본 연구에서는 감(Diospyros kaki)의 1,3-butylene glycol 추출물(DBG)과 에탄올 추출물(DET)를 이용하여 항산화, 항노화 및 미백 기능을 규명하였다. 항산화능은 DPPH와 superoxide dismutase (SOD) assay를 통해 규명하였으며, 그 결과 DBG와 DET 모두 현저한 DPPH 소거능 및 SOD-유사능을 보여주었다. 또한 elastase와 hyaluronidase 억제능 그리고 matrix metalloproteinase (MMP-1) 발현을 통해 항노화 기능을 규명하였다. DBG와 DET 모두 농도의존적으로 elastase와 hyaluronidase를 억제하였으며, MMP-1 발현 역시 저해하였다. 마지막으로 미백 기능을 규명하기 위하여 tyronisinase 억제 및 melanin 생성 저해능을 알아보았는데, DBG 추출물만이 tyrosinase를 저해할 수 있었다. 요약하면, 감 추출물은 강한 항산화, 항노화, 미백 기능을 갖고 있으며, 추후 화장품 소재로 활용이 가능할 것으로 사료된다.
The objective of this study is to evaluate the antioxidant components, elastase inhibition activities, and melanin synthesis rates of Korean traditional Actinidia (Actinidia arguta) fruits and leaves depending on the ethanol extraction concentrations. The total polyphenol content was the highest in the 50% ethanol extract of both fruits and leaves, with values of 634.1 mg GAE/100 g and 3,985.2 mg GAE/100 g, respectively. The total flavonoid content was the highest in the fruit 90% extract and leaf 50% extract at 191.9 mg/100 g and 2655.6 mg/100 g, respectively. The vitamin C content was the highest in the 50% extract of leaves at 2990.3 mg/100 g. Elastase inhibition was the highest at 56.9% in the leaf 50% extract at a concentration of 1,000 ㎍/mL. Melanin synthesis inhibition showed the highest melanin synthesis inhibitory effect among the extracts, as the leaf 50% extract showed an inhibitory rate of 65% or more. Therefore, the antioxidant components, elastase inhibition activities, and melanin synthesis inhibitory rate were better in leaves than in fruits. The leaf 50% extract was particularly the best among the extracts. Korean traditional Actinidia leaves can be considered as potential sources for new functional materials.
Objectives : To investigate the effects of Ohbaesangami (OBSGM) on mucosa and skin diseases, anti-microbial and anti-inflammatory tests were performed using several in vitro test models. Results : In anti-microbial test, OBSGM showed the slight inhibitory effect against Propionibacterium acnes (P. acnes) and Staphylococcus aureus (S. aureus). In anti-oxidant test, OBSGM showed the potent radical scavenging activity. In anti-inflammatory test, OBSGM weakly inhibited the lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide(NO) release from the RAW 264.7 macrophage cells. OBSGM also inhibited the LPS-induced $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$ and cyclooxygenase-2 (COX-2) expressions. The inhibitory effects of OBSGM on macrophage activation was via the inhibition of $NF-{\kappa}B$, evidenced by transient transfection assay. Furthermore, OBSGM markedly inhibited the activation of Jun-N-terminal kinase (JNK) and p38 MAP kinase in RAW 264.7 cells. In skin wrinkle formation assay, OBSGM strongly inhibited collagnease and elastase, whose activities are tightly related with the wrinkle formation. In addition, OBSGM inhibited the activities of MMP-1, MMP-2 on the mRNA levels in RAW 264.7 cells. However, OBSGM did not show an inhibitory potential on tyrosinase activity and melanin synthesis, indicating that it could not be applicable for skin whitening. Conclusion : These results suggest that the anti-inflammatory effect of OBSGM may be due to its inhibitory potentials on the macrophage activation. And, the anti-wrinkle effects of OBSGM may be due to its inhibitory potential on the collagnease and elastase activities. Therefore, OBSGM could be applicable for the treatment of mucosa and skin diseases.
시호 추출물로부터 자외선에 의한 주름개선 효과를 확인하여 화장품 소재로서의 가능성을 검증하였다. 주름 활성 검증을 위하여 전자공여능, elastase, pro-collagen 생합성, Matrix metalloprotease-1 (MMP-1)의 활성을 측정하였다. 시호 추출물의 세포 독성을 측정하기 위하여 MTT assay를 하여 세포 독성이 100%에 가까운 농도인 5, 10, $50{\mu}g/mL$의 농도에서 pro-collagen 생합성과 MMP-1의 활성 검증하였다. 시호 추출물의 전자 공여능과 elastase 활성을 측정한 결과 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서 각각 80, 52%의 저해 활성을 가졌다. 또한 pro-collagen 생합성 역시 UVB를 조사한 후 시호 추출물을 농도 별로 처리 한결과 농도의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 주름생성에 관련되어져 있는 MMP-1의 발현을 알아본 결과 시호 추출물에 의해 total protein 양이 또한 감소되는 것을 확인 할 수 있었다. 따라서 시호는 주름활성을 개선시킬 수 있는 기능성 소재로 활용 될 수 있을것으로 사료된다.
본 연구는 육종용을 이용한 기능성 화장품 소재 개발을 목적으로 육종용 추출물의 피부 미백 및 항노화 효능 검정을 위해 수행되었다. 육종용 추출물의 세포 생존율은 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 MTT assay를 수행하여 측정한 결과, 육종용 추출물 4 mg/ml 농도에서 90% 이상의 세포 생존율을 보였다. 육종용 추출물을 처리한 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 RT-PCR로 유전자 발현을 검정한 결과 tyrosinase, collagenase 및 elastase 유전자의 발현을 육종용 추출물 4 mg/ml 농도에서 각각 80.9%, 37.6%, 70.9% 억제 하였다. 육종용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능 측정을 이용한 항산화 활성은 2 ~ 10 mg/ml 농도에서 70.6% ~ 82.6%로 높게 나타났다. 육종용 추출물의 미백과 항노화 효과를 검정하기 위하여 육종용 추출물을 2, 4, 6, 8 및 10 mg/ml 농도로 처리하여 확인하였다. 육종용 추출물의 tyrosinase 저해활성은 66.8% ~ 78.5%, elastase 저해활성은 67.6% ~ 79.3%, collagenase 저해활성은 72.3% ~ 83.6%로 각각 나타났으며, hyaluronidase 저해활성은 65.8% ~ 69.2%로 나타났다. 따라서 육종용은 피부 미백 및 노화방지를 위한 기능성 화장품 소재로 우수한 것으로 평가되며, 세포생존율과 각종 효능을 고려할 때, 육종용 추출물 4 mg/ml 농도가 적정농도로 판단된다.
본 연구에서는 생리활성물질유도제인 elicitor를 처리한 주름조개풀의 열수, 에탄올 추출물들의 항산화 효과, tyrosinase, elastase, collagenase 및 HAase 등의 미용관련 생리활성의 변화를 살펴보았다. Elicitor 처리한 주름조개풀 추출물의 DPPH 및 PF 등의 항산화 효과는 elicitor 비처리구인 대조구에 비해 elicitor 처리구가 농도의존적으로 더 높은 항산화 활성을 나타내었다. Elicitor 처리한 주름조개풀 추출물의 미용활성은 elastase 및 collagenase 억제 효과에 의한 주름개선효과와 tyrosinase 저해에 의한 미백효과가 비처리구인 대조구에 비해 상대적으로 매우 높은 효소 억제 효과를 나타내어 elicitor 처리가 주름조개풀추출물의 미백 및 주름개선 효과의 증대에 크게 영향을 미치는 것으로 확인되었으며, 농도의존적인 양상을 나타내었다. 또한 HAase 억제에 의해 유래되는 염증 억제 효과도 비처리구인 대조구에 비해 에탄올 추출물에서 우수한 염증 억제 효과를 나타내었다. Elicitor 처리에 의해 대조구에 비해 처리구에서 생리활성 효소에 대한 억제율이 큰 폭으로 상승하는 효과를 나타내어, elicitor 처리가 유용물질의 산업화라는 전제를 충족시키기 위한 biomass 기법으로 매우 적당하다는 것을 시사해주었다. 따라서 주름조개풀 노지재배 시에 본 연구에서 사용한 elicitor를 처리하면 수확되는 주름조개풀의 단위 무게 당 유용물질의 생산량을 높일 수 있고, 생리할성도 증대시킬 수가 있어 산업화를 위한 고기능성 원료생산에 효율적인 재배기법으로 활용할 수 있을 것이라 판단되었다.
Background: To date, the anti-wrinkle efficacy of phellodendri cortex has not been defined. In this study, we investigated the nitric oxide (NO) production and elastase inhibitory activities of 80% methanol extract of Phellodendri cortex and its ethyl acetate fraction. Methods and Results: We prepared 80% methanol extract, and its fractions from phellodendri cortex. The treatment of RAW 264.7 cell with $25{\mu}g/m{\ell}$ 80% methanol extract and ethyl acetate fraction resulted in no toxicity. We conducted assays of nitric oxide (NO) production and elastase inhibition. In the NO production assay, the ethyl acetate fraction showed an inhibitory effect approximately 17 times stronger than the 80% methanol extract. In elastase inhibitory assay, the ethyl acetate fraction also showed a stronger effect than the 80% methanol extract. In order to standardize the extract and fraction, we used TLC to separate the extract and observed the plate under UV light. We confirmed that the known pharmacological ingredients berberine, and palmatine in the 80% methanol extract and the ethyl acetate fraction. Conclusions: These results indicated that phellodendri cortex extract and its ethyl acetate fraction produced strong inhibitory effect on elastase and NO production.
Silkworm-derived silk materials which contain 45 to 55% protein (18 amino acids, including 8 essential amino acids) have free radical-scavenging activities. In the present study, we investigated the whitening and anti-aging effects of silkworm gland under various conditions with B16F1 melanoma cells and human dermal fibroblasts. To evaluate the toxicity of soluble gland hydrolysate (SGH), mouse-derived B16F1 melanoma cells were treated with 0.2~5 mg/mL, cytotoxicity was not observed at all concentrations. The tyrosinase and elastase activities were significantly decreased as dosage levels of SGH increased. In addition, cell death was decreased by treated with SGH and antioxidative activity was the most effective in the SGH treatment. These findings suggest that SGH may be used as a potential functional biomaterial in having the skin whitening effect and anti-aging activity by inhibition of tyrosinase and elastase activities.
피부주름 개선에는 콜라겐(collagen)뿐만 아니라 탄력섬유인 엘라스틴(elastin) 등도 기여하는 것으로 보고되고 있다. 더 나아가 자외선에 의하여 사람의 피부에서 광노화 현상이 나타나며 자외선 조사 후 엘라스타제(elastase)의 활성이 증가하기 때문에 엘라스타제의 활성증가는 자외선에 의한 피부 탄성도의 감소 및 주름 생성의 주요원인으로 생각된다. 따라서 본 연구에서는 피부주름 생성에 영향을 미치는 엘라스타제의 활성을 측정하기 위한 모델을 마련하기 위하여 시판되는 두 가지 엘라스타제, 돼지 췌장 엘라스타제(porcine pancreatic elastase)와 사람 호중구 엘라스타제(human neutrophil elastase)를 사용하였으며 다음 세 가지는 정상 사람 섬유아세포(normal primary human fibroblasts), 쥐의 3T3 섬유아세포주(3T3 mouse fibroblasts), 사람의 CCD-25Sk 섬유아세포주(CCD-25Sk human fibroblasts)로부터 elastase를 준비하여 사용하였다. 준비된 5가지 효소의 농도에 기질의 농도 및 배양시간에 따르는 효소의 활성을 비교 평가하였다. 양성대조군으로 사용한 phosphoramidon이 normal human primary fibroblast elastase와 CCD-25Sk fibroblast elastase의 활성을 유의성 있게 억제한 반면에 porcine pancreatic elastase에는 별다른 영향을 미치지 못하였다. 따라서 주름 개선 후보물질 탐색을 위한 엘라스타제의 선정에는 신중한 고려가 필요할 것으로 사료된다.
To investigate effects of pine essential oil isolated by steam distillation from Pinus densiflora needles (PN) and twigs (PT) on anti-oxidant and anti-aging activities, the experiments were carried out to determine anti-oxidant and antiaging activities on DPPH radical scavenging activity, NBT/xanthine oxidase-superoxide scavenging activity, silica-induced intracellular $H_2O_2$ and hydroxyl radical generation in RAW264.7 cells, hyaluronidase and elastase activities in vitro. Essential oil of PN and PT were contained 0.225 and 0.176 (w/v) %, respectively. PN was contained with 30 kinds of essential oil and its major constituent is $\alpha$-pinene (21.5%). Further PT was contained with 40 kinds of essential oil and its major constituent is $\beta$-pinene (22.4%) in GC/MS assay. Other essential oils of PN were $\beta$-pinene, camphene, myrcene, limonene, terpinolene, $\alpha$-terpineol, bornyl acetate, $\alpha$-copaene, caryophellene and humulene and PT were $\alpha$-pinene, camphene, phellandrene, limonene, terpinolene, $\alpha$-terpineol, bornyl acetate, $\alpha$-copaene, caryophellene and humulene. The essential oil of PT have more active than that of PN in anti-oxidant activity which has significant DPPH radical and superoxide scavenging activity, and significant inhibitory activities on silica-induced intracellular $H_2O_2$ and hydroxyl radical generation, as well as, significantly inhibited elastase and hyaluronidase activities. Further, phellandrene, myrcene and $\alpha$-pinene have DPPH radical and superoxide scavenging activities, $\beta$-pinene, terpinolene, myrcene and phellandrene inhibited silica-induced intracellular $H_2O_2$ and hydroxyl radical generations. And also phellandrene and $\beta$-pinene inhibited hyaluronidase and elastase activities. In conclusion, the essential oils isolated from PN and PT have anti-oxidant and anti-aging activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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