar sperm were analyzed for motility by light microscopy, viability by using a Makler counting chamber and membrane integrity by a hypoosmotic swelling test (HOST). The percentages of motile spermatozoa in taurine groups after 5 days were significantly higher compared to the control. Sperm viability in the control was lower than in taurine groups after 7 days irrespective of different taurine concentration. In the hyoosmotic swelling test (HOST), significantly higher results were obtained in taurine groups after 3 days. Also, the developmental rates of IVM/IVF porcine embryos from semen treated with pyruvate and taurine were significantly increased when compared with the control (p<0.05). These results indicate that supplementation of taurine as an antioxidant in boar semen extender can improve the semen quality.
Objective: This study was conducted to investigate the effect of L-carnitine on the pig semen characteristics during storage. Methods: Spermatozoa samples were examined for spermatozoa quality and then randomly divided into 5 groups: 0 (control), 12.5, 25, 50, and 100 mM L-carnitine. Sperm motility, plasma membrane integrity and antioxidant parameters (total reactive oxygen species, total antioxidant capacity, and malondialdehyde) were evaluated after 0, 3, 5, and 10 day cooled-storage at 17℃. Moreover, ATP content, mitochondria activity as well as sperm-binding and in vitro fertilizing ability of preserved boar sperm were also investigated. Results: Supplementation with 50 mM L-carnitine could effectively maintain boar sperm quality parameters such as sperm motility and membrane integrity. Besides, we found that L-carnitine had positive effects on boar sperm quality mainly through improving antioxidant capacities and enhancing ATP content and mitochondria activity. Interestingly, by assessing the effect of L-carnitine on sperm fertility and developmental potential, we discovered that the extender containing L-carnitine could improve sperm quality and increase the number of sperms bounding to zona pellucida, without improving in vitro fertility and development potential. Conclusion: These findings suggested that the proper addition of L-carnitine to the semen extender improved boar sperm quality during liquid storage at 17℃.
Phthalate is a chemical endocrine disrupter and interfere with the action of hormones, estrogens, androgens and thyroid hormones. It also affect cardiovascular, metabolic, immune and reproductive system in the human and animals. Curcumin is antioxidant, anti-inflammatory activity and -cancer properties in the human. We studied whether phthalates damage viability, mitochondrial activity and membrane integrity of sperm in boar semen. We also treated curcumin with/without phthalates in the boar semen. Fresh boar semen was treated with phthalates and/or curcumin for examining sperm characteristics. Sperm characteristics, sperm motility, viability, mitochondrial activity, and membrane integrity were determined during storage of boar semen. Sperm motility and viability in dose-dependent manner decreased by di-n-butyl phthalate (DBP), mono-n-butyl phthalate (MBP) and di-2-ethylhexyl phthalate (DEHP, p<0.05). Phthalates also decreased mitochondrial activity and membrane integrity of sperm (p<0.05). However, sperm motility and viability were higher than untreated-curcumin when DBP, MBP and DEHP treated with a curcumin in boar semen (p<0.05). Mitochondrial activity and membrane integrity of sperm were higher in DBP- and MBP-treated semen with curcumin (p<0.05). In conclusion, phthalates can damage sperm viability and quality during the boar semen storage, and curcumin may protect the boar sperms from phthalates during storage term.
It is very difficult to get the information about semen quality analysis in transgenic pigs because of limited numbers and research facilities. Therefore, in the present study, we analyzed the semen quality of transgenic boars generated for xenotransplantation research. Briefly, the semen samples were collected from 5 homozygous ${\alpha}1,3$-Galactosyltransferase knock-out ($GalT^{-/-}$) transgenic boars and immediately transported to the laboratory. These semen samples were decupled with DPBS and conducted to analyze semen parameters by a computer-assisted semen analysis (CASA) system. The boar semen were examined all 12 parameters such as total motility (TM), curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL), average path velocity (VAP), and hyperactivated (HYP), etc. In results, among the 5 $GalT^{-/-}$ boars, three boars (#134, 144, and 170) showed normal range of semen parameters, but #199 and 171 boars showed abnormal ranges of semen parameters according to standard ranges of semen parameters. Unfortunately, #171 boar showed azoospermia symptom with rare sperm counts in the original semen. Conclusively, assessment of semen parameters by CASA system is useful to pre-screening of reproductively healthy boar prior to natural mating and artificial insemination for multiplication and breeding.
Kim, Ha-Young;Byun, Jae-Won;Shin, Dong-Ho;Kim, Hyoung-Soon;Yoon, Hachung;Park, Choi-Kyu;Lee, O-Soo;Jung, Byeong Yeal
Korean Journal of Veterinary Research
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v.50
no.2
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pp.125-131
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2010
Bacterial contamination is an unavoidable finding of the semen collection process in boar and can lead in deleterious effects on semen quality and longevity if left uncontrolled. The purpose of this study is to identify the bacteria in extended boar semen and to select the effective antimicrobials to control of the contaminants. Of 116 extended boar semen samples submitted from eight AI centers in Korea, 39 (33.6%) samples were positive for bacterial contamination. Among 39 contaminated semen, most of them (84.6%) were contaminated with one or two bacterial species and there was no significant difference between two age groups $(\leq\;24\;and\;>\;24\;month\;old).$ Stenotrophomonas maltophilia (n = 18) was the most predominant bacterium followed by Elizabethkingia meningoseptica (n = 12), Sphingomonas paucimobilis (n = 12), Myroides spp. (n = 5), Ochrobactrum anthropi (n = 3), and so on. Enrofloxacin (72.9%), florfenicol (72.9%), bacitracin (49.2%) and tylosin (49.2%) showed higher sensitivity compared with penicillin (13.6%) or aminoglycosides (6.8%-18.6%). Brucella spp., Leptospira spp., Mycoplasma hyopneumoniae, Mycoplasma hyorhinis, Mycobacterium tuberculosis complex were not detected in semen by PCR.
Artificial insemination technique has been contributed immensely for production of livestock worldwide as a critical assisted reproductive technique to preserve and propagate excellent genes in domestic animal industry. In the past decade, methods for semen preservation have been improved mostly in liquid preservation method for boar semen and freezing method for bull semen. Among many factors affecting semen quality during preservation, reactive oxygen species, produced by aerobic respiration in sperm for survival and motility, are unfavorable to sperm physiology. In mammalian cell as well as in the sperm, antioxidant system plays a role in degradation of reactive oxygen species. Magnetized water forms smaller stabilizing water clusters, resulting in high absorption and permeability of the cell for water, implicating its application for semen preservation. Therefore, this review focuses on preservation methods of boar and bull semen with respect to improvement of extender and reduction of reactive oxygen species by using magnetized water and supplementation of antioxidants.
The objective of this study was to investigate the effect of bacterial contamination on elapsed time after preservation on boar semen. Known numbers of Escherichia coli (E. coli) were inoculated to freshly ejaculated semen and sperm parameters such as viability, motility, agglutination, acrosome integrity and hypo-osmotic swelling test were performed during 7 days of liquid preservation. Semen samples were prepared using antibiotic free BTS extender and 4 different levels of E. coli were treated to semen with following concentrations; 3,000, 5,000, 7,000, 10,000 CFU/ml of sperms. Semen samples were preserved at $17^{\circ}C$ for 7 days in semen storage until analyzed. Aliquots were subjected to measure the sperm viability, motility and agglutination using computer assisted sperm analysis (CASA) system, acrosome integrity was performed using chlortetracycline (CTC) staining method and hypo-osmotic swelling test was performed using hypotonic solution from day 1 (day of semen collection) to 7. Detrimental effects on sperm motility and viability were observed 3 days after preservation at the level of 5,000 CFU/ml (p<0.05). Percentage of sperm abnormality was higher (p<0.05) in over 5,000 CFU/ml groups. Sperm agglutination rate was also significantly higher (p<0.05) in groups of 5,000 and 7,000 CFU/ml. The rate of acrosome reacted sperm was higher as preservation time goes in all the samples but the pattern was clearly higher among E. coli contaminated groups (p<0.05). The sperm membrane integrity in terms of hypo-osmotic test, E. coli affects little compared to other sperm parameters. The deleterious effects observed due to the bacterial contamination in semen suggest that importance of hygiene protocol to minimize the bacterial contamination during semen collection and processing.
Park, Yoo-Jin;Song, Won-Hee;Kim, Yeon-Hee;Mohamed, E.A.;Oh, Shin-Ae;Pang, Myung-Geol
Reproductive and Developmental Biology
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v.32
no.1
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pp.59-64
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2008
The objective of this study was to estimate modification of semen quality during storage. Liquid boar semen samples extended in Beltsville Thawing Solution were stored at $17^{\circ}C$ up to 5 days. While % motility and linearity significantly decreased eon day 3 in extender, the qualitative motility patterns were maintained satisfactorily. Also the storage of boar semen up to 5 days before insemination did not significantly changed the acrosome intactness. However, acrosome changed sperm significantly increased and capacitated sperm significantly decreased from day 4. No significant modifications in acrosome integrity were showed during sperm storage; these results suggest that liquid boar semen may keep the quality in extender for 3 days.
The quality characteristics of semen are important indicators of the fertility of a boar. Development of genetic markers for the semen quality in boars will be beneficial to the improvement of porcine fertility. We investigated the relationship between the polymorphisms of epidermal growth factor (EGF), prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (PTGS2) and prolactin receptor (PRLR) genes, and semen quality traits in boars. The genomic DNA of 233 boars (157 Duroc and 86 Landrace) from a central testing station was subjected to genotyping for surveying gene frequency. The EGF, PTGS2 and PRLR genotypes were determined using the restriction fragment length polymorphism method. Thirty-seven normal, mature Duroc boars from an AI center were also genotyped and their semen quality traits were collected. The effect of genotype on semen quality traits was analyzed by the least-squares means method using data corrected for season. The frequencies of the AA genotype of EGF, PTGS2 and PRLR in Duroc boars were 0.14, 0.01 and 0.66, respectively. In Landrace, the frequencies of the AA genotype were 0.03, 0.09 and 0.62, respectively. Boars with the BB genotype in EGF, with the AB genotype in PTGS2 and with the AA genotype in PRLR had significantly better semen quality with a higher percentage of normal sperm and a lower percentage of immature sperm than those with other genotypes. These findings imply that polymorphisms of EGF, PTGS2 and PRLR genes might be used as markers for improving the semen quality of boars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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