To extract arabinogalactan from larch (Larix Leptolepis), chips immersed with water(20-$90^{\circ}C$) for 1hr, were defiberized by refiner. The liquors were recovered and purified to pure arabinogalactan by ion exchange resin(IRC-50 a. IR-45) or MgO. Additionally the optimal condition in purification with MgO was also investigated. 1. The amounts of solids(crude sugars) and pure arabinogalctan in solids are 8.6-11.3% and 7.3-8.5%(raw material = 100), respectively. 2. Phenolic materials in crude sugars are removed up to 96-89% by ion exchange resin and 94-88% by MgO, while recovery yields of pure arabinogalactan are 81-75% on purification with ion exchange resin and 91-87% on purification with MgO. 3. The optimal conditions of purification with MgO are the addition of 35mg MgO/0.5g of crude sugars, 45 minutes at $70^{\circ}C$, or 25 mg MgO, 30 minutes at $85^{\circ}C$.
대두 및 두유박의 주요 다당류인 대두 arabinogalactan(SAG)을 이용하여 갈락토올리고당을 생산하고자 SAG 가수분해효소인 $\beta$-1, 4-galactanase를 이용하여 대두 갈락토올리고당(SOS)의 생산조건 및 그 특성을 연구 검토하였다. SOS는 SAG 1%(w/v), pH 8.0, 5$0^{\circ}C$인 조거에서 $\beta$-1, 4-galactanase를 20unit/g SAG를 첨가하여 24-40시간 반응하여 생산하였다. 생산된 SOS 용액(75%)은 11,000cp의 점도를 나타내어 같은 농도의 설탕용액 140cp의 값에 비해 80배 큰 값을 나타내었다. 점도의 온도의존성은 5$0^{\circ}C$ 이하에서는 온도의존 함수(B) 값이 11,037 cp.K로 설탕용액의 2,760보다 약 4.6배 크지만 5$0^{\circ}C$ 이상에서는 3,400으로 큰 차이를 보이지 않았다. 또한 올리고당의 농도가 50 Brix 이하에서는 설탕용액의 점도 20-30 cp와 유사한 20-40cp로 차이를 보이지 않지만 농도가 증가함에 따라 차이가 커져 Brix 70에서는 1,280cp로 설탕용액의 90cp보다 15배 높은 값을 나타내었다. 생산된 SOS는 pH 및 온도에 대해 매우 안정하여 pH 3,14$0^{\circ}C$인 조건하에서도 분해로 인하여 생산되는 galactose가 없었다.
L- arabinose residues are widely distributed in plant cell walls, where they are present in polymers such as arabinans, arabinoxylans, arabinogalactans and arabinogalactan proteins. L-arabinose suppress intestinal sucrase and decrease the adsorption of sugar in the small intestine, consequently, weight loss and fatness prevent. Now, xylose be used replacement sugar and arabinose be utilized fatness prevent of our time. Various Agricultural surplus like com fiber, contain $20\;{\sim}\;40%$ of hemicellulose. Corn fiber from Agricultural Renewable Biomass was chosen the best suitable material for arabinose production. In this work, we searched about for L-arabinose gene in compost, metagenome pool and indonesian soil. So, the B1029 TS2-8 of L-arabinase gene in compost was selected by YNB media(5% yeast nitrogen base, 5% arabinogalactan). After enzyme reaction with corn fiver, B1029 TS2-8 produced 2.15 g/L of L-arabonose.
Alkalophilic Bacillus sp. HJ-12 producing $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase was isolated from soil in the alkalic condition, pH 10.0. $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase was maximaly produced in the medium consisting of 2% soybean arabinogalactan (SAG), 0.5% yeast extract, 0.5% polypeptone, 0.5% NaCl, 0.1% K$_{2}$HPO$_{4}$, 0.02% MgSO$_{4}$$\cdot $7H$_{2}$O, 0.1% Na$_{2}$CO$_{3}$ under the aerobic condition (pH 8.2). $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase is inducible enzyme so that its activity has been increased 10 fold in the SAG medium than in the glucose medium. Through the ammonium sulfate precipitation, DEAE- Sephadex A-50 ion chromatography, and Sephadex G-75 gel chromatography procedures, this enzyme was purified with a single protein of 11% vield and 110 fold's purity. $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase is endo type enzyme producing ollgosaccharide from SAG.
Red pine and Japanese larch (Larix leptolepis Gordon) grown in Korea have been the main species of coniferous resources in Korea. Especially, planting area of Japanese larch has been increased continueously in the recent years due to its superior plant type and rapid growth rate and its stocks reached approximately 4.32 million cubic meters at the present time. Although many research works have been done for the utilization of the larch wood in various ways, still many problems are existed in its chemical applications due to a large proportion of soluble extractives. In this study, chemical composition of larch extractives and chemical structure of its major component were analyzed. In order to identify the basic structure of major component, gas-liquid chromatography for separation of some completely methylated alditols as their acetates on a 3% - ECNSS-M on Gas Chrom Q. column was used. Proportion of extractives of Japanese larch wood was higher than that of other conifers and major component of the soluble extractives was arabinogalactan, a schematic structural formula which was presented in Figure 2. The molar ratio of arabinose and galactose was 1:4.5. The main chain of arabinogalactan was composed of 1,3 linked ${\beta}$-D-galactopyranose residues, each of which carried a side chain, attached to the C-6 positions. The exact nature of all of the side chains is not known, but the majority of these side chain was composed of 1, 6 linked ${\beta}$-D-galactopyranose residues, with 2~3 such units present per average chain. Some of the galactose units in the main chain had a residue of 3 - 0 - ${\beta}$-L-arabinopyranosyl-L-arabinofuranose. In addition, a few terminal residues of D-glucuronic acid also was confirmed, attached to C-6 position of the D-galactopyranose residue. It could concluded that the main structure of highly branched arabinogalactan from Japanese larch extractive was essentially the same as those of the other larch species.
마치현을 압출성형 및 효소분해 처리할 경우 원료에 비하여 수용성 고분자 다당류 및 아라비노갈락탄 함량이 증가하였다. 마치현 수용성 다당류 중 아라비노스와 갈락토오스의 함량이 원료 마치현보다 1.5배 증가하였으며, 람노스 함량도 2.6배 증가한 유의적인 결과를 보였다. 압출성형 처리효과로 고분자 분획(I)은 Ext I, Ext II 및 Ext III 시료에서 각각 37, 29 및 26% 정도 저분자 분획(II)으로 분자 재배열이 발생함과 동시에 66,000-74,000 Da범위의 분자량을 갖는 다당체로 구조변형 되었다. 특히, 저분자 분획의 분자량과 조성비에 있어서 압출성형 처리한 마치현은 처리하지 않은 원료에 비하여 9-13% 정도 증가하여 유의성이 있었다. 이같은 다당류의 붕괴 및 변형 정도는 압출성형 처리시 투입된 기계적 소모 에너지와 비례적인 상관성을 보였다. 압출성형 처리를 한 수용성 다당류의 경우 압출성형 처리온도 120$^{\circ}C$ 및 140$^{\circ}C$인 경우 자유 라디칼소거활성능이 압출성형 처리하지 않은 원료에 비하여 높게 증가하였다. 상기와 같은 마치현 유래 아라비노갈락탄의 항산화 활성 기능의 결과에 비추어볼 때 보다 폭 넓은 범위의 분자량을 갖는 분획물 제조 및 생리활성 평가실험을 지속적으로 추진한다면 새로운 기능성 식품소재로 활용할 가치가 있다고 기대된다.
$\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase isolated from alkalophilic Bacillus sp. HJ-12, approximate Mw 42 kDa, was generally stable in the range of pH 6-10 and below 50$\circ$C and its highest activity was observed at 60$\circ$C with pH 7-9. The isolated $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase specifically hydrolyzed $\beta $-1, 4-galactosyl linkage that is the major structure of soybean arabinogalactan (SAG) but not $\beta $-1, 3-galactosyl linkage of the other polysaccharides. K. was estimated as 0.67 mg/ml by the method of Hanes-Woolf plot. No metals and chemical reagents inhibited the enzyme activity but urea did. The active site of this enzyme assumed to be tryptophan residue. The hydrolysis products from SAG, assayed by gel chromatography, TLC and HPLC, were predominantly galactotetraose (Gal$_{4}$) and triose (Gal$_{3}$) with a small portion. $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase hydrolyzed ONPG as well as SAG, and the degree of hydrolysis of SAG was 15% which is lower than that by the other $\beta $-1, 4-galactanases from different sources. SAG treated with this enzyme resulted in the reduction of specific viscosity up to 70%.
천년초에 존재하는 점질다당의 새로운 이용방안을 모색하기 위해 천년초로부터 다당을 분리하여 항전이 활성을 평가하고 구조 분석을 행하였다. B16BL6 종양세포를 이용한 폐암 전이모델에서 천년초 조다당 CNC-0는 농도 의존적으로 높은 항전이 활성을 나타냈다. 천년초 조다당 CNC-0는 DEAE-Sepharose FF 및 Sephadex G-75를 이용한 연속적 chromatography를 행하여 CNC-Ia으로 정제하고 이들의 구조적 특성을 검토하였다. CNC-Ia는 분자량 약 700 kDa의 다당체로 구성당 조성을 확인한 결과, arabinose, galactose 및 xylose를 높은 비율로 함유하고 있었으며 rhamnose와 fucose를 미량 함유하고 있었다. 본 당쇄의 결합양식을 규명하기 위해 methylation analysis를 행한 결과 CNC-Ia은 terminal Araf, 5-linked Araf, 4-linked Galp, terminal Xylp와를 포함한 총 18종의 결합으로 구성되어 있었으며 full branched Araf, 3,4,6-branched Galp 및 full branched Galp 와 같은 3종의 CNC-Ia 고유의 특징적 결합을 포함하고 있었다. 또한 CNC-Ia의 미세구조를 규명하기 위해 exo-${\alpha}$-Larabinofuranosidase와 endo-${\beta}$-1,4-D-galactanase를 이용한 연속 가수분해 및 해석도 행하였다. 이상의 결과로부터 천년초 유래 다당 CNC-Ia는 ${\beta}$-($1{\rightarrow}4$)-galactan 주쇄에 arabinose oligo당이 측쇄로 분지된 Type I arabinogalactan으로 판단되었으며 주쇄 및 측쇄 모두 고도로 분지된 특징이 있음을 알 수 있었다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Vascular dementia (VaD) caused by reduced blood supply to the brain manifests as white matter lesions accompanying demyelination and glial activation. We previously showed that arabinoxylan consisting of arabinose and xylose, and arabinose itself attenuated white matter injury in a rat model of VaD. Here, we investigated whether larch arabinogalactan (LAG) consisting of arabinose and galactose could also reduce white matter injury. MATERIALS/METHODS: We used a rat model of bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO), in which the bilateral common carotid arteries were exposed and ligated permanently with silk sutures. The rats were fed a modified AIN-93G diet supplemented with LAG (100 mg/kg/day) for 5 days before and 4 weeks after being subjected to BCCAO. Four weeks after BCCAO, the pupillary light reflex (PLR) was measured to assess functional consequences of injury in the corpus callosum (cc). Additionally, Luxol fast blue staining and immunohistochemical staining were conducted to assess white matter injury, and astrocytic and microglial activation, respectively. RESULTS: We showed that white matter injury in the the cc and optic tract (opt) was attenuated in rats fed diet supplemented with LAG. Functional consequences of injury reduction in the opt manifested as improved PLR. Overall, these findings indicate that LAG intake protects against white matter injury through inhibition of glial activation. CONCLUSIONS: The results of this study support our hypothesis that cell wall polysaccharides consisting of arabinose are effective at protecting white matter injury, regardless of their origin. Moreover, LAG has the potential for development as a functional food to prevent vascular dementia.
Physiochemical properties, such as yield and molecular weight distribution of polysaccharide fractions, of polysaccharides in the enzymatic hydrolysates of purslane were investigated and characterized. A higher amount of micro nutrients, such as potassium (9,413 mg/100 g), phosphorus acid (539 mg/100 g), leucine, alanine, lysine, valine, glycine, and isoleucine, was present in whole purslane. The yield of water soluble polysaccharides (WSP) was 0.29, 7.01, and 7.94% when extracted using room temperature water (RTW), hot-water (HW), and hot temperature/high pressure-water (HTPW), respectively, indicating that HW or HTPW extraction may be effective to obtain WSP from purslane. The average ratio of L-arabinose:D-galactose in the WSP was 37:49, 34:37, and 27:29, when extracted using RTW, HW, and HTPW, respectively. These results indicate that water was a suitable extraction solvent for preparation of the arabinogalactan component of whole purslane. A higher yield and total carbohydrate content was obtained by using Viscozyme L instead of Pectinex 5XL during extraction of the WSP, which indicates that enzymatic treatment of purslane may be an effective method to control the Mw of polysaccharides. Finally, it was confirmed that Viscozyme L is a suitable enzyme for the hydrolysis and separation of polysaccharides obtained from purslane.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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