To develop multifunctional microbial inoculant, an insluble phosphate-solubilizing bacterium with antifungal activity was isolated from plant rhizospheric soil. On the basis of its morphological, cultural and physiological characteristics and Biolog analysis, this bacterium was identified as Pseudomonas fluorescens RAF15. P. fluorescens RAF15 showed antifungal activities against phytopathogenic fungi Botrytis cinerea and Rhizoctonia solani. The optimal medium composition and cultural conditions for the solubilization of insoluble phosphate by P. fluorescens RAF15 were 1.5% of glucose, 0.005% of urea, 0.3% $MgCl_2{\cdot}6H_2\;0.01%\;of\;MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.01%,\;of\;CaCl_2{\cdot}2H_2O$, and 0.05% of NaCl along with initial pH 7.0 at $30^{\circ}C$. The soluble phosphate production under optimum condition was 863 mg/L after 5 days of cultivation. The solubilization of insoluble phosphates was associated with a drop in the pH of the culture medium. P. fluorescens RAF15 showed resistance against different environmental stresses like $10-35^{\circ}C$ temperature, 1-4% salt concentration and pH 2-11 range. The strain produced soluble phosphate to the culture broth with the concentrations of 971-1121 mg/L against $CaHPO_4$, 791-908 mg/L against $Ca_3(PO_4){_2}$, and 844 mg/L against hydroxyapatite, respectively. However, the strain produced soluble phosphate to the culture broth with the concentrations of 15 mg/L against $FePO_4$, and 5 mg/L against $AlPO_4$, respectively.
Endophytic fungi are microorganisms inhabiting living plant tissues without causing apparent harm to the host. They are drawing increasing attention due to their ability to produce various bioactive compounds as well as their effects on host growth and resistance to biotic and abiotic stresses. As a first step to assess biodiversity of plant associated fungi in Korea and the following evaluation on diverse biological activities, we are collecting endophytic fungi from plant in wild followed by systematic long-term storage in liquid nitrogen. Molecular identification using ITS sequences was also incorporated for pure culture by hyphal tip isolation. As of April 2015, about 1,400 fungal strains had been isolated from about 170 plant taxa. Fungal isolates belonging to Pleosporales, Diaporthales, Glomerellales, Hypocreales, and Xylariales were the most abundant. These collections are being used for several complementary researches, including screening of isolates with novel bioactive compounds or conferring drought stress resistance, phylogenetic and genomic study. Genome sequencing was performed for 3 isolates, one Xylaria sp. strain JS573 producing griseofulvin, an antifungal compound, and two Fusarium spp. strains JS626 and JS1030, which are assumed to be new species found in Korea. More detailed analysis on these genomes will be presented. These collections and genome informations will serve as invaluable resources for identifying novel bioactive materials in addition to expand our knowledge on fungal biodiversity.
Biocontrol microbes have mainly been screened among large collections of microorganisms $via.$ nutrient-rich $in$$vitro$ assays to identify novel and effective isolates. However, thus far, isolates from only a few genera, mainly spore-forming bacilli, have been commercially developed. In order to isolate field-effective biocontrol microbes, we screened for more than 200 oligotrophic bacterial strains, isolated from rhizospheres of various soil samples in Korea, which induced systemic resistance against the soft-rot disease caused by $Pectobacterium$$carotovorum$ SCC1; we subsequently conducted in $planta$ bioassay screening. Two oligotrophic bacterial strains were selected for induced systemic disease resistance against the $Tobacco$$Mosaic$$Virus$ and the gray mold disease caused by $Botrytis$$cinerea$. The oligotrophic bacterial strains were identified as $Pseudomonas$$manteilii$ B001 and $Bacillus$$cereus$ C003 by biochemical analysis and the phylogenetic analysis of the 16S rRNA sequence. These bacterial strains did not exhibit any antifungal activities against plant pathogenic fungi but evidenced several other beneficial biocontrol traits, including phosphate solubilization and gelatin utilization. Collectively, our results indicate that the isolated oligotrophic bacterial strains possessing induced systemic disease resistance could provide useful tools as effective biopesticides and might be successfully used as cost-effective and preventive biocontrol agents in the field.
Hexanal, a C-6 aldehyde has been implicated to have antimicrobial properties. Hence, this study was conducted to determine the antifungal activities of hexanal vapor against major postharvest pathogens of banana viz., Colletotrichum gloeosporioides and Lasiodiplodia theobromae. The pathogens were cultured in vitro and exposed to hexanal vapor at 600, 800, 1,000 and 1,200 ppm. Mycelial growth of both fungal pathogens were inhibited completely at 800 ppm and the incidence of anthracnose and stem-end rot diseases reduced by 75.2% and 80.2%, respectively. The activities of peroxidase, polyphenol oxidase, phenylalanine ammonia-lyase and glucanase had transiently increased in hexanal vapor treated banana by 5 to 7 days and declined thereafter. Postharvest treatment of banana with hexanal vapor resulted in phospholipase D inhibition and also resulted in cell wall thickening of the treated fruit, which impeded the penetration of the pathogenic spores. This was further confirmed by scanning electron micrographs. The defense-related protein intermediaries had increased in hexanal vapor treated banana fruit, which suggests induced resistance against C. gloeosporioides and L. theobromae, via., the phenylpropanoid pathway which plays a significant role in hindering the pathogen quiescence. Delayed ripening due to inhibition of phospholipase D enzyme, inhibition of mycelial growth and induced systemic resistance by defense enzymes collectively contributed to the postharvest disease reduction and extended shelf life of fruit.
Kim, Na Young;Lee, Nam-Sil;Jeon, Eun Ji;Seo, Jung Soo;Woo, Soo Ji;Kim, Myung Sug;Kang, So Young;Jung, Sung Hee
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.54
no.5
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pp.634-643
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2021
Han In-jin (Artemisia iwayomogi Kitamura) and Cham Dang-gwi (Angelica gigas Nakai) exhibit antibacterial, antiparasitic, antifungal, and antiviral properties in vitro. In this study, mixture of the extracts of these two medicinal plants was absorbed on pellets. Thereafter, these pellets were fed to olive flounder Paralichthys olivaceus for 12 weeks at laboratory (1st experiment) and 24 weeks at field test (2nd experiment), and the immune activity and disease resistance properties of the extracts were examined. It was observed that lysozyme activities of plasma, spleen, and kidney improved after 12 weeks. Furthermore, when the olive flounders were artificially infected with bacterial pathogens, their cumulative mortality decreased in the group that was fed the extracts for 12 weeks compared to that in control group, and the relative percent survival also improved. This study concluded that mixture of Han In-jin and Cham Dang-gwi extracts provides disease resistance in vivo.
Oh, Hyun Hee;Huh, Chang Ki;Choi, Ha Nuel;Yang, Hee Sun;Bae, In Hyu;Lee, Jai Sung;Jeong, Yong Seob;Lee, Nam Keun;Jung, Hoo Kil
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.31
no.2
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pp.133-141
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2013
This study was performed to identify the cheese starter potential of antifungal lactic acid bacteria isolated from Kimchi. Eight fungi were isolated from cheese or the cheese ripening room, and identified as Penicillium and Cladosporium by ITS-5.8S rDNA analysis. Twenty-two lactic acid bacteria species with antifungal activity were isolated from Kimchi, and identified as Lactobacillus and Pediococcus by 16S rRNA sequence analysis. Six lactic acid bacteria species were selected (L. sakei subsp. ALJ011, L. sakei subsp. ALI033, L. sakei subsp. ALGy039, P. pentosaceus ALJ015, P. pentosaceus ALJ024, and P. pentosaceus ALJ026) based on higher antifungal activity from the initial 22 species. Out of the six identified species, L. sakei subsp. ALI033 had the highest antifungal activity. For growth of the six lactic acid bacteria, optimal temperature and pH were $30{\sim}37^{\circ}C$ and 7.0, respectively. Proteolytic activities of the six lactic acid bacteria were almost as strong as the commercial strain Str. thermophilus Body-1. Coagulative activities of L. sakei subsp. ALI033, P. pentosaceus ALJ015, and P. pentosaceus ALJ024 were higher than those of L. sakei subsp. ALJ011, L. sakei subsp. ALGy039, and P. pentosaceus ALJ026. The acid resistance of L. sakei subsp. was higher than that of P. pentosaceus. The major organic acid component of the lactic acid bacteria culture medium was lactic acid.
Stravoravdis, Stefanos;LeBlanc, Nicholas R.;Marra, Robert E.;Crouch, Jo Anne;Hulvey, Jonathan P.
Mycobiology
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v.48
no.1
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pp.44-50
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2020
Calonectria pseudonaviculata and C. henricotiae are two closely related fungal species responsible for boxwood blight disease of ornamental shrubs (Buxus spp.) in the U.S. and Europe. A previous study has shown isolates of the latter species, which is restricted to Europe, to be less sensitive to tetraconazole, an azole fungicide. In this study, we have analyzed the CYP51 paralogs for polymorphism in 26 genomes, representing geographically disparate populations of C. pseudonaviculata (n = 19) and C. henricotiae (n = 7), from the U.S., Europe, Asia, and New Zealand. The presence of a CYP51A pseudogene and lack of a functional CYP51A paralog in all C. pseudonaviculata genomes examined is a novel discovery for fungi and could have implications for the evolution of resistance to antifungal chemicals.
For centuries, plants have been used for a wide variety of purposes, from treating infectious diseases to food preservation and perfume production. Presently, the increasing resistance of microorganisms to currently used antimicrobials in combination with the appearance of emerging diseases requires the urgent development of new, more effective drugs. Plants, due to the large biological and structural diversity of their components, constitute a unique and renewable source for the discovery of new antibacterial, antifungal, and antiparasitic compounds. In the present paper, the history, composition, and antimicrobial activities of the basil, oregano, and thyme essential oils are reviewed.
Abstract Plant lipid transfer proteins (LTPs) are a class of proteins whose functions are still unknown. Some are proposed to have antimicrobial activities. To understand whether LTP110, a rice LTP that we previously identified from rice leaves, plays a role in the protection function against some serious rice pathogens, we investigated the antifungal and antibacterial properties of LTP110. A cDNA sequence, encoding the mature peptide of LTP110, was cloned into the Impact-CN prokaryotic expression system. The purified protein was used for an in vitro inhibition test against rice pathogens, Pyricularia oryzae and Xanthomonas oryzae. The results showed that LTP110 inhibited the germination of Pyricularia oryzae spores, and its inhibitory activity decreased in the presence of a divalent cation. This suggests that the antifungal activity is affected by ions in the media; LTP110 only slightly inhibited the growth of Xanthomonas oryzae. However, the addition of LTP110 to cultured Chinese hamster ovarian cells did not retard growth, suggesting that the toxicity of LTP110 is only restricted to some cell types. Its antimicrobial activity is potentially due to interactions between LTP and microbe-specific structures.
Abdo Elgabbar, Mohammed A.;Jun, Sang-Cheol;Kim, Jong-Hwa;Jahng, Kwang-Yeop;Han, Dong Min;Han, Kap-Hoon
한국균학회소식:학술대회논문집
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2015.11a
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pp.28-28
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2015
Asexual reproduction or conidiation in aspergilli is a primary mean to produce their progenies that is environmentally and genetically controlled tightly. Previously, intensive researches in the model fungus Aspergillus nidulans disclosed some genes playing important roles in asexual and sexual development. Among them, one gene encoding a putative helix-loop-helix (HLH) transcription factor, named ndrA, has been isolated and characterized as a downstream regulator of developmental master regulator NsdD. By using comparative genome search of A. niduans NdrA protein, its orthologues have been identified in A. fumigatus and A. flavus, respectively (AfudrnA and AfldrnA). Deletion of the ndrA genes in both Aspergillus species made them unable to produce the conidia yet abundant production of sclerotia in A. flavus. Complementation of ndrA deletion strains by intact ndrA ORFs has restored the conidiation as in the control strains. In A. fumigatus, ndrA deletion also resulted in loss of conidiation phenotype. Northern analyses showed that the ndrA genes in both Aspergillus species are highly expressed at the early stage of the conidiation. Interestingly, the ndrA genes were found to be necessary for the proper expression of brlA genes. Antifungal sensitivity test revealed that the ndrA genes might be responsible for the sensitivity or resistance to some antifungal agents. However, ndrA deletion did not greatly influence the growth in both strains. And the A. flavus ndrA gene did not affect the aflatoxin production. Taken together, ndrA genes in Aspergillus species could be an important positive regulator of conidiation under the regulation of the nsdD gene yet upstream of the brlA gene.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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