The objective of this study was to evaluate the efficiency of sperm cryosurvival in boar sperm separated by Percoll containing antioxidant enzymes. The boar semen was collected into a pre-warmed ($37^{\circ}C$) thermos bottle by gloved-hand method and was separated by 65% Percoll with superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione (GSH) before freezing. The frozen sperm was thawed at $38.5^{\circ}C$ for 45 sec in water-bath for sperm characteristic analysis. The sperm were estimated with SYBR14/PI double staining for viability, FITC-PNA/PI double staining for acrosome reaction, Rhodamine123/PI double staining for mitochondrial integrity and were analyzed using flow cytometry. In results, sperm viability, acrosome reaction and mitochondrial integrity were improved in separated sperm groups compared with unseparated sperm by Percoll (UP) group. Especially, viability was significantly higher in sperm separated by Percoll containing 400 IU CAT group compared with other groups (P<0.05). And acrosome reaction was decreased in sperm separated by Percoll with 300 IU SOD, 400 IU CAT and 0.5 mM GSH groups compared with other groups, however, there were no significantly difference mitochondrial integrity among sperm separated by Percoll with antioxidant enzymes. In conclusion, we suggest that use of Percoll containing antioxidant enzymes for sperm separation will be beneficial for sperm cryopreservation in pigs.
Kim, Gi-Yeon;Lee, Jeong-Eun;An, Yeong-Ok;Gwon, Seok-Yun;Lee, Haeng-Sun;Gwak, Sang-Su
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.04a
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pp.65-68
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2000
To understand the antioxidative mechanism in plant cell cultures, we investigated the levels of antioxidant enzymes and low molecular antioxidants in 100 cell lines derived from different plant species. SOD and POD activities in plant cell lines were significantly higher than intact plants. The cell lines from sweet potato (Ipomoea batatas) and cassava (Manihot esculeanta) showed the highest POD and SOD activities, respectively, suggesting that the cell cultures of sweet potato and cassava are good biomaterials for the mass production and molecular study of antioxidant enzymes. The average ascorbate content in plant cell lines was several hundred times lower than intact plants, whereas the glutathione content was 2-3 times higher than plants. Interestingly, the ratio of reduced and oxidized ascorbate and glutathione was different from plant species. In conclusion, the results strongly suggest that plant cell cultures are good biomaterials for the study of antioxidative mechanism and the production of useful components including antioxidants.
The effect of salicylic acid(SA) on antioxidant system and protective mechanisms against UV-B induced oxidative stress was investigated in cucumber(Cucumis sativus L.) leaves. UV-B radiation and SA were applied separately or in combination to first leaves of cucumber seedlings, and dry matter accumulation, lipid peroxidation and activities of antioxidant enzymes were measured in both dose and time-dependant manner. UV-B exposure showed reduced levels of fresh weight and dry matter production, whereas SA treatment significantly increased them. SA noticeably recovered the UV-B induced inhibition of biomass production. UV-B stress also affected lipid peroxidation and antioxidant enzyme defense system. Malondialdehyde(MDA), a product of lipid peroxidation, was greatly increased under UV-B stress, showing a significant enhancement of a secondary metabolites, which may have antioxidative properties in cucumber leaves exposed to UV-B radiation. Combined application of UV-B and SA caused a moderate increase in lipid peroxidation. These results suggest that SA may mediate protection against oxidative stress. UV-B exposure significantly increased SOD, APX, and GR activity compared with untreated control plants. Those plants treated with 1.0 mM SA showed a similar pattern of changes in activities of antioxidant enzymes. SA-mediated induction of antioxidant enzyme activity may involve a protective accumulation of $H_2O_2$ against UV-B stress. Moreover, their activities were stimulated with a greater increase by UV-B+SA treatment. The UV-B+SA plants always presented higher values than UV-B and SA plants, considering the adverse effects of UV-B on the antioxidant cell system. ABA and JA, second messengers in signaling in response to stresses, showed similar mode of action in UV-B stress, supporting that they may be important in acquired stress tolerance. Based on these results, it can be suggested that SA may participates in the induction of protective mechanisms involved in tolerance to UV-B induced oxidative stress.
To investigate the effects of ultraviolet(UV-B) on growth and biochemical defense responses of plant, garden balsam (Impatiens balsamina L.) was subjected to enhanced UV-B irradiation [daily dose: 0.02 (No UV-B) and 11.34 (enhanced UV-B) kJ $m^{-2}$ ; $UV-B_{BE}$] for 3 weeks. Enhanced UV-B drastically inhibited leaf area as well as dry weight of garden balsam. The content of malondialdehyde was significantly increased by about 50% after 3 weeks of UV-B irradiation. The ratios of dehydroascorbate/ascorbate and oxidized glutathione/reduced glutathione were also considerably increased by UV-B irradiation. Three major polyamines of garden balsam leaves: putrescine, spermidine and spermine were observed. All polyamine contents were increased with UV-B irradiation. The enzyme (superoxide dismutase, ascorbate peroxidase etc.) activities of garden balsam were increased by the UV-B enhancement. Based on the results, enhanced UV-B caused oxidative stress in garden balsam and biochemical protection responses might be activated to prevent from damaging effects of oxidative stress generated by UV-B irradiation.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.5
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pp.834-839
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2002
To evaluate the antioxidative and antiaging effects of buchu in vivo system, 2% or 5% buchu diets were fed to ICR mice for 13 months and lipid peroxidation, protein oxidation, activities of antioxidative enzymes and total glutathione content on liver were measured. Hepatic TBARS contents did not show differences among diet groups, while buchu diet suppressed the protein oxidation significantly. SOD activities of control diet group decreased slowly after 7 month but buchu diet increased its activities steeply for first 3 month and continued to increase twice or three times higher than control diet during 13 month. While GSH-Px activities of control diet group were increased slightly with age, buchu diet increased its activities twice or three times higher than control. While catalase activities of control diet group were almost not changed with age, buchu diet increased its activities in both 2% and 5% diet groups. Total hepatic glutathione contents were gradually increased with age, while buchu diets In-creased its contents remarkably. According to this study, many antioxidative materials and sulfides compounds containing buchu seems to protect antioxidative systems on ICR mice.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.6
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pp.973-980
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2004
To evaluate the antioxidative effect of rice coated with maengjong-juk extract in vivo system, rice coated with maengjong-juk extract diets were fed to NZW rabbit for 16 weeks and lipid peroxidation, protein oxidation, activities of antioxidative enzymes and total glutathione content in tissues were measured. TBARS contents in liver and spleen were significantly decreased in maengjong-juk extract diet group compared to control group, while those in kidney and heart tissue were not significantly different. Maengjong-juk extract diet suppressed the protein oxidation significantly in liver, spleen, kidney and heart tissues. Hepatic total SOD, Cu$.$Zn-SOD and Mn-SOD activities of maengjong-juk extract diets were significantly higher than those of control diet. GSH-Px and catalase activities of maengjong-juk extract diet were higher than those of control, while GR activities show no significant difference between the two groups. Total hepatic glutathione content was significantly increased by maengjong-juk extract diet. According to this study, many antioxidative materials and phytochemicals in maengjong-juk extracts seems to protect tissues from oxidative stress by stimulating antioxidative systems in atherosclerotic rabbit fed high cholesterol diet.
Silymarin, which is derived from dried Silybum marianum (milk thistle) seeds and fruits, possesses various beneficial properties, such as hepatoprotective, antioxidative, anti-inflammatory, and anticancer activity. This research aimed to explore the antioxidative activity of silymarin against oxidative stress and understand its molecular mechanism in RAW 264.7 cells. The study employed cell viability and reactive oxygen species (ROS) formation assays and western blot analysis. The results demonstrated that silymarin effectively reduced intracellular ROS levels induced by lipopolysaccharide (LPS) in a dose-dependent manner without causing any cytotoxic effects. Moreover, silymarin treatment significantly upregulated the expression of heme oxygenase (HO)-1, a phase II enzyme known for its potent antioxidative activity. Additionally, silymarin treatment significantly induced the expression of nuclear factor-erythroid 2 p45-related factor (Nrf) 2, a transcription factor responsible for regulating antioxidative enzymes, which was consistent with the upregulated HO-1 expression. To investigate the involvement of key signaling pathways in maintaining cellular redox homeostasis against oxidative stress, the phosphorylation status of mitogen-activated protein kinase (MAPK) and phosphoinositide 3-kinase (PI3K) was estimated by western blot analysis. The results showed that silymarin potently induced HO-1 expression, which was mediated by the phosphorylation of p38 MAPK. To further validate the antioxidative potential of silymarin-induced HO-1 expression, tert-butyl hydroperoxide (t-BHP)-induced oxidative damage was employed and attenuated by silymarin treatment, as identified by a selective inhibitor for each signaling molecule. In conclusion, silymarin robustly enhanced antioxidative activity by inducing HO-1 via the Nrf2/p38 MAPK signaling pathway in RAW 264.7 cells.
N-nitrosoethylurea (NEU) -induced changes of lipid peroxide content, aldehyde metabolic enzyme activities and antioxidant enzyme activities were examined in cultured rat liver cell. Aldehyde metabolic enzymes tested in this investigation were alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase. Several antioxidant enzymes tested were glutathione transferase, superoxide dismutase, glutathione reductase and catalase. When the cell was exposed with various concentrations of NEU, lipid peroxide content increased about 2.5 fold with 6.25 mM NEU. Maximun 2.3 times higher alcohol dehydrogenase activity was found after NEU treatment. About 2 times higher aldehyde dehydrogenase activity could also be observed. Only slight increases of glutathione transferase and catalase activities occurred with NEU treatment. In addition mnximun 1.5 times higher superoxide dismutase activities and 3 times higher glutathione reductase activities were found after NEU treatment. Therefore, it is likely that the increases of superoxide dismutase and glutathione reductase could contribute in a antioxidative process against NEU toxicity.
This study was performed to examine the feeding effects of $Angelica$$keiskei$$Koidz$ (AK) and its processed products on serum, liver, and body fat content and the expression of antioxidant genes in rats fed a high fat diet. AK and its processed products were added at 3-5% to a high fat diet and fed to adult rats for 6 weeks. In experiment 1 (EXP 1), the rats were fed with one of six diets including a control diet (normal fat), high fat diet (HF), and HF + AK additives groups (four groups). In experiment 2 (EXP 2), the rats were separated into three groups of HF, HF + AK whole leaves, and HF + fermented juice (FS) + squeeze (SA). Body weight was not different among the groups in either experiment. The liver weight was lower in the FS and SA groups compared to that in the other groups (P<0.05). Serum luteolin was higher in the AK and processed products groups compared to that in the HF group (P<0.05). Gene expression of the antioxidative enzymes catalase and glutathione-s-reductase in the liver was higher in the AK processed products group than that in the other groups (P<0.05). The results suggest that the intake of AK and its processed products increased the expression of antioxidant enzymes in animals fed a high fat diet, reduced hepatic cholesterol content, and increased the effective absorption of luteolin.
Jeewanthi, Renda Kankanamge Chaturika;Kim, Myeong Hee;Lee, Na-Kyoung;Yoon, Yoh Chang;Paik, Hyun-Dong
Food Science of Animal Resources
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v.37
no.1
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pp.62-70
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2017
The aim of this study was identifying a suitable food grade enzymes to hydrolyze whey protein concentrates (WPCs), to give the highest bioactivity. WPCs from ultrafiltration retentate were adjusted to 35% protein (WPC-35) and hydrolyzed by enzymes, alcalase, ${\alpha}-chymotrypsin$, pepsin, protease M, protease S, and trypsin at different hydrolysis times (0, 0.5, 1, 2, 3, 4, and 5 h). These 36 types of hydrolysates were analyzed for their prominent peptides ${\beta}-lactoglobulin$ (${\beta}-Lg$) and ${\alpha}-lactalbumin$ (${\alpha}-La$), to identify the proteolytic activity of each enzyme. Protease S showed the highest proteolytic activity and angiotensin converting enzyme inhibitory activity of IC50, 0.099 mg/mL (91.55%) while trypsin showed the weakest effect. Antihypertensive and antioxidative peptides associated with ${\beta}-Lg$ hydrolysates were identified in WPC-35 hydrolysates (WPH-35) that hydrolyzed by the enzymes, trypsin and protease S. WPH-35 treated with protease S in 0.5 h, responded positively to usage as a bioactive component in different applications of pharmaceutical or related industries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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