Peptides are naturally occurring biological molecules that are found in all living organisms. These biologically active peptides play a key role in various biological processes. The aim of this study is the extraction and the purification of bioactive materials that induce relaxation of an apical muscle from the pyloric caeca of Patiria pectinifera. The acidified pyloric caeca extract was partially separated by the solid phase extraction using a stepwise gradient on Sep-Pak C18 cartridge. Among the fractions, materials eluted with 60% methanol/0.1% trifluoroacetic acid was put a thorough of a series of high performance liquid chromatography (HPLC) steps to isolate a neuropeptide with relaxation activity. The purified compound was eluted at 28% acetonitrile in 0.1% trifluoroacetic acid with retention time of 25.8 min on the CAPCELL-PAK C18 reversed-phase column. To determine the molecular weight and the amino acid sequence of the purified peptide, LC-MS and Edman degradation method were used, respectively. The primary structure of the peptide was determined to be FGMGGAYDPLSAGFTD which corresponded to the amino acid sequence of a starfish myorelaxant peptide (SMP) isotype (SMPb) found in the cDNA sequence encoding SMPa and its isotypes. In this study, a muscle relaxant neuropeptide (SMPb) has been isolated from pyloric caeca of starfish P. pectinifera. This is the first report of SMPb isolation on the protein level from P. pectinifera.
Owing to its diverse range of bioactive compounds, Ganoderma lucidumhas garnered significant research attention for health promotion and disease prevention. Ganodermanondiol, which has a triterpenoid structure, is one of the major active compounds of G. lucidum. In the present study, the anti-inflammatory effects of ganodermanondiol were investigated to evaluate its usefulness as a functional ingredient. Ganodermanondiol (0.5-2 ㎍/mL) significantly inhibited the production of nitric oxide (NO), the expression of the cytokines tumor necrosis factor (TNF)??and interleukin 6 (IL-6), and the expression of cyclooxygenase (COX)-2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 (murine macrophage) cells. Ganodermanondiol (0.5-2 ㎍/mL) also inhibited the phosphorylation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal molecules, including p38 and c-Jun N-terminal protein kinase (JNK) in RAW 264.7 cells. Ganodermanondiol significantly inhibited the essential factors involved in the inflammatory responses of RAW 264.7 cells and would, therefore, serve as a potential prophylactic and therapeutic agent for immune-related diseases.
Milk exosomes contain several bioactive molecules, including lipids, proteins, and miRNAs, which enhance immune response. This study aimed to assess the resistance effects of bovine colostrum exosomes (BCEs) on pathogenic microbial infections in a Caenorhabditis elegans model. BCEs have been shown to enhance the protective response of C. elegans to pathogenic bacterial infections. Our study revealed that BCE extended the lifespan of worms compared to control OP50 worms. In addition, nematode colostrum exosomes promoted nematode resistance to four pathogenic bacteria and prolonged their lifespan in a killing assay. In contrast, mature milk-derived exosomes (BME) did not affect the resistance and lifespan of nematodes exposed to pathogenic bacteria. BCE exposure extended the lifespan of C. elegans against pathogenic infections by stimulating the innate immune response and increasing antimicrobial protein expression. Using biological process-related gene ontology (GO) enrichment analysis, the significantly upregulated GO terms related to C. elegans immunity in BCE-exposed C. elegans included defense, innate immunity, and immune responses. This study demonstrated that BCE enhanced the host defense of C. elegans to prolong its lifespan, thereby suggesting a new natural product against infection by pathogenic bacteria.
Male infertility can be caused by genetic anomalies, endocrine disorders, inflammation, and exposure to toxic chemicals or gonadotoxic treatments. Therefore, several recent studies have concentrated on the preservation and restoration of fertility to enhance the quality of life for affected individuals. It is currently recommended to biobank the tissue extracted from testicular biopsies to provide a later source of spermatogonial stem cells (SSCs). Another successful approach has been the in vitro production of haploid male germ cells. The capacity of SSCs to transform into sperm, as in testicular tissue transplantation, SSC therapy, and in vitro or ex vivo spermatogenesis, makes them ideal candidates for in vivo fertility restoration. The transplantation of SSCs or testicular tissue to regenerate spermatogenesis and create embryos has been achieved in nonhuman mammal species. Although the outcomes of human trials have yet to be released, this method may soon be approved for clinical use in humans. Furthermore, regenerative medicine techniques that develop tissue or cells on organic or synthetic scaffolds enriched with bioactive molecules have also gained traction. All of these methods are now in different stages of experimentation and clinical trials. However, thanks to rigorous studies on the safety and effectiveness of SSC-based reproductive treatments, some of these techniques may be clinically available in upcoming decades.
가래나무 잎을 원적외선 30, 40 및 50 v에서 각각 10, 20 및 30분을 처리하였다. 원적외선을 조사한 잎의 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, 잎 추출물의 DPPH radical 소거 활성 등을 분석한 결과, 원적외선 30 v에서 20분간 조사한 처리구에서 총 폴리페놀 함량은 25.43 mg/g로 , 총 플라보노이드 함량은 39.38 mg/g으로 가장 높게 나타났다. 그 반면에, 원적외선 50 v에서 30분간 조사한 처리구에서 총폴리페놀 함량은 16.93 mg/g으로, 총플라보노이드 함량은 23.78 mg/g으로 가장 낮게 나타났다. 전체적으로 원적외선 처리에 의해 잎에 함유한 항산화 물질의 함량의 증가는 물론, 그 추출물의 항산화 활성도 증가하는 것을 알 수 있었다. 하지만 원적외선 처리가 가래나무에 함유한 어떠한 특정적인 물질들의 증가에 관하여서는 추후에 더욱 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.
본 연구는 대식세포에서 LPS를 이용하여 염증 유사 세포 모델을 만들고 염증 유사 대식세포 모델에서 성체줄기세포의 면역 조절 능력을 평가하였다. LPS 자극에 의해 증가된 IL-1β, TNF-α 및 IL-10의 생성은 성체줄기세포를 공배양한 실험군 뿐만 아니라 성체줄기세포를 배양한 상층 배양액을 처리한 실험군에서도 동일한 효과를 나타내었으며, 또한 성체줄기세포 유래 엑소좀을 염증 유사 대식세포 모델에 처리하여 유사한 결과를 관찰하였다. 이 결과는 성체줄기세포 자체의 염증 억제 기능보다는 성체줄기세포 유래 엑소좀을 포함하여 성체줄기세포가 분비하는 bioactive molecules에 의해 세포 간 신호 전달이 이루어지고 있음을 의미하며, 이러한 엑소좀은 염증 관련 질환 분야에 치료적 적용이 가능하고 또한 새로운 염증 치료제 개발의 툴로 사용될 수 있음을 시사한다.
Trichoderma species are a rich source of metabolites, but less known for biomedical potential. This work deals with antibacterial and antioxidant potentials of intracellular non-cytotoxic metabolites, extracted from Trichoderma atroviride (KNUP001). A total of 53 fractions was collected by column chromatography and tested for cytotoxicity by MTT assay. Only one fraction (F41) was found to be non-toxic to Vero cells with $95.4{\pm}0.61%$ of survival. The F41 was then subjected to chemical analysis, antibacterial and antioxidant assays. The F41 at $500{\mu}g.ml^{-1}$ showed the total antioxidant of $48.70{\pm}2.90%$, DPPH radical scavenging activity of $37.25{\pm}2.25$, nitric oxide (NO) radical scavenging activity of $54.55{\pm}1.95$ and $H_2O_2$ radical scavenging activity of $43.75{\pm}3.21$. The F41 at $25{\mu}g.ml^{-1}$ displayed antibacterial activity against E. coli ($14.25{\pm}0.2mm$), P. mirabilis ($10.4{\pm}0.6mm$), S. dysenteriae ($18.6{\pm}03mm$), S. paratyphi A ($14.1{\pm}1.1mm$), E. aerogenes ($5.6{\pm}0.4mm$) and S. marcescens ($14.25{\pm}0.2mm$). GC-MS analysis revealed the dominant presence of oleic acid C 18.1 (63.18%), n-hexadecanoic acid (6.17%), and ethyl oleate (4.93%) and potent molecules such as 8-[(2E)-2-(3-hydroxybenzylidene)hydrazinyl]-1,3,7-trimethyl-3,7-dihydro-1H-purine-2,6-dione, 2-(Dimethylamino)ethyl (1Z)-N-hydroxy-2-(4-morpholinyl)-2-oxoethanimidothioate, Fluorene in the F41, and virtual study revealed that these molecules are likely responsible for the antibacterial activities of F41. Hence, further investigation deserves on purification and characterization of the active metabolites from T. atroviride strain KNUP001 towards developing molecular leads to effective antibacterial drugs, and non-toxic to host cells.
세스퀴테르펜 락톤(Sesquiterpene lactones; STL) 화합물은 테르페노이드의 일종으로 주로 국화과에서 발견이 되고 강한 세포 독성을 나타내는 생리학적 특성을 지니고 있다. 이러한 세스퀴테르펜 락톤은 강한 세포 독성으로 인해 연구가 미미하였으나, 최근 화학적 변형을 통해 독성이 적은 형태로 합성하여 새로운 의약품 개발로서의 연구가 활발히 진행되고 있다. 세스퀴테르펜 락톤 화합물인 artemisinin 및 mipsagargin 화합물은 현재 말라리아 및 종양성장에 대한 약물로 사용되고 있다. 또한 항산화, 간보호, 항바이러스, 항균, 항종양 및 항노화 등의 생리활성 효능이 보고되어 있으며, 종양세포에서 자멸사를 유도하여 항암제로서의 연구가 진행되고 있다. 본 연구에서는 세스퀴테르펜 락톤 화합물인 artemisinin, costunolide, thapsigargin, arglabin, parthenolide, alantolactone, cynaropicrin, helenalin, 및 santonin의 생리활성 효능에 대한 연구 동향을 검토하고자 한다.
Kim, Beom-Tae;O, Kwang-Joong;Chun, Jae-Chul;Hwang, Ki-Jun
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제29권6호
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pp.1125-1130
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2008
A series of dihydroxylated chalcone derivatives with diverse substitution patterns on a phenyl ring B and the para-substituents on a phenyl ring A were prepared, and their radical scavenging activities were evaluated by simple DPPH test to determine quantitative structure-activity relationship in these series of compounds. The chalcone compounds with the ortho- (i.e. 2',3'- and 3',4'-) and para- (i.e. 2,5'-) substitution patterns show an excellent antioxidant activities (80-90% of control at the concentration of 50 $\mu$M) which are comparable to those of ascorbic acid and $\alpha$ -tocopherol as positive reference materials. On the contrary, the compounds with meta- (i.e. 2',4'-, 3',5'-) substitution pattern demonstrate very dramatic decrease in activities which are around 25% of the control even at the concentration of 200 $\mu$ M (IC50 > 200 $\mu$ M). These dramatic differences could be interpreted in terms of the ease formation of fairly stable semiquinone radicals from the ortho- and parasubstituted chalcone molecules through facilitating electron delocalization. Our results indicate that the substitution patterns of two hydroxyl groups on ring B are very important structural factors for their radical scavenging activity enhancement. Meanwhile, the substituents at para-position of the phenyl ring A of chalcones have no influence on the activity.
역류크로마토그래피 (counter-current chromatography, CCC)는 일련의 분배과정을 한 개의 튜브 내에서 연속적으로 일어나도록 고안된 시스템으로서 컬럼으로는 polytetrafluoroethylene(PTFE) 튜브가 다층으로 감겨있는 원통형의 홀더 3개가 서로 기어를 통해 물려있으며, 홀더가 회전과 공전을 통해 튜브의 꼬임을 방지하는 rotary seal-free flow centrifuge 시스템으로 되어있다. 역상 HPLC (reverse phase HPLC)에서는 고정상이 실리카에 결합된 유기물단 (organic moiety)이 수용성 이동상 물질에 의해서 용매화 (solvated)되는 반면 CCC는 실리카 대신에 강한 중력장에 의해 분리되는 자유로운 용매가 고정상이 되며 이 고정상의 부피비율은 20-30%에 이른다. 즉 고체담체에 결합된 유기관능기 대신에 물과 섞이지 않는 hexane 같은 유기용제가 고정상으로 사용되는 것이다. 고속역류크로마토그래피 (high-performance countercurrent chromatography, HPCCC)는 CCC의 기능을 향상시킨 분리시스템으로서 높은 중력장하에서 높은 이동상 속도와 높은 분리효율과 짧은 분리시간을 특징으로 하고 있다. 특히 mg 단위에서 kg 단위로의 스케일업이 선형적으로 가능하다는 큰 장점을 지니고 있다. 이 총설에서는 현재까지 개발된 CCC의 일반적인 이론을 간략히 정리하고 최신 HPCCC 장비의 적용 예를 살펴보고 그 응용분야로서 생리활성물질의 분리 및 정제와 관련된 연구동향을 정리하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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