Isolation and Characterization of Insoluble Phosphate-Solubilizing Bacteria with Antifungal Activity

To develop multifunctional microbial inoculant, an insluble phosphate-solubilizing bacterium with antifungal activity was isolated from plant rhizospheric soil. On the basis of its morphological, cultural and physiological characteristics and Biolog analysis, this bacterium was identified as Pseudomonas fluorescens RAF15. P. fluorescens RAF15 showed antifungal activities against phytopathogenic fungi Botrytis cinerea and Rhizoctonia solani. The optimal medium composition and cultural conditions for the solubilization of insoluble phosphate by P. fluorescens RAF15 were 1.5% of glucose, 0.005% of urea, 0.3% $MgCl_2{\cdot}6H_2\;0.01%\;of\;MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.01%,\;of\;CaCl_2{\cdot}2H_2O$, and 0.05% of NaCl along with initial pH 7.0 at $30^{\circ}C$. The soluble phosphate production under optimum condition was 863 mg/L after 5 days of cultivation. The solubilization of insoluble phosphates was associated with a drop in the pH of the culture medium. P. fluorescens RAF15 showed resistance against different environmental stresses like $10-35^{\circ}C$ temperature, 1-4% salt concentration and pH 2-11 range. The strain produced soluble phosphate to the culture broth with the concentrations of 971-1121 mg/L against $CaHPO_4$, 791-908 mg/L against $Ca_3(PO_4){_2}$, and 844 mg/L against hydroxyapatite, respectively. However, the strain produced soluble phosphate to the culture broth with the concentrations of 15 mg/L against $FePO_4$, and 5 mg/L against $AlPO_4$, respectively.

항진균능을 가진 불용성 인산 가용화 세균의 분리 및 특성

다기능성 농업용 미생물 제제를 개발하기 위하여 항진균능을 가진 불용성 인산 가용화 세균을 식물의 근권 토양으로부터 분리하였다. 분리균주의 분류학적 위치를 검토한 결과, Pseudomonas fluorescens RAF15로 동정되었다. P. fluorescens RAF15는 농작물의 잿빛곰팡이병균 Botrytis cinerea와 줄기썩음병균 Rhizoctonia solani의 생육을 억제할 수 있었다. 불용성 인산인 $Ca_3(PO_4){_2}$로부터 가용성 인산을 생성하기 위한 최적 배지 및 배양조건은 glucose 1.5%, urea 0.005%, $MgCl_2{\cdot}6H_2\;0.3%,\;MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.01%,\;CaCl_2{\cdot}2H_2O$ 0.01%, NaCl 0.05%, 배양온도 $30^{\circ}C$ 및 초기 pH 7.0이었으며, 최적조건에서 배양 5일 후 863 mg/L의 가용성 인산이 생성되었다. 불용성 인산 가용화는 유기산 생성에 의한 배양액의 pH 감소와 밀접한 관계가 있었다. P. fluorescens RAF15는 $10-35^{\circ}C$, 1-4% 염 농도 및 pH 2.0-11.0의 범위에서도 가용성 인산을 생성할 수 있었다. 본 균주는 $CaHPO_4,\;Ca_3(PO_4){_2}$ 및 hydroxyapatite에서 각각 971-1121 mg/L, 791-908 mg/L 및 844 mg/L의 가용성 인산을 생성하였다. 그러나 $FePO_2$ 및 $AlPO_4$의 경우, 생성된 가용성 인산의 농도는 각각 18 mg/L, 5 mg/L이었다.