Ekuere, Usukuma;Good, Allen G.;Mayerhofer, Reinhold
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.27
no.4
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pp.317-323
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2000
Molecular genetic techniques can now be applied to the development of advanced plant genotypes, either through genetic transformation or genomic approaches which allow researchers to transfer specific traits using molecular markers. In this paper, we discuss the use of these techniques towards understanding the genetics of blackleg resistance in Brassica. In a comparative mapping study between Arabidopsis thaliana and Brassica napus, 6 R-ESTs, 7 B. napus RFLP markers and a B. napus EST were located in a collinear region of N7 (B. napus) and chromosome 1 (A. thaliana). One of the A. thaliana R-ESTs and 4 of the B. napus RFLPs co-segregated and mapped to the LmRl locus for blackleg resistance. Introgression of blackleg resistance from wild relatives is also investigated with the possibility of accelerating the introgression process via marker assisted selection.
Blackleg is a serious disease in Brassica plants, causing moderate to severe yield losses in rapeseed worldwide. Although China has not suffered from this disease yet (more aggressive Leptosphaeria maculans is not present yet), it is crucial to take provisions in breeding for disease resistance to have excellent blackleg-resistant cultivars already in the fields or in the breeding pipeline. The most efficient strategy for controlling this disease is breeding plants with identified resistance genes. We selected 135 rapeseed accessions in Sichuan, including 30 parental materials and 105 hybrids, and we determined their glucosinolate and erucic acid content and confirmed 17 double-low materials. A recently developed single-nucleotide polymorphism (SNP) marker, SNP_208, was used to genotype allelic Rlm1/rlm1 on chromosome A07, and 87 AvrLm1-resistant materials. Combined with the above-mentioned seed quality data, we identified 11 AvrLm1-resistant double-low rapeseed accessions, including nine parental materials and two hybrids. This study lays the foundation of specific R gene-oriented breeding, in the case that the aggressive Leptosphaeria maculans invades and establishes in China in the future and a robust and less labor consuming method to identify resistance in canola germplasm.
Seo Sang-Tae;Lee Seungdon;Lee Jung-Sup;Han Kyoung-Suk;Jang Han-Ik;Lim Chun-Keun
Research in Plant Disease
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v.11
no.2
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pp.140-145
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2005
A collection of 12 Erwinia carotovora strains from blackleg diseased potato in Jeju island was characterized genetic diversity by 5. cayotovora subsp. atposeptica (Eca)-specific PCR, PCR-RFLP of the two genes (16S rRNA and pel) and repetitive sequence PCR (ERIC-PCR). The results were compared with those of the other E. carotovora representative strains. None of the blackleg strains produced PCR amplicons with Eca-specific primers in contrast to the single 690 bp amplicon obtained with Eca strains. In addition, on the basis of pel gene RFLP with Sau3AI, the blackleg strains belonged to the pattern 2 whereas Eca strains belonged to the other one (pattern 3). By analysis of 16S rDNA RELP generated with HinfI, the most strains including the E. carotovera subsp. carotovora (Ecc) representative strains used in this study belonged to the pattern 1 whereas the blackleg strains belonged to the pattern 2 except for one strain. Moreover, ERIC-PCR analysis showed that the blackleg strains were closely related to each other and had an unique DNA band. Based on these molecular approaches, we have confirmed that the blackleg disease of potato is caused by a different E. carotovora from Eca and Ecc in Jeju island.
Potato blackleg disease caused by Erwinia carotovora subsp. atroseptica has been a serious problem in Korea. It was previously reported that four mixtures [streptomycin (9.3 ppm) + copper oxide (171.6 ppm)/copper hydroxide (146.3 ppm), streptomycin sulfate (7.0 ppm)+copper oxide (171.6ppm)/copper hydroxide (146.3 ppm)] were effective for the control of E. carotovora subsp. atroseptica. in in vitro test. Using those four mixtures and two antibiotics [streptomycin (81.4 ppm) and streptomycin sulfate (61.3 ppm)], the effectiveness of control for E. carotovora subsp. atroseptica. was conducted in the field. Two antibiotics showed over 60% of control efficacy under different soil conditions, while mixtures of two antibiotics with copper compounds did not show any control effects on the infected seed potato. Two mixtures [streptomycin (27.9 ppm)+copper hydroxide (438.9 ppm), streptomycin sulfate (21.0 ppm) + copper oxide (514.8 ppm)] were effective in the control of potato blackleg disease on the infected potato plants under different climate conditions.
Potato blackleg disease caused by Erwinia carotovora subsp. atroseptica (Eca) has been a serious problem in Korea. Bactericidal activities of twelve bactericides including antibiotics, copper compounds and oxolinic acid were examined in vitro. Streptomycin, streptomycin sulfate, and oxolinic acid effectively controlled the pathogen at 0.02 mM. However, the pathogen developed resistance to the applied bactericides after 72 hours of incubation. Activity of copper compounds such as copper hydroxide, copper oxide and copper sulfate was lower than that of antibiotics. However, the pathogen did not develop resistant to them. Combinations of streptomycin (0.016 mM, 9.3 ppm) + copper oxide (1.2 mM, 171.6 ppm)/copper hydroxide (1.5 mM, 146.3 ppm); streptomycin sulfate (0.005 mM, 7.0 ppm) + copper oxide (1.2 mM, 171.6ppm)/copper hydroxide (1.5 mM, 146.3 ppm) were found to be effective for the control of E. carotovora subsp. atroseptica.
Clostridium chauvoei is the etiologic agent of blackleg, a high mortality rated disease infection mainly cattle. In the present study, the partial sequences of 16S rRNA and flagellin gene of C. chauvoei isolated in Jeonbuk, Korea were determined and compared with those of reference strain. Oligonucleotide primers were designed to amplify a 811 bp fragment of 16S rRNA gene and 1229 bp fragment of flagellin gene. Sequencing analysis of 16S rRNA gene showed high homology to the reference strains ranging 82.3% to 100%, while flagellin gene were different from published foreign clostridia, showing 98.7% to 72.0% nucleotide sequence homology. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene revealed the close phylogenetic relationship of C. chauvoei and C. septicum in cluster I, which includes C. carnis, C. tertium, C. quinii, C. celatum, C. perfringens, C. absonum, C. botulinum B. Phylogentic analysis also revealed that flagellin gene formed a single cluster with C. chauvoei, C. septicum, C. novyi A, C. novyi B, C. tyrobutylicum, C. acetobutylicum. The genetic informations obtained from this study could be useful for the molecular study of C. chauvoei.
In the treatment of mice Aureomycin, Oil penicillin, Achromycin, Ambrasynth and Terramycin were effective on the Black-leg disease when they were administered about 4 to 5 hours before the death of control animals. Synthomycetin, however, was observed to be effective when administered 8 hours or more before the control death. Streptomycin seemed to be rather less effective than Black leg antiserum. It was not effective at all when given 19 hours before the death of control animal although there was a delay of taking death by 5 hours in the treated group. As was in mice, Streptomycin was little effective in the treatment of calves, while other antibiotics showed fine efficacy on the diseased animals. The diseased animals, when given with anitibiotics 37 hours before the death of control showed the rise of temperature($41^{\circ}C$ or more), swelling and redness on the site of infection and then recovcred to normal stage. In the treatment of calves, Aureomycin only delayed the taking death of the deseased animals by 111 hours when administered 4 hours before the death of control animals. And other antibiotics, when given 4 hours before the death of control animals were effective, although the deseased animls developed symptoms such as hard breathing, anorexia and dropsical swellings. Oil penicillin was observed to be comparatively larger in its efficacy on the treatment of Black leg disease.
Plant pathogenic Pectobacterium species cause severe soft rot/blackleg diseases in many economically important crops worldwide. Pectobacterium utilizes plant cell wall degrading enzymes (PCWDEs) as the main virulence determinants for its pathogenicity. In this study, we screened a random mutant, M29 is a transposon insertion mutation in the metC gene encoding cystathionine β-lyase that catalyzes cystathionine to homocysteine at the penultimate step in methionine biosynthesis. M29 became a methionine auxotroph and resulted in growth defects in methionine-limited conditions. Impaired growth was restored with exogenous methionine or homocysteine rather than cystathionine. The mutant exhibited reduced soft rot symptoms in Chinese cabbages and potato tubers, maintaining activities of PCWDEs and swimming motility. The mutant was unable to proliferate in both Chinese cabbages and potato tubers. The reduced virulence was partially restored by a complemented strain or 100 µM of methionine, whereas it was fully restored by the extremely high concentration (1 mM). Our transcriptomic analysis showed that genes involved in methionine biosynthesis or transporter were downregulated in the mutant. Our results demonstrate that MetC is important for methionine biosynthesis and transporter and influences its virulence through Pcc21 multiplication in plant hosts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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