There has been an impetus in the development of biocontrol agents (BCAs) with the removal of a number of chemical compounds in the market, especially in the European Union. This has been a major driver in the development of Integrated Pest Management systems (IPM) for both pest and disease control. For control of mycotoxigenic fungi, there is interest in both control of colonization and more importantly toxin contamination of staple food commodities. Thus the relative inoculum potential of biocontrol agent vs the toxigenic specie sis important. The major bottlenecks in the production and development of formulations of biocontrol agents are the resilience of the strains, inoculum quality and formulation with effective field efficacy. It was recently been shown for mycotoxigenic fungi such as Aspergillus flavus, under extreme climate change conditions, growth is not affected although there may be a stimulation of aflatoxin production. Thus, the development of resilient biocontrol strains which can may have conserved control efficacy but have the necessary resilience becomes critical form a food security point of view. Indeed, under predicted climate change scenarios the diversity of pests and fungal diseases are expected to have profound impacts on food security. Thus, when examining the identification of potential biocontrol strains, production and formulation it is critical that the resilience to CC environmental factors are included and quantified. The problems in relation to the physiological competence and the relative humidity range over which efficacy can occur, especially pre-harvest may be increase under climate change conditions. We have examined the efficacy of atoxigenic strains of A. flavus and Clanostachys rosea and other candidates for control of A. flavus and aflatoxin contamination of maize, and for Fusarium verticillioides and fumonisin toxin control. We have also examined the potential use of fluidized-bed drying, nanoparticles/nanospheres and encapsulation approaches to enhance the potential for the production of resilient biocontrol formulations. The objective being the delivery of biocontrol efficacy under extreme interacting climatic conditions. The potential impact of climate change factors on the efficacy of biocontrol of fungal diseases and mycotoxins are discussed.
Cultivation of a biocontrol agent on a certain medium often results in reduced biocontrol efficacy and alters physiological state. In our previous study, Burkholderia gladioli strain B543 with long-term subculture on tryptic soy agar resulted in significantly reduced biocontrol ability against cucumber damping-off caused by P. ultimum. Therefore, we investigated the influence of laboratory culturing media on biocontrol activity and physiological state of Burkholderia gladioli strain B543 by using long-term repeated culture on a certain medium. When isolate B543 were successionally cultured on King's B agar (KBA), tryptic soy agar, nutrient agar (NA), or soil extract agar more than 20 times, the isolate cultured on KBA or NA showed a significantly enhanced biocontrol efficacy and higher population density in the rhizosphere of cucumber compared to that of the others. However, the isolates cultured on KBA more than 20 times showed the lowest production of protease, siderophore, or antifungal substance(s), measured by skim milk agar, Chrome-Azurol-S agar, and potato dextrose agar amended with 10% of the culture filtrate, respectively. Our results suggest that adaptation to proper culturing medium can alter biocontrol ability and physiological state, and we must consider laboratory media in optimizing the use of biocontrol agents.
Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum has become a serious problem world-wide and relies heavily on chemical fungicides. We selected Pseudomonas sp. NJ134 to develop an effective biocontrol strategy. This strain shows strong antagonistic activity against F. oxysporum. Biochemical analyses of ethyl-acetate extracts of NJ134 culture filtrates showed that 2,4-diacetylphloroglucinol (DAPG) was the major compound inhibiting in vitro growth of F. oxysporum. DAPG production was greatly enhanced in the NJ134 strain by adding mannitol to the growth media, and in vitro antagonistic activity against F. oxysporum increased. Bioformulations developed from growth of NJ134 in sterile bean media with mannitol as the carbon source under plastic bags resulted in effective biocontrol efficacy against Fusarium wilt. The efficacy of the bioformulated product depended on the carbon source and dose. Mannitol amendment in the bean-based formulation showed strong effective biocontrol against tomato Fusarium wilt through increased DAPG levels and a higher cell density compared to that in a glucose-amended formulation. These results suggest that this bioformulated product could be a new effective biocontrol system to control Fusarium wilt in the field.
An understanding of the contribution of secondary metabolites (SMs) to the antagonistic and biocontrol activities of bacterial biocontrol agents serves to improve biocontrol potential of the strain. In this study, to evaluate the contribution of each SM produced by Pseudomonas fluorescens NBC275 (Pf275) to its antifungal and biocontrol activity, we combined in silico analysis of the genome with our previous study of transposon (Tn) mutants. Thirteen Tn mutants, which belonged to 6 biosynthetic gene clusters (BGCs) of a total 14 BGCs predicted by the antiSMASH tool were identified by the reduction of antifungal activity. The biocontrol performance of Pf275 was significantly dependent on 2,4-diacetylphloroglucinol and pyoverdine. The clusters that encode for arylpolyene and an unidentified small linear lipopeptide influenced antifungal and biocontrol activities. To our knowledge, our study identified the contribution of SMs, such as a small linear lipopeptide and arylpolyene, to biocontrol efficacy for the first time.
Bae, Yeoung-Seuk;Guy R. Kundsen;Louise-Marie C. Dandurand
The Plant Pathology Journal
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v.18
no.1
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pp.30-35
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2002
The hyphal growth and biocontrol efficacy of Trichodemo harzianum in soil may depend on its interactions with biotic components of the soil environment. The effect of soil microbial biomass on growth and biocontrol efficacy of T. hanianum isolate ThzIDl-M3 (green fluorescent protein transformant) was investigated using artificially prepared different levels of soil microbial biomass (153,328, or 517ug biomass carbon per g of dry soil; BC). The hyphal growth of T. harzanum was significantly inhibited in the soil with 328 or 517 $\mu$g BC compared with 153 ug BC. When ThzIDl-M3 was added to the soils as an alginate pellet formulation, the recoverable population of ThzIDl-M3 varied, but the highest population occurred in 517ug BC. Addition of alginate pellets of ThzIDl-M3 to the soils (10 per 50 g) resulted in increased indigenous microbial populations (total fungi, bacterial fluorescent Pseudomonas app., and actinomycetes). Furthermore, colonizing ability of ThzIDl-M3 on sclerotia of Sclerotinia sclerotiorum was significantly reduced in the soil with high revel of BC. These results suggest that increased soil microbial biomass contributes to increased interactions between introduced T. harzianum and soil microorganisms, consequently reducing the biocontrol efficacy of 1T. harzianum.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.87.2-87
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2003
Long-term repeated culturing of biocontrol agents on a certain medium often results in reduced biocontrol efficacy and altered physiology. Effect of culturing media on biocontrol ability and physiological state of Burkholderia gladioli strain B543 was investigated. Over 20 times repeated cultivation of B. giadioli strain B543 on Kings B medium or nutrient agar medium showed improved biological control of cucumber damping-off caused by Pythium ultimum, while one time cultivation on KB or NA did not. The repeated cultivation also induced the physiological changes of the biocontrol agent such as antifungal activity and the production of protease and siderophore. Our result indicates that adaptation to proper culturing medium can alter biocontrol ability and must consider in optimizing the use of biocontrol agents.
Salmonella is one of the principal causes of foodborne outbreaks. As traditional control methods have shown less efficacy against emerging Salmonella serotypes or antimicrobial-resistant Salmonella, new approaches have been attempted. The use of lytic phages for the biocontrol of Salmonella in the food industry has become an attractive method owing to the many advantages offered by the use of phages as biocontrol agents. Phages are natural alternatives to traditional antimicrobial agents; they have proven effective in the control of bacterial pathogens in the food industry, which has led to the development of different phage products. The treatment with specific phages in the food industry can prevent the decay of products and the spread of bacterial diseases, and ultimately promotes safe environments for animal and plant food production, processing, and handling. After an extensive investigation of the current literature, this review focuses predominantly on the efficacy of phages for the successful control of Salmonella spp. in foods. This review also addresses the current knowledge on the pathogenic characteristics of Salmonella, the prevalence of emerging Salmonella outbreaks, the isolation and characterization of Salmonella-specific phages, the effectiveness of Salmonella-specific phages as biocontrol agents, and the prospective use of Salmonella-specific phages in the food industry.
Fifty five species of medicinal plant materials were tested for their antifungal activity in vitro against Rhizoctonia solani AG 2-1 and Trichoderma harzianum to select plant species that can be used to improve the biocontrol efficacy of T. harzianum. Six species were effective against R. solani AG 2-1 but were also antagonistic to T. harzianum, except for Cinnamomum loureirii stem bark (CSB). CSB inhibited mycelial growth of R. solani AG 2-1 by 73.7% but showed an inhibitory effect on mycelial growth of T. harzianum by only 2.2%. Scanning electron microscophs showed that the CSB treatment resulted in deformed R. solani AG 2-1 hyphal cells, and transmission electron microscophs revealed degenerated cell structures such as degenerated cytoplasm and disentangled cell wall and the accumulation of electron-dense inclusions (asterisks) in the CSB treatment. The biocontrol efficacy of radish damping-off increased greatly following the combined treatments of T. harzianum and CSB and the combined treatment increased efficacy from 6.4-23.1% to 37.1-87.3% compared with either treatment alone. CSB did not affect T. harzianum population growth, as it was almost the same in rice-bran peat medium (culture) amended with 0.1% and 1.0% CSB powder as in non-amended medium. The formulation of T. harzianum in rice-bran peat medium amended with CSB powder reduced the severity of radish damping-off by 80.6%, suggesting that T. harzianum and CSB can be formulated as a biocontrol product for the control of R. solani AG 2-1.
Despite the increased interests in biological control of soilborne diesease for environmental protection, biological control of bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum have not provided consistent or satisfying results. To enhance the control efficacy and reducing the inconsistency and variability, combinations of specific strains of microorganisms, each having a specific mechanism of control, were applied in this study. More than 30 microorganisms able to reduce the activity of pathogen by specific mechanism of action were identified and tested for their disease suppressive effects. After in vitro compatibility examinations, 21 individual strains and 15 combinations were tested in the greenhouse. Results indicated three-way combinations of different mode of control, TS3-7+A253-16+SKU78 and TS1-5+A100-1+SKU78, enhanced disease suppression by 70%, as compared to 30-50% reduction for their individual treatments. This work suggests that combining multiple traits antagonizing the pathogen improve efficacy of the biocontrol agents against Ralstonia solanacearum.
We examined the efficacy of a bacterium for biocontrol of the root-knot nematode (RKN) Meloidogyne hapla in carrot (Daucus carota subsp. sativus) and tomato (Solanum lycopersicum). Among 542 bacterial isolates from various soils and plants, the highest nematode mortality was observed for treatments with isolate C1-7, which was identified as Bacillus cereus based on cultural and morphological characteristics, the Biolog program, and 16S rRNA sequencing analyses. The population density and the nematicidal activity of B. cereus C1-7 remained high until the end of culture in brain heart infusion broth, suggesting that it may have sustainable biocontrol potential. In pot experiments, the biocontrol efficacy of B. cereus C1-7 was high, showing complete inhibition of root gall or egg mass formation by RKN in carrot and tomato plants, and subsequently reducing RKN damage and suppressing nematode population growth, respectively. Light microscopy of RKN-infected carrot root tissues treated with C1-7 showed reduced formation of gall cells and fully developed giant cells, while extensive gall cells and fully mature giant cells with prominent cell wall ingrowths formed in the untreated control plants infected with RKNs. These histopathological characteristics may be the result of residual or systemic biocontrol activity of the bacterium, which may coincide with the biocontrol efficacies of nematodes in pots. These results suggest that B. cereus C1-7 can be used as a biocontrol agent for M. hapla.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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