Background and Objectives : Cartilage reconstruction is one of medical issue in otolaryngology. Tissue engineering is presently being utilized in part of cartilage repair. Sources of cells for tissue engineering are chondrocyte from mature cartilage and bone marrow mesenchymal stem cells that are able to differentiate into chondrocyte. Recent studies have shown that adipose tissue have mesenchymal stem cells which can differentiate into adipogenic, chondrogenic myogenic osteogenic cells and neural cell in vitro. In this study, we have examined chondrogenic potential of the canine adipose tissue-derived mesenchymal stem cell(ATSC). Materials and Methods : We harvested canine adipose tissue from inguinal area. ATSCs were enzymatically released from canine adipose tissue. Under appropriate culture conditions, ATSCs were induced to differentiate into the chondrocyte lineages using micromass culture technique. We used immunostain to type II collagen and toluidine blue stain to confirm chondrogenic differentiation of ATSCs. Results : We could isolate ATSCs from canine adipose tissue. ATSCs expressed CD29 and CD44 which are specific surface markers of mesenchymal stem cell. ATSCs differentiated into micromass that has positive response to immunostain of type II collagen and toluidine blue stain. Conclusion : In vitro, ATSCs differentiated into cells that have characteristic cartilage matrix molecules in the presence of lineage-specific induction factors. Adipose tissue may represent an alternative source to bone marrow-derived MSCs.
Aravinthan, Adithan;Hossain, Mohammad Amjad;Kim, Bumseok;Kang, Chang-Won;Kim, Nam Soo;Hwang, Ki-Chul;Kim, Jong-Hoon
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.2
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pp.287-294
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2021
Background: Ginsenoside Rb1 (G-Rb1), one of the major active compounds in Panax ginseng, has already been shown to reduce inflammation in various diseases. Osteoarthritis (OA) has traditionally been considered a degenerative disease with degradation of joint articular cartilage. However, recent studies have shown the association of inflammation with OA. In the present study, we investigated whether Rb1 had an antiinflammatory effect on monoiodoacetate (MIA)-induced OA in ovariectomized rats as a model of postmenopausal arthritis. Methods: G-Rb1 at a dosage of 3 and 10 ㎍/kg body weight was administered every 3 days intraarticularly for a period of 4 weeks to observe antiarthritic effects. Diclofenac (10 mg/kg) served as a positive control. Results: The administration of Rb1 significantly ameliorated OA inflammatory symptoms and reduced serum levels of inflammatory cytokines. Furthermore, G-Rb1 administration considerably enhanced the expression of bone morphogenetic protein-2 and collagen 2A and reduced the levels of matrix metalloproteinase-13 genes, indicating a chondroprotective effect of G-Rb1. G-Rb1 also significantly reduced the expression of several inflammatory cytokines/chemokines (interferon gamma (IFN-γ), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)/CCL-2, interleukin [IL]-1β, and IL-6). Histological analysis demonstrated that G-Rb1 significantly attenuated the pathological changes in MIA-induced OA in ovariectomized rats. Safranin O and toluidine blue staining further demonstrated that G-Rb1 effectively prevented the degradation of cartilage and glycosaminoglycans, respectively. Conclusion: Overall, our results suggest that G-Rb1 exerts cartilage protective effect on MIA-induced ovariectomized OA rats, by inhibiting inflammatory mediators such as IL-6, IL-1β, MCP-1/CCL-2, cyclooxygenase-2 (COX-2), and prostaglandin E2 (PGE2). These results shed a light on possible therapeutic application of G-Rb1 in OA.
Objectives : Degenerative arthritis arises from several physiological factors. The purpose of this study is to investigate the beneficial effects of Phyto-extract Complex (CME) on degenerative arthritis. Methods : CME is composed of extracts of mulberry (Morus alba L.) fruit, mulberry leaves and black beans (Glycine max (L.) Merr.). To measure the toxicity of CME, we performed the single-dose toxicity study. For the evaluation of its effects on degenerative arthritis, we examined the inhibition of cyclooxygenase-2 (COX-2) activity, using in vitro enzyme activity assay, the reduction of protein expression of COX-2, 5-lipoxygenase (5-LO), and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in RAW264.7 cells which were stimulated by lipopolysaccharide (LPS). We also examined the serum level of prostaglandins (PGs) and injury of the knee joint cartilage, using animal model of degenerative arthritis induced by mono-sodium iodoacetate (MIA). Results : CME did not have any toxicity in single-dose toxicity study. The CME inhibited the activity of COX-2 and could reduce the protein expression of COX-2, 5-LO and iNOS in RAW264.7 cells. The CME also reduced the serum level of PGs and prevented from the cartilage injury of knee joint in animal model of degenerative arthritis induced by MIA. Conclusions : Taken altogether, the CME could be useful for the improvement of degenerative arthritis through its various anti-inflammatory activities and prevention from the cartilage injury of knee joint.
Fibronectin fragments found in the synovial fluid of patients with osteoarthritis (OA) induce the catabolic responses in cartilage. Nuclear high-mobility group protein Box 1 (HMGB1), a damage-associated molecular pattern, is responsible for the regulation of signaling pathways related to cell death and survival in response to various stimuli. In this study, we investigated whether changes induced by 29-kDa amino-terminal fibronectin fragment (29-kDa FN-f) in HMGB1 expression influences the pathogenesis of OA via an HMGB1-modulated autophagy signaling pathway. Human articular chondrocytes were enzymatically isolated from articular cartilage. The level of mRNA was measured by quantitative real-time PCR. The expression of proteins was examined by western blot analysis, immnunofluorescence assay, and enzyme-linked immunosorbent assay. Interaction of proteins was evaluated by immunoprecipitation. The HMGB1 level was significantly lower in human OA cartilage than in normal cartilage. Although 29-kDa FN-f significantly reduced the HMGB1 expression at the mRNA and protein levels 6 h after treatment, the cytoplasmic level of HMGB1 was increased in chondrocytes treated with 29-kDa FN-f, which significantly inhibited the interaction of HMGB1 with Beclin-1, increased the interaction of Bcl-2 with Beclin-1, and decreased the levels of Beclin-1 and phosphorylated Bcl-2. In addition, the level of microtubule-associated protein 1 light chain 3-II, an autophagy marker, was down-regulated in chondrocytes treated with 29-kDa FN-f, whereas the effect was antagonized by mTOR knockdown. Furthermore, prolonged treatment with 29-kDa FN-f significantly increased the release of HMGB1 into the culture medium. These results demonstrated that 29-kDa FN-f inhibits chondrocyte autophagy by modulating the HMGB1 signaling pathway.
Purpose: The survival of bone marrow derived stem cell was reported several times. But the survival of adipose tissue derived stem cells(hASCs) was not mentioned on. We studied the adipose tissue derived stem cell's survival and effect on articular cartilage in rabbits. Methods: Osteoarthritis was induced in twenty New Zealand white rabbits by intraarticular injection of monosodium iodoacetate(MIA). After four weeks, hASCs were also injected into the knee joints space without any vehicle, but the control group received phosphate buffered saline only. The histologic grade of articular cartilage was measured in 4 and 8 weeks after the transplantation of hASC and the viability of injected stem cells measured by Fluorescent in situ Hybridization (FISH) examination. Results: After 4 and 8 weeks from hASCs transplantation, histologic grade was not significantly difference between two groups(p>0.05), and the Y chromosome of the transplanted hASCs was not detected in articular cartilage. Conclusion: We found that direct injection of hASC in joint space didn't work on damaged articular cartilage repair.
The present study was focussed to assess the proliferating cells in the distal epiphyseal tissue of the chicken femur by immunohistochemical staining methods. Four chickens were administrated intraperitoneally by twice consecutive injections, 1 day interval with bromodeoxyuridine(Brdur, 0.05 mg/gm BW/time), and then were killed by exsanguination of jugular vein at 2 hours after last injection. Samples were taken from femur distal epiphyseas of chicken. Labeling indexes(LI) were calculated as the ratio of the number of anti-Brdur monoclonal antibody-labeled cells in the each tissue layers from basal layer of the integument to bone marrow. The overall LI were found to be $13.90{\pm}3.44%$, $30.03{\pm}7.52%$, $16.00{\pm}9.41%$, $0.00{\pm}0.00%$ and $60.03{\pm}13.39%$ at basal layer of integument, perichordrium, reseving zone in cartilage, hypertrophic zone in cartilage and bone marrow respectively. LI in proliferating zone of cartilage were found to be $36.99{\pm}7.59%$, $32.83{\pm}5.38%$ and $22.02{\pm}6.27%$ at reserving zone side region, middle region, and hypertrophic zone side region respectively. The tissue layers with higher LI were odered as bone marrow, reserving zone side region in proliferating zone, middle region in proliferating zone, perichondrium, hypertrophic zone side region in proliferating zone. reserving zone of cartilage and basal layer of integument. These data indicate that the overall LI in the each tissue layer of distal epiphyseas of the chicken femur were concluded to be higher than that in another tissue of adult birds but hypertrophic zone of cartlage were appeared to be not proliferating cells.
This investigation examined the effect of lateral shift of mandible from functional occlusal interference on the growth of mandible and the growth pattern of mandible shown after the removal of occlusal interference. The followings were performed with the results below : the changes in mandible and condylar cartilage were studied in the experimental group with upper right, lower left incisors cut for 2 and 4 weeks- an 4-week-old rats and the experimental group which had cut for 4 weeks and suspended for 2 weeks. 1. In the 2-week experimental group, the left mandibular length, condylar length, mandibular height and condylar area seemed smaller than those on the right and the normal group ; the right mandibular length and condylar area were smaller than the normal group. 2. In the 4-week experimental group, left condylar area was smaller than the right, but due to the quick changes in adaptability of left mandible, right and left mandibular lengths were similar. compared with the normal group, however, mandibular length and condylar area still remained small. 3. In the 6-week experimental group, the left and the right appeared similar with the mandibular length remaining still shorter than the normal group. 4. In the sagittal plane, the proliferation of the cartilage layers of the left condylar cartilage of the 2-week group appeared to have general repression compared with the right and the normal group. The right side also showed repressed growth compared with the normal group. In the 4 and 6-week groups, however, it was similar to the normal group. 5. In condylar cartilage volume, no significant difference was noted in the comparisions of left and right of the experimental group, nor in the comparison of the same sides of experimental wand normal groups. Based on the above, in case of contralateral incisal cutting in rats, it was observed that the growth of mandible and condyle of the cutting side was repressed, at the same time, the quick adaptability led to similar changes of growth in left and right mandibles. But judging from the similar phenomena throughout the whole experimental period in the changes of condylar cartilage volume in the experimental, right and left, and normal groups, the general overall growth of condylar cartilage was found unrepressed. It was also recognized that the growth of condylar cartilage can take in various directions.
Kim, Soo-Young;Lee, Soo-Hyang;Hwang, Eun-A;Choi, Hyun-Gon;Kim, Soon-Heum;Shin, Dong-Hyeok;Uhm, Ki-Il
Archives of Plastic Surgery
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v.37
no.3
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pp.259-264
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2010
Purpose: Most surgeons have used autogenous cartilage for columella strut graft. But the supply of autogenous cartilage is often limited. So, this study is to investigate the usefulness of biodegradable plate as columella strut material. Methods: We studied 19 patients who have secondary cleft nasal deformity. Patients were divided into two groups. Group A patients who were not closed their growth plate underwent columella strut graft only with biodegradable plate through endonasal approach. The biodegradable plate was inserted between nasal tip and anterior nasal spine. Group B patients were closed their growth plate. They had an operation for columella strut graft with biodegradable plate fixed with autogenous conchal cartilage. If nasal tip projection was insufficient, we performed additionally onlay graft on nasal tip with autogenous soft tissue or remnant cartilage. Results: As a result of mean 14 months follow-up, we achieved a good nasal tip projection, narrowing of interalar distance and symmetrical nostril shape. No specific complications were reported except 2 cases, which were the extrusion of biodegradable plate into the nasal cavity and Staphylococcus aureus infection. Conclusion: The columella strut graft using biodegradable plate is simple and effective method. Biodegradable plate can be a good substitute for columella strut in patients who can not use autogenous cartilages.
Objectives This study was aimed to evaluate the effects of Daeyoungjeon (hereinafter referred to DYJ) treatment on the injury of articular cartilage induced by monosodium iodoacetate in rats. Methods Twenty-four male rats were divided into normal, osteoarthritic control and DYJ group. Rats of normal group were injected with 0.1 ml physiological saline, rats of control and DYJ groups were injected with 0.1 ml monosodium iodoacetate (3 mg/ml) into each left and right knee joint cavities. Rats of DYJ group were administrated extracts of DYJ during 60 days per orally. At 60 days after treatment, gross lesions, area and proteoglycan contents of articular cartilage, histopathological lesions, immunohistochemistry on matrix metalloproteinases (MMP-2, MMP-3, MMP-7) were evaluated. Results Grossly, degenerative changes of articular cartilages were observed weak in DYJ group. The areas of articular cartilages were broader significantly in DYJ group. The proteoglycan contents in articular cartilages were lesser significantly in DYJ group. Histopathologically, the chondrocyte score was lesser significantly in DYJ group. MMP-3 expression in articular cartilages was observed weak in DYJ group. Conclusions From above results, DYJ treatment has inhibitory effects on the injuries of articular cartilage induced by monosodium iodoacetate in rats, and it's effects may be related with down regulation of MMP-3.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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