Various skin diseases are occurring due to external factors such as urbanization and increase in environmental pollution and wearing masks due to COVID-19. Accordingly, various functional cosmetics are being released, but as some side effects are reported, research on functional cosmetics materials using natural plants is necessary. Therefore, in this study, the antioxidant, antibacterial and anti-inflammatory effects of Phyllanthus emblica, Geranium (Pelargonium graveolens), and Commiphora myrrha mixed extracts (PGC) that pharmacological efficacy has been verified were analyzed and their potential as functional cosmetics raw materials was examined. Four extracts (PGC-1~4) were prepared according to the extraction method. ABTS and DPPH radical scavenging activity experiments were conducted for the antioxidant efficacy of the extracts. In addition, paper disc experiments and LPS inflammation-inducing cytokine experiments were conducted to examine the antibacterial and anti-inflammatory effects. In addition, a cell viability test was performed to confirm cytotoxicity. As results of the study, all extracts showed antioxidant, antibacterial, and anti-inflammatory effects without cytotoxicity, and in particular, PGC-4, a fermentation and ultrasonic extract, showed the best efficacy. This means that the extraction yield of useful components varies depending on the extraction method.
본 연구에서는 세토카 가지 정유의 주요 성분을 분석하고 이들의 항균, 항염 및 세포독성 실험을 진행하였다. 세토카는 제주도에서 널리 재배되고 있는 감귤류의 품종이다. 세토카 나무의 가지는 간벌 작업으로 인해 대부분 폐기되고 있고, 이러한 폐자원의 활용은 최근 많은 관심을 받고 있다. 정유 성분은 세토카 가지의 에탄올 추출물을 호호바오일로 처리하여 얻었다. 세토카 정유의 주요 성분은 ethyl linoleate (64.1%), ethyl palmitate(16.5%), neophytadiene (11.1%) 및 ${\beta}$-citronellol (5.1%)임을 확인하였다. 이들의 항균활성을 확인하기 위하여 피부 관련 미생물에 대한 paper disc 확산법을 실시한 결과 Staphylococcus aureus 및 Propionibacterium acnes에서 좋은 항균활성을 보였다. 또한 항염활성을 확인하기 위해 lipopolysaccharide(LPS)로 염증이 유도된 대식세포에서 nitric oxide (NO) 생성량을 측정한 결과 세토카 정유 성분은 농도의존적으로 NO 생성을 저해하였다. WST-1 분석법을 이용하여 세포독성을 측정한 결과 RAW 264.7 macrophage 및 HaCaT 각질형성세포에서 세포생존율이 무처리 대조군과 비슷한 결과를 보였다. 이러한 결과를 바탕으로 세토카 가지 정유는 세포독성이 없으면서 염증억제 및 항균효과가 있음을 확인하였으며, 이를 응용한 화장품소재로써의 개발이 가능할 것으로 여겨진다.
Propionibacterium acnes is known to playa pivotal role in the pathogenesis of acne vulgaris. CBT-SL5 is one of the antimicrobial peptides from Enterococcus faecalis SL5, and it has shown antimicrobial activity against P. acnes. The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of CBT-SL5 on the inflammation induced by P. acnes in cultured human keratinocyes. Cultured human keratinocytes derived from neonatal foreskin were treated with heat-killed P. acnes to induce inflammation, and then various concentrations of CBT-SL5 were added to the P. acnes-treated keratinocytes. The mRNA expression and protein secretion of interleukin (IL)-8, an inflammation marker, was analyzed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. We also analyzed the nuclear factor-kappa B (NF-$\kappaB$) p65 translocation by performing immunofluorescent staining. P. acnes treatment up regulated the IL-8 mRNA expression in the keratinocytes, and this was brought about through both toll-like receptor (TLR)2 and TLR4. At the concentrations of 10, 50, and 100 ng/ml, CBT-SL5 significantly down regulated the P. acnes-induced IL-8 mRNA expression and protein production (p<0.05). At 6 hand 12 h of the treatment, CBT-SL5 significantly suppressed the P. acnes-induced IL-8 mRNA expression. Secretion of IL-8 protein was significantly reduced at 24 h. The functional inhibitory activity of CBT-SL5 was shown by CBT-SL5 suppressing the P. acnes-induced NF-$\kappaB$ translocation from the cytoplasm to the nucleus. These results demonstrated that CBT-SL5 suppressed the P. acnes-induced IL-8 expression in keratinocytes. Therefore, CBT-SL5 may be a novel anti-inflammatory treatment for acne.
본 연구는 피부에 안전하고 부작용이 없는 식물성 원료를 이용한 항염 소재를 개발하여 피부 진정 및 여드름, 아토피 피부에 적용되어질 수 있는 피부 자극 완화제를 개발하고자 하였다. 이에 따라 전통적으로 염증 질환 치료에 사용되어진 오동나무(Paulownia coreana Uyeki)를 소재로 하여 오동나무 잎 추출물의 항산화 효능과 항염 효능을 알아봄으로써 화장품 원료로의 가능성을 확인하였다. EPR을 이용하여 오동나무 잎 추출물의 superoxide anion radical 소거능을 확인하였으며 대식세포주에서의 LPS 처리에 의해 유도되어지는 NO의 생성을 저해시키는 효능을 확인하였다. 그 결과 추출물의 우수한 NO 생성 저해능을 확인하여 오동나무 잎 추출물의 항염 효능 메카니즘을 규명하였다. ELISA 기법을 이용하여 $PGE_2$ 생성 억제 효능을 확인하였으며 NO와 $PGE_2$ 생성 단백질인 iNOS와 COX-2의 발현 여부를 확인한 결과 오동나무 잎 추출물 처리에 의해 두 단백질의 발현이 확연히 감소되는 것을 확인하였다. 또한 염증 반응의 초기 단계에 관여하는 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해정도를 시간별로 확인한 결과 LPS 처리 30 min 후 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해가 일어나게 되는데 오동나무 잎 추출물을 함께 처리하였을 경우 시간이 경과되어도 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해가 일어나지 않는 것을 확인하였다. 이로써 오동나무 잎 추출물의 항염 효능은 염증 반응 신호 전달의 초기 단계에 해당하는 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해를 억제함으로써 결과적으로 NO와 $PGE_2$의 생성을 감소시킴을 확인하였다. 또한 CCD-986sk와 Raw 264.7 세포에 대한 세포 독성이 존재하지 않음을 확인함으로써 오동나무 잎의 항염 효능을 이용한 피부 자극완화제로서의 개발 가능성을 확인하였다.
This study was carried out to investigate the anti-microbial of various herbal extracts on six types of bacteria related to skin diseases and effects of Saussurea lappa extract on dermatitis and acne. The results are followed ; 1. In the experiment on P. acnes using paper disk methods, Eugenia caryophyllata extract made 19mm clear zone, Saussurea lappa extract and Morus alba extract made 13mm and MIC of Morus alba extract and Eugenia caryophyllata extract was below 0.01$\%$. 2. In the experiment on S. aureus, extract of Eugenia caryophyllata, Poncirus trifoliata and Rubus coreanus made 9-10mm clear zone. 3. In the experiment on C. xerosis, Sesamum indicum extract made 16mm clear zone and MIC of that was 0.3$\%$. 4. In the experiment on C. albicans, extract of Cinnamomum cassia, Eugenia caryophyllata and Asparagus cochinchinensis made 9-10mm clear zone. 5. In the experiment on P. ovale, Cinnamomum cassia extract made 25mm clear one, MIC of that was 0.05$\%$. 6. In the experiment on T. mentagrophytes, Cinnamomum cassia extract made 26mm clear zone, extract of Eugenia caryophyllata, Rhizoma kaempferiae, Piper longum, Saussurea lappa and Zingiber officinale made 18-22mm clear zone, MIC of all extracts was below 0.02$\%$. 7. Saussurea lappa extract inhibited 85$\%$ and 28$\%$ of NO production at 50㎍/㎖ and 5 ㎍/㎖ 8. Saussurea lappa extract inhibited activity of COX Ⅱ over 50$\%$ at 10㎍/㎖ 9. Saussurea lappa extract had not radical scavenging activity and Saussurea lappa extract didn't inhibit manifestation of IL-1${\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$, and activity of 50- reductase I.
본 연구는 개망초꽃 에센셜 오일의 항산화, 항균 및 항염 효능에 관하여 조사한 것이다. 개망초꽃 에센셜 오일은 용매추출법으로 추출하였다. 개망초꽃 에센셜 오일의 항산화 효능은 ABTS 라디칼 소거능과 DPPH 라디칼 소거 효능 측정으로 확인하였다. ABTS 라디칼 소거 효과는 $500{\mu}g/ml$ 농도에서 98.6%, DPPH 라디칼 소거는 48.3%로 좋은 효능을 나타내었다. 항균 활성은 S. aureus와 P. acnes, E. coli 균에 대하여 paper disc법과 최소저해농도(MIC)와 최소사멸농도(MBC)값을 측정하여 확인하였다. S. aureus 균주에 대해서는 MIC 값과 MBC 값이 모두 0.31 mg/mL 농도에서 우수한 억제 효과를 나타내었다. P. acnes 균에 대해서는 disc법에서 14 mm의 clear zone 형성과 MIC, MBC에서 각각 0.31 mg/mL, 0.63 mg/mL로 좋은 억제 효과를 보였다. 항염 활성에 관련하여 NO 억제 측정에서도 농도 의존적으로 NO의 생성을 억제시킴을 확인하였고, pro-inflammatory cytokine인 TNF-${\alpha}$, IL-6 역시 농도 의존적으로 억제하였다. 이러한 결과로부터 개망초꽃 에센셜오일은 항산화, 항균 및 항염 효능을 갖는 화장품 원료로서 개발 가능성이 있음을 시사한다.
본 연구는 연교를 함유한 한방처방단을 이용하여 항염 소재를 개발하여 피부 진정 및 여드름, 아토피용 한방화장품 소재를 개발하고자 하였다. 한방에서 염증 질환 치료에 이용되고 있는 연교를 함유한 처방단을 기성한의서를 바탕으로 조사하였다. 그 중 아토피 증상과 가장 연관이 있을 것으로 판단되는 연교승마탕(連翹升麻湯), 연교음(連翹飮), 청열소독음(淸熱消毒飮), 회춘양격산(回春凉膈散)의 처방단을 추출하여 항산화 및 항염 관련 효능을 알아보았다. 연교 함유처방단들의 자유라디칼 소거활성과 superoxide dismutase 유사활성을 알아보았으며, lipoxygenase 활성 저해 효과와 대식세포주에서의 LPS 처리에 의해 유도되어지는 nitric oxide (NO)와 prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$)의 생성을 저해하는 효능을확인하였다. 그 결과 연교 함유 처방단들의 우수한 항산화효과와 lipoxygenase 활성 저해 효과를 확인하였다. 특히, 연교승 마탕과 회춘양격산의 NO와 $PGE_2$의 생성 억제 효과를 확인하였다. 또한, 인체 피부 일차자극시험 결과 무자극으로 나타났다. 이로써, 연교를 함유한 처방단들은 항염 효능을 이용한 피부 자극 완화제로서의 개발 가능성을 확인하였다.
산수유 종자 추출물의 천연 방부제로서 가능성을 평가하기 위하여 항균활성 및 화장품 방부 효능 평가를 실시하였다. 산수유 종자는 각각 1,3-부틸렌글리콜과 에탄올을 이용하여 추출하였다. Paper disc method로 항균활성을 평가한 결과 Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis와 Propionibacterium acnes에서 항균활성이 나타났으며 산수유 종자 1,3-부틸렌글리콜 추출물(COS-A)이 여드름균에대해 $26.7{\pm}4.0mm$로 가장 높았다. 최소저해농도(MIC) 측정 결과 산수유 종자 에탄올 추출물(COS-B)이 가장 낮은 농도에서 S. epidermidis균의 생장을 억제하였다. 에멀션에서의 방부효능 평가를 위해 Challenge test를 실시한 결과 COS-A와 COS-B를 첨가한 에멀션에서 균 접종 7일 후 피부상재균이 100% 사멸되었다. 이러한 결과는 산수유 종자 추출물이 화장품에서 합성방부제를 대체할 천연 방부제로서 가능성이 있을 것으로 사료된다.
본 연구자들은 동${\cdot}$서양에서 오랫동안 민간요법으로 사용되어져 왔고, 문헌에도 약리적인 작용이 기록되어 있는 Opuntia ficus-indica var. Saboten Makino (손바닥 선인장, 백년초) 줄기 분말을 사용하여 항균생리활성 물질을 규명하고자 하였다. 줄기 분말을 황산으로 가수분해 처리한 후 메탄올, 메틸클로라이드, 에탄올 등의 용매로 추출하였다. 용매추출물 가운데 methylene chloride 추출물의 경우 가장 탁월한 항균활성을 나타내었다. 항균활성을 나타내는 생리활성 물질을 분리 분석하기 위하여 조제용 TLC를 이용하여 산 가수분해 추출물로부터 7개의 분획물을 분리하였다. 7개 분획물 가운데 가장 광범위한 항균활성을 나타내는 유효 분획물로 분리된 것을 MBT-01108이라 명명하였다. 산가수분해로 추출된 분획물 MBT-01108을 구조 분석한 결과 항균 활성을 나타내는 화합물이 levulinic acid임을 밝혀냈다. Opuntia ficus-indica var. Saboten Makino로부터 분리된 levulinic acid는 식품 또는 화장품의 천연 보존제로써 사용가능하리라 판단되며, 또한, 세균성 질병예방, 여드름, 노화 예방, 미백 화장품 성분, 그리고 항생제로도 사용 가능한 물질임을 밝혀냈다.
본 연구는 녹나무과 10종의 추출물이 Propionibacterium acnes의 억제활성에 미치는 영향을 분석하여 새로운 천연 항균소재를 개발하기위해 수행되었다. 실험재료는 완도와 제주도에서 채집하였으며, 부위(잎, 가지), 용매(증류수, 80% 에탄올, 100% 메탄올) 및 초음파 추출시간(15, 30, 45분)에 따른 조추출물의 항균활성을 agar diffusion method로 조사하였다. 대조구로는 합성항균제인 methylparaben과 phenoxyethanol 0.4, 1, 2, 4 mg/disc를 사용하였다. 연구에 사용된 10종의 모든 추출물에서 억제활성을 보였으며, 여드름균에 대한 항균작용을 확인할 수 있었다. 이 중 월계수는 80% 에탄올에 45분간 추출한 조건에서 20.2 mm의 생육억제환을 나타내어 가장 우수한 여드름균에 대한 항균작용을 확인할 수 있었다. 월계수 잎을 100% 메탄올을 용매로 초음파 30분 추출한 다음n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol 그리고 water 순으로 용매 분획하여 항균활성을 비교분석하였다. 결과, butanol 분획물을 제외한 모든 분획물에서 10.0 mm 이상의 억제환이 형성되었다. 그중 ethyl acetate 분획물에서 억제환이 13.3 mm로 가장 컸으며, 조 추출물(10.2 mm)과 대조구인 phenoxyethanol (12.5 mm)에 비해서도 유의적으로 우수한 억제활성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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