The biofilms on pipe walls in water distribution systems are of interest since they can lead to chlorine demand, coliform growth, pipe corrosion, and water taste and odor problems. As such, the study described in this paper is part of an AWWARF and Tampa Bay Water tailored collaboration project to determine the effect of blending different source waters on the water quality in various distribution systems. The project was based on 18 independent pilot distribution systems (PDS), each being fed by a different water blend (7 finished waters blended in different proportions). The source waters compared were groundwater, surface water, and brackish water, which were treated in a variety of pilot distribution systems, including reverse osmosis (RO) (desalination), both membrane and chemical softening, and ozonation-biological activated carbon (BAC), resulting in a total of 7 different finished waters. The observations from this study consistently demonstrated that unlined ductile iron was more heavily colonized by a biomass than galvanized steel, lined ductile iron, and PVC (in that order) and that the fixed biomass accumulation was more influenced by the nature of the supporting material than by the water quality (including the secondary residual levels). However, although the bulk liquid water cultivable bacterial counts (i.e. heterotrophic plate counts or HPCs) did not increase with a greater biofilm accumulation, the results also suggested that high HPCs corresponded to a low disinfectant residual more than a high biofilm inventory. Furthermore, temperature was found to affect the biofilms, plus the AOC was important when the residual was between 0.6 and 2.0 mg $Cl_2/l$. An additional aspect of the current study was that the potential of the exoproteolytic activity (PEPA) technique was used along with a traditional so-called destructive technique in which the biofilm was scrapped off the coupon surface, resuspended, and cultivated on an R2A agar. Both techniques indicated similar trends and relative comparisons among the PDSs, yet the culturable biofilm values for the traditional method were several orders of magnitude lower than the PEPA values.
To investigate the effects of pipe materials on biofilm accumulation and water quality, an annular reactor with the sample coupons of four pipe materials (steel, copper, stainless steel, and polyvinyl chloride) was operated under hydraulic conditions similar to a real plumbing system for 15 months. The bacterial concentrations were substantially increased in the steel and copper reactors with progression of corrosion, whereas those in stainless steel (STS) and polyvinyl chloride (PVC) reactors were affected mainly by water temperature. The heterotrophic plate count (HPC) of biofilms was about 100 times higher on steel pipe than other pipes throughout the experiment, with the STS pipe showing the lowest bacterial number at the end of the operation. Analysis of the 16S rDNA sequences of 176 cultivated isolates revealed that 66.5% was Proteobacteria and the others included unclassified bacteria, Actinobacteria, and Bacilli. Regardless of the pipe materials, Sphingomonas was the predominant species in all biofilms. PCR-DGGE analysis showed that steel pipe exhibited the highest bacterial diversity among the metallic pipes, and the DGGE profile of biofilm on PVC showed three additional bands not detected from the profiles of the metallic materials. Environmental scanning electron microscopy showed that corrosion level and biofilm accumulation were the least in the STS coupon. These results suggest that the STS pipe is the best material for plumbing systems in terms of the microbiological aspects of water quality.
Two hollow fiber membrane biofilm reactors (HF-MBfRs) were operated for autotrophic nitrification and hydrogenotrophic denitrification for over 300 days. Oxygen and hydrogen were supplied through the hollow fiber membrane for nitrification and denitrification, respectively. During the period, the nitrogen was removed with the efficiency of 82-97% for ammonium and 87-97% for nitrate and with the nitrogen removal load of 0.09-0.26 kg NH4+-N/m3/d and 0.10-0.21 kg NO3--N/m3/d, depending on hydraulic retention time variation by the two HF-MBfRs for autotrophic nitrification and hydrogenotrophic denitrification, respectively. Biofilms were collected from diverse topological positions in the reactors, each at different nitrogen loading rates, and the microbial communities were analyzed with partial 16S rRNA gene sequences in denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE). Detected DGGE band sequences in the reactors were correlated with nitrification or denitrification. The profile of the DGGE bands depended on the NH4+ or NO3- loading rate, but it was hard to find a major strain affecting the nitrogen removal efficiency. Nitrospira-related phylum was detected in all biofilm samples from the nitrification reactors. Paracoccus sp. and Aquaspirillum sp., which are an autohydrogenotrophic bacterium and an oligotrophic denitrifier, respectively, were observed in the denitrification reactors. The distribution of microbial communities was relatively stable at different nitrogen loading rates, and DGGE analysis based on 16S rRNA (341f /534r) could successfully detect nitrate-oxidizing and hydrogen-oxidizing bacteria but not ammonium-oxidizing bacteria in the HF-MBfRs.
This study aimed to investigate the biofilm formation, bacterial regrowth, and bacterial community structure in the granular-activated carbon (GAC) filter adsorbers (FAs) used in water treatment plants. In 2005 and 2006, raw water, settled water, GAC FA by depth, and filtered water were collected twice a year from water treatment plants (WTPs) B and S. The number of heterotrophic bacteria, including mesophilic and psychrophilic bacteria, in such collected waters was investigated along with the total number of coliforms therein. Heterotrophic bacteria were detected in most samples, mainly at the surface layers of the GAC FAs, and fewer such bacteria were found in the lower and bottom layers. An increase in the bacterial number, however, was observed in the samples from various depths of the GAC FAs in WTPs B and S compared with the surface layers. An increase in the bacterial number was also detected in the filtered water. This may indicate that there is a regrowth of the bacteria in the GAC FA. Considering, however, that heterotrophic bacteria were not found in the filtered water, it can be deduced that most bacteria are removed in the chlorination process. Coliforms were detected at the surface layer of the GAC FAs, but their regrowth was not observed. MicroLog systems were used to identify the bacteria community distribution. Eight genera and 14 species, including Pseudomonas spp., were detected in WTP B, and 8 genera and 9 species, including Aeromonas spp., in WTP S. Further studies are required to elucidate their role in the biofilms in water treatment processes.
Enterobacter cloacae 를 이용하여 슬라이드 (slide glass) 와 아연도강관조각 (galvanized-iron coupon) 상에 생물막을 형성시킨 후 부착생장세균의 염소에 대한 내성을 측정한 결과 부유생장세균에 비해 각각 14배와 380배의 내성증가를 나타내었다. 또한 입자에 부착된 세균군집의 경우 부유세균군집에 비해 48배로 내성이 증가되었다. 슬라이드와 아연도강관조각을 수돗물에 75일간 접촉하였을때 각각 $4.75 {\times} 10^{4}$ cfu/$cm^{2}$, $1.12 {\times} 10^5 cfu/cm^{2}$의 생물막이 형성되는 것을 관찰하였다. 따라서 수돗물에서의 장내세균과 종속영양세균 입자에 부착 혹은 흡착되거나 응집된 상태로 존재함으로써 잔류염소에 대한 내성을 가지게 되며, 또한 정수과정에서 염소살균을 피하여 비급수계통으로 유입되면 배급수관 내벽에 생물막을 형성하여 잔류업소에 대한 내성을 가지게 됨으로써 배급수계통에서 생장하는 것으로 판단된다.
Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7 is well-characterized as an important food-borne pathogen worldwide and causes human diseases such as diarrhea, hemorrhagic colitis, and hemolytic uremic syndrome (HUS) by producing shiga-like toxin (Stx). It has been reported that a number of dairy foods, including cheese, can act as the source of EHEC O157:H7 infections. In addition to the toxicity of Stx, recently it has been indicated that EHEC O157:H7 possesses virulence factors related to attachment, quorum sensing, and biofilms. Moreover, these novel virulence factors might become critical points to be considered in the future production of food derived from animals. Here, we review the evidences that support these insights on new virulence factors and discuss the potential mechanisms mediating the pathogenesis of EHEC O157:H7 in the dairy food industry.
Citrobacter sp. is a cause of significant opportunistic nosocomial infection and is frequently found in human and animal feces, soil, and sewage water, and even in industrial waste or putrefaction. Biofilm formation is an important virulence trait of Citrobacter sp. pathogens but the process and characteristics of this formation are unclear. Therefore, we employed in vitro assays to study the nutritional and environmental parameters that might influence biofilm formation of C. werkmanii BF-6 using 96-well microtiter plates. In addition, we detected the relative transcript levels of biofilm formation genes by RT-PCR. Our results indicated that the capacity of C. werkmanii BF-6 to form biofilms was affected by culture temperature, media, time, pH, and the osmotic agents glucose, sucrose, NaCl, and KCl. Confocal laser scanning microscopy results illustrated that the structure of biofilms and extracellular polysaccharide was influenced by 100 mM NaCl or 100 mM KCl. In addition, nine biofilm formation genes (bsmA, bssR, bssS, csgD, csgE, csgF, mrkA, mrkB, and mrkE) were found to contribute to planktonic and biofilm growth. Our data suggest that biofilm formation by C. werkmanii BF-6 is affected by nutritional and environmental factors, which could pave the way to the prevention and elimination of biofilm formation using proper strategies.
Bacterial biofilms are spatially structured communities that contain bacterial cells with a wide range of physiological states. The spatial distribution and speciation of copper in unsaturated Pseudomonas putida CZ1 biofilms that accumulated 147.0 mg copper per g dry weight were determined by transmission electron microscopy coupled with energy dispersive X-ray analysis, and micro-X-ray fluorescence microscopy coupled with micro-X-ray absorption near edge structure (micro-XANES) analysis. It was found that copper was mainly precipitated in a $75{\mu}m$ thick layer as copper phosphate in the middle of the biofilm, while there were two living cell layers in the air-biofilm and biofilm-medium interfaces, respectively, distinguished from the copper precipitation layer by two interfaces. The X-ray absorption fine structure analysis of biofilm revealed that species resembling $Cu_3(PO_4)_2$ predominated in biofilm, followed by Cu-Citrate- and Cu-Glutathione-like species. Further analysis by micro-XANES revealed that 94.4% of copper were $Cu_3(PO_4)_2$-like species in the layer next to the air interface, whereas the copper species of the layer next to the medium interface were composed by 75.4% $Cu_3(PO_4)_2$, 10.9% Cu-Citrate-like species, and 11.2% Cu-Glutathione-like species. Thereby, it was suggested that copper was initially acquired by cells in the biofilm-air interface as a citrate complex, and then transported out and bound by out membranes of cells, released from the copper-bound membranes, and finally precipitated with phosphate in the extracellular matrix of the biofilm. These results revealed a clear spatial pattern of copper precipitation in unsaturated biofilm, which was responsible for the high copper tolerance and accumulation of the biofilm.
Kim, Jang-Ho;Jo, Cheo-Run;Rho, Yong-Taek;Lee, Chun-Bok;Byun, Myung-Woo
Food Science and Biotechnology
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제16권2호
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pp.315-319
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2007
Biofilm formation on various surfaces is a well-known phenomenon and it has caused pollution problems, health and safety hazards, and substantial economic loss in many areas including the food industry. In the present study, Gamma irradiation at a dose of 2.0 kGy reduced the bacterial counts of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa suspensions by 6.7 and >6.5 log CFU/mL, respectively, and 30 ppm of sodium hypochlorite effectively reduced the counts of both bacterial suspensions to below the limit of detection ($<2\;log\;CFU/cm^2$). However, in bacterial biofilms attached to stainless steel, gamma irradiation at a dose of 10.0 kGy reduced the counts of S. aureus attached fur 1 hr and overnight by ${\geq}5.1\;and\;5.0\;log\;CFU/cm^2$, respectively. Gamma irradiation at a dose of 1.0 kGy reduced the counts of P. aeruginosa counts to below the limit of detection ($<2\;log\;CFU/cm^2$). On the contrary, S. aureus and P. aeruginosa cells attached to stainless steel chips were difficult to eliminate using sodium hypochlorite. Four hundred ppm of sodium hypochlorite reduced the counts of S. aureus and P. aeruginosa attached for 1 hr by 2.5 and $3.3\;log\;CFU/cm^2$, respectively.
Kim, Hyeon Joong;Lee, Jae Hoon;Ahn, Dong Uk;Paik, Hyun-Dong
한국축산식품학회지
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제40권6호
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pp.1001-1013
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2020
The formation of biofilms on the enamel surface of teeth by Streptococcus mutans is an important step in dental plaque formation, demineralization, and early caries because the biofilm is where other bacteria involved in dental caries attach, grow, and proliferate. The objectives of this study were to determine the effect of phosvitin (PSV) on the biofilm formation, exopolysaccharides (EPS) production, adherence activity of S. mutans, and the expression of genes related to the compounds essential for biofilm formation (quorum-sensing inducers and components of biofilm matrix) by S. mutans. PSV significantly reduced the biofilm-forming activity of S. mutans and increased the degradation of preformed biofilms by S. mutans. PSV inhibited the adherence activity of S. mutans by 31.9%-33.6%, and the production of EPS by 62%-65% depending upon the strains and the amount of PSV added. The expressions of genes regulating the production of EPS and the quorum-sensing-inducers (gtfA, gtfD, ftf, relA, vicR, brpA, and comDE) in all S. mutans strains were down-regulated by PSV, but gtfB was down-regulated only in S. mutans KCTC 5316. Therefore, the anti-biofilm-forming activity of PSV was accomplished through the inhibition of biofilm formation, adherence activity, and the production of quorum-sensing inducers and EPS by S. mutans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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