Objectives: As a first step to study the anticaries effect of ethanol alone, we investigated the effects of ethanol on the expression levels of the atpB gene and proton permeability of Streptococcus mutans in suspension cultures. Methods: S. mutans UA159 was grown in brain heart infusion medium at either pH 4.8 or 6.8. The total extracted RNA was reverse-transcribed into cDNA using a $Superscript^{TM}$ First-Strand Synthesis System. The resulting cDNA and negative controls were amplified by ABI PRISM 7700 real-time PCR system with SYBR Green PCR Master Mix. For proton flux assay, bacterial suspensions were titrated to pH 4.6 with 0.5 M HCl, and then additional 0.5 M HCl was added to decrease the pH values by approximately 0.4 units. The subsequent increase in pH was monitored using a glass electrode. Ten percent (v/v) butanol was added to the suspensions at 80 min to disrupt the cell membrane. Results: In a concentration-dependent manner, ethanol alone not only decreased the growth rate of S. mutans and the expression of the atpB gene but also increased the proton permeability at both pH 4.8 and 6.8. Conclusions: These findings suggest that ethanol has the potential for an anticaries ingredient. We believe that ethanol may be used together with fluoride and/or other cariostatic agents in order to develop better anticaries toothpastes and/or mouthrinses.
Phylogenetic studies were conducted for 42 populations of Korean viola based on matK gene and atpB-rbcL intergenic spacer region of chloroplast DNA. In the matK tree, section Chamaemelanium and Dischidium were formed as a distinct group. Five subsections of section Nomimium were paraphyletic. In atpB-rbcL intergenic spacer region analysis, two species of sect. Chamaemelanium were monophyletic, and section Dischidium was placed sister to subsection patellares clade except for V. keiskei. Five subsections of section Nomimium were also paraphyletic as matK tree. the separate data analyses were incongruent in the relationships among 42 populations, especially for the position of section Dischidium and V. keiskei. The combined analyses of two chloroplast regions showed three major clades; section Chamaemelanium and Dischidium (x=6) formed a sister to subsections Hypocarpae and Trigonocarpae (x=10) clade; subsections Bilobatae and vaginatae (x=10 or 12) formed a clade with V. keiskei; and 19 populations of subsection patellares (x=12) except for V. keiskei were recognized as an independent clade within section Nomimium. Although combined data suggest three major clades of Korean viola, the origins of each clade from outgroup were discordance with previous ITS and trnL-F data.
Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator (Arnt) belongs to bHLH-PAS protein family. Here, we study the role of Arnt in both cell growth and glucose metabolism. Our results demonstrated that the absence of Arnt does affect ATP homeostasis but not cell growth in monolayer-cultured mouse hepatoma cells. ATP level of Arnt defective BpRc1 hepatoma cells is less than that of wild type hepatoma cells in both normoxia and hypoxia. BpRc1 cells also fail to increase the expression of glycolytic enzymes in response to hypoxia. Our results suggest that Arnt is essential for glucose metabolism and ATP production but not for cell growth.
Park, Moo-Hyun;Kwon, Hyog-Young;Jung, Seung-Ha;Pyo, Suhk-Neung;Rhee, Dong-Kwon
Proceedings of the PSK Conference
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2002.10a
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pp.336.1-336.1
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2002
HSP100/Clp family functions as molecular chaperone and ATP dependent protease. The Streptococcus pneumoniae ClpL. a homologue of bacterial ClpB and yeast cytosolic HSP 104. is one of major heat shock proteins but its biochemical properties are unknown. In this study. ClpL in Streptococcus pneumoniaewas characterized using histidine tagged recombinant ClpL. When ATP hydrolysis activity was compared in the presence or absence of a variety of nucleotides or divalent ions. either ATP or Mn$2^+$ ion was found to increase significantly the rate of ATP hydrolysis. Furthermore. glutaraldehyde cross-linking and subsequent native-PAGE analfysis showed that ClpL forms dimer. but in the presence of 4 mM concentration of $Mn^{2+}$ion as a cofactor for ATP hydrolysis and oligormerization in vitro.
This work reports studies of the catalytic and structural properties of pyridoxal kinase (ATP: pyridoxal 5' -phosphotransferase, EC. 2.7.1.35), Pyridoxal kinase catalyzes the phosphorylation of vitamin $B_6$ (pyridoxal, pyridoxamine, pyridoxine) using ATP-Zn as a phosphoryl donor. The enzyme purified from brain tissues is made up of two identical subunits of 40 kDa each. Native enzyme was inhibited by a substrate analogue, pyridoxal-oxime. Limited chymotrypsin digestion of pyridoxal kinase yields two fragments of 24 and 16 kDa with concomitant loss of catalytic activity. These fragments were isolated by DEAE ion exchange chromatography and used for binding studies with fluorescent ATP and pyridoxal analogues. The spectroscopic properties of both fluorescent pyridoxal analogue and Anthraniloyl ATP (Ant-ATP) bound to the 24 kDa fragment are indistinguishable from those of both pyridoxal analogue and Ant-ATP bound to the native pyridoxal kinase, respectively. The small 16 kDa fragment, generated by proteolytic cleavage of the kinase, does not bind any of the substrate analogues. Binding characteristics of Ant-ATP were extensively studied by measuring the changes in fluorescence spectra at various conditions. From the results presented herein, it is postulated that the structural domain associated with catalytic activity comprises approximately one-half of the molecular mass of pyridoxal kinase (24 kDa). whereas the remaining portion (16 kDa) of the enzyme contains a regulatory binding domain.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.38
no.8
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pp.715-720
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2014
In order to maximize the effect of left ventricular assist device (LVAD) on ventricular unloading, the therapy should be begun at appropriate level of heart failure severity. We predicted pumping efficacy of LVAD according to the severity of heart failure theoretically. We used 3 dimensional finite element model of ventricle coupled with 6 Wind-kessel compartmental model of vascular system. Using the computational model, we predicted cardiac responses such as contractile ATP consumption of ventricle, left ventricular pressure, cardiac output, ejection fraction, and stroke work according to the severity of ventricular systolic dysfunction under the treatments of continuous LVAD. Contractile ATP consumption, which indicates the ventricular energetic loading condition decreased maximally at the $5^{th}$ level heart-failure under LVAD therapy. We conclude that optimal timing for LVAD treatment is $5^{th}$ level heart-failure when considering LVAD treatment as "bridge to recovery".
Kidneybean(Phaseolus vulgaris L.) and buckwheat(Fagopyrum esculentum M nch) seedlings grown with Hoagland solution to a height of 7 to 10 cm in the earthen pot containing sand were used for experimental plants. One group of the experimental plants was irrigated with Hoagland solution composed of various Pb-concentratons of 0 to 1000ppm containing 30ppm, and the other group was irrigated with Hoagland solution composed of various P-concentrations of 0 to 1,000ppm containing 30ppm Pb for a month during June and July in 1979. By Pb-surplus over 100ppm, the margins of buckwheat were curled down and turned into yellow-brown chlorosis, but the leaves of kidneybean were become dark-green at an early stage, and then developed chlorosis, finally shedded earlier than the control. Pb-toxicity was similar to the symptoms of P-deficiency. The ratio, 3/1 of chlorophyll a/b at an early stage, was unaffected by Pb-surplus or P-deficiency, but at the later stage it was altered. ATP content with Pb-surplus of 100ppm was decreased by 69% in kidneybean leaves and by 38% in buckwheat leaves, and it with P-deficiency was decreased by 75% in kidneybean leaves and by 43% in buckwheat leaves. In the assay of ATP content of the leaves at intervals of three hours for one day of July in the year, the rhythms of ATP level were unaffected by light or temperature although the amplitude of the level was modified. The rhythms of Pb-surplus and P-deficiency plants were observed at the lower range of ATP content than that of control.
A systematic review for Korean Liliopsida was carried out with rbcL and atpB sequence data. Congruent phylogenetic trees were obtained from two different data sets. Korean Liliopsida consists of the three orders, Asparagales, Liliales, and Dioscoreales sensu Dahlgren et al. Members of Dioscoreales were used as an outgroup for inferring relationships among Asparagales and Liliales in the molecular studies. Iridaceae showed close relationship to Asparagales both in the rbcL and atpB sequence trees rather than to Liliales. Family Nartheciaceae (previously included within Melanthiaceae s. lat.) appeared as a paraphyletic assemblage basal within Liliales, but did not show relationships to other orders. Genera of Ruscaceae (previously Convallariaceae) like Disporum, Clintonia, and Streptopus had to be transferred to Colchicaceae, Liliaceae, and Calochortaceae, respectively. A revised list of families for Korean members of Liliopsida is suggested.
Neuronal growth regulator 1 (NEGR1) is a GPI-anchored membrane protein that is involved in neural cell adhesion and communication. Multiple genome wide association studies have found that NEGR1 is a generic risk factor for multiple human diseases, including obesity, autism, and depression. Recently, we reported that Negr1-/- mice showed a highly increased fat mass and affective behavior. In the present study, we identified Na/K-ATPase, beta1-subunit (ATP1B1) as an NEGR1 binding partner by yeast two-hybrid screening. NEGR1 and ATP1B1 were found to form a relatively stable complex in cells, at least partially co-localizing in membrane lipid rafts. We found that NEGR1 binds with ATP1B1 at its C-terminus, away from the binding site for the alpha subunit, and may contribute to intercellular interactions. Collectively, we report ATP1B1 as a novel NEGR1-interacting protein, which may help deciphering molecular networks underlying NEGR1-associated human diseases.
Changes in ATP and related compounds, TMAO, TMA, creatine and creatinine were analyzed to establish the processing conditions for rapid- and low salt-fermented liquefaction of anchovy(Engrulis japonica) extracts during fermentation. Experimental sample A: chopped whole anchovy, adding 20% water, heating at $50^{\circ}C$ for 9 hrs and then adding 10% NaCl. Sample B: chopped whole anchovy, adding 20% water, heating at $50^{\circ}C$ for 9 hrs and then adding 13% NaCl. Sample C: chopped whole anchovy adding 13% NaCl. Sample D: whole anchovy adding 17% NaCl. ATP, ADP, AMP and IMP were broken down during fermentation period, while inosine and hypoxanthine or hypoxanthine were detected in each fermented liquefaction of anchovy. However the amounts of them were varied from collection to collection according to the pretreatment methods. Possibly ATP and their related compounds will not make a great contribution to the umami taste in fermented liquefaction of anchovy. The contents of TMAO were decreased during fermentation period, ranging from 3 to 15 mg/100g in the fermented liquefaction of anchovy after 180 days. The TMA contents were increased slowly during fermentation period, ranging from 60 to 114 mg/100g in the 180 days specimens, however their contents were varied from sample to sample. The contents of creatine and creatinine were increased during early fermentation period, and then they were decreased in the last period. As for distribution of nitrogen in the anchovy extracts, the contribution of creatine and creatinine to the extractive nitrogen was occupying 6.8, 5.7, 4.6 and 5.7% in the experimental sample A, B, C and D, respectively. The contribution of ATP and related compounds to the extractive nitrogen was occupying 2.1, 2.4, 2.2 and 2.7% in the experimental sample A, B, C and D, respectively. The contribution of TMAO and TMA to the extractive nitrogen was very low as they are occupying $0.7{\sim}1.2%$ in the four experimental samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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