This test process on screening method for the detection of residual antibiotics in milk is simple, economic, sensitive to residual antibiotics and was given approval international organs. Thus, this study was carried out the comparison of Disk assay method and TTC-II method for sensitivity and minimum detectable range of antibiotics in raw milk. The results of this study was summarized as follows ; 1. The number of samples requested for treatment of mastitis was 198 samples. Comparison or analytical results among the methods of TTC-II, disk assay and Delve sp was that TTC-II 37 samples(18.6% ), Disk assay 125samples(63.1%), Delve SP 130 samples(65.7% ) reacted positively. Conformity rate of Delve SP and Disk assay was 70%. 2. Detectable limits of disk assay method in some antibiotics were more sensitive than those of official method(0.05-0.0025ppm in the $\beta$-lactams, 1ppm in two aminoglycoside, 0.2 ppm in one tetracycline, similar in one macrolide) 3. For sensitivity of residual sulfonamides TTC-II was much more sensitive than disk assay. Detectable limits of sulfamethazine and sulfadimethoxine were 30 to 50ppm levels. 4. The best medium preservation period is 1-2 days. 5. Concentration of brome cresol purple related to resistance for B stearothermophilus culture was 24ppm/ml. These results show that disk assay method for screening detection of antibiotics residuces in milk is worthy of use.
JO YOU-YOUNG;LIU JING;JIN YING-YU;YANG YOUNG-YELL;SUH JOO-WON
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권3호
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pp.491-496
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2005
The biosynthetic gene cluster for the aminoglycoside antibiotic kasugamycin was isolated and characterized from the kasugamycin producing strain, Streptomyces kasugaensis KACC 20262. By screening a fosmid library using kasA, the gene encoding aminotransferase, we isolated a 22 kb DNA fragment. The fragment contained seventeen complete open reading frames (ORFs); one of these ORFs, kasD, was identified as the gene for dNDP-glucose 4,6-dehydratase, which catalyzes the conversion of dNDP-glucose to 4-keto-6-deoxy-dNDP-glucose. The enzyme showed a broad spectrum of substrate specificity. In addition, ksR was overexpressed in E. coli BL21 and proved to be a self-resistance gene against kasugamycin. These findings suggest that the isolated gene cluster is highly likely responsible for the biosynthesis of kasugamycin.
Sisomicin 생산균인 Micromonospora inyoensis 균주를 변이유기체로 처리하였을 때 활성이 높은 균주들을 얻기 위한 최적조건으로는 각각 자외선(UV light) 처리에서 90%, nitrosoguanidine(NTG)에 대해 99%, nitrous acid에 대해 99.3%의 사멸율을 나타내는 경우였다. 이 때 분리된 colony들의 sisomicin생성능의 측정은 액체배양 대신 쉽고 간편한 agar plug법을 사용하였다. 한편, 변이유기제로 처리한 후 우량균주를 선택적으로 분리하기 위한 방법으로 aminoglycoside계통의 항생물질 혹은 중금속염을 함유한 농도구배 agar plate에서 생성된 균주들의 화성을 살펴본 결과, 항생물질로서는 gentamicin, kanamycin 이, 중금속염으로서는 Co, Hg가 효과적이었다.
본 연구에서는 현대인들에게 간식 또는 식사대용으로도 많이 소비되고 있는 샌드위치와 그 제조사업장에 대한 병원성 세균검사를 통하여 한 제조사업장의 행주에서 L. monocytogenes가 분리되었으며 모든 사업장의 원료와 샌드위치 20종에서 11주의 S. aureus를 분리하였으며, 이들 분리된 균주에 대하여 각각 26종과 20종의 항생제 내성 검사를 실시하여 샌드위치와 제조환경에 대한 항생제 노출정도를 알아보았다. C 사업장의 행주에서 분리된 L. monocytogenes는 총 26종의 항생제에 대하여 38.5%의 항생제 내성율을 나타내었다. penicillin계열의 항생제인 Am, OX, P에 모두 내성을 나타내었으며, aminoglycoside계열의 항생제인 AM, Gm, K, S, N에 대해서는 모두 감수성을 나타내었다. 총 70종의 시료에서 11주의 S. aureus가 검출되었으며 모두 구운 고기, 햄, 야채 등의 원료와 샌드위치에서 분리되었다. penicillin계열의 P와 Am에 90.9%로 가장 높은 내성율을 보였으며 OX에도 36.4%의 내성율을 나타내어 MRSA가 4주 확인되었다. 그리고 인체용 의약품 혹은 가축의 성장촉진제로서 사료에 첨가되는 B에 대하여 모든 분리균이 중간내성으로 나타나 B에 노출되어 있음을 시사하였다. PAmB 또는 OX을 포함하는 분리균주는 KECXM에 대해서도 내성을 나타내어 6, 7약제 내성형 이었으며 야채와 샌드위치에서 분리된 S. aureus라는 공통점을 보였다.
시중에서 사용되고 있는 일반 소독제를 대상으로 하여 병원 미생물의 내성 빈도를 검토한 결과는 약 30%였다. 그 중에서 푸드세프 (산화제 중 할로겐 계 소독약)와 동인테고 (양성 계면 활성제) 및 Iodo 175 (양성 계면 활성제)는 병원 미생물에 대해 낮은 감수성을 나타냈었을 뿐 아니라, 시험에 사용된 다른 소독제에 비하여 높은 내성 빈도를 나타내었다. 소독제 내성 균주를 사용해서 항생제 내성을 MIC test와 paper disc 방법으로 확인한 결과 30%의 내성 빈도를 나타내었다. 다른 항생제에 비해 aminoglycoside 계의 항생제인 gentamycin, kanamycin, streptomycin에서 높은 내성 빈도를 나타냄을 확인할 수 있었다. 본 연구실에서 제주도 손바닥 선인장으로부터 추출${\cdot}$분획한 MBT-01108 물질을 소독제와 항생제에 내성을 획득한 내성균에 상용했을 경우 내성이 생기지 않을 뿐 아니라, 내성균이 자라지 못하였다. 또한 현재 문제시되고 있는 다제 내성균인 MRSA, R-Pseudomonas aeruginosa, VRE, E. coli O157에 사용했을 경우에도 마찬가지의 결과를 얻을 수 있었다. 이상에서 살펴 본 바와 같이 손바닥 선인장에서 추출 ${\cdot}$ 분획한 MBT-01108 물질은 기존의 항생제와는 다른 기작으로 작용을 할 것으로 생각되고, 신규 항균 활성 물질의 약제 개발에 그 유용성이 매우 클 것으로 기대되며 여러 가지 항균성 생활 제품의 개발에도 유용할 것으로 기대된다.
항생제 사용에 따라 구강내 세균들이 가지게 되는 내성의 발현이 문제가 될 수 있다. 어린이 치면세균막에서 치주질환의 원인균들과 흔히 사용하고 있는 항생제들에 대한 내성유전자의 출현율을 알아보고자 중합효소연쇄반응을 이용하여 조사하였다. 1. 치주질환 원인균의 출현율은 F. nucleatum 95.4%, T. forsythia 55.2% 이었으며, P. gingivalis 40.2%, A. actinomycetemcomitans 5.7%, T. denticola는 3.4% 순이었다. 2. 항생제 내성유전자의 출현율 조사에서 cephalosporin 분해효소인 cfxA는 100%에서 발견되었으며 ${\beta}$-lactam 분해효소인 $bla_{TEM}$과 tetracycline 내성유전자인 tet(M)도 100%의 출현율을 보였다. tet(Q)는 88.5%, ${\beta}$-lactam 분해효소인 $bla_{SHV}$는 29.9%, macrolide계 내성 ermF유전자는 87.4%, vancomycin 내성 vanA는 48.5%의 출현율을 보였다. Aminoglycoside에 대한 복합 내성을 보이는 aacA-aphD와 meticillin 내성유전자 mecA는 9.2%로 가장 낮은 출현율을 보였다. 3. 치주질환 원인균과 항생제 내성유전자와의 관련성 조사에서 T. forsythia와 $bla_{SHV}$간에 그리고 P. gingivalis와 vanA간 에 유의한 상관성이 있었다. 항생제 내성유전자 tet(Q)와 ermF (0.514)간에 중등도의 상관성을 나타내었으며, mecA와 vanA (0.25)간에 유의한 상관성을 나타내었다. 건강한 어린이들의 치면세균막에 다양한 치주질환 원인균들과 항생제 내성유전자들이 존재하며, 상호 관련성을 가지고 존재함을 보여주었다.
목 적 : 요로감염은 소아의 감염 질환 중 호흡기 감염에 이어 두번째로 흔한 질환이며, 소아에서 가장 흔한 세균성 질환으로 적절한 치료가 시행되지 않을 경우 심한 신손상이 초래되어 소아기의 고혈압 중 60%가 이로 인해 발생하고 전체 신부전 환자의 15-20%가 소아기의 만성 신우신염으로 10-15년 후에 신기능을 잃게된 경우가 있다. 따라서 조기 진단과 적절한 치료 및 재발 방지가 중요하다. 그러나 최근 항생제의 개발, 항생제의 남용 및 부적절한 선택에 따른 특정 항생제 내성균들의 출현 및 증가로 요로감염 원인 균주의 항생제 감수성에 변화를 가져와 치료를 위한 항생제의 선택이 어려워지고 있다. 이에 저자들은 소아 요로감염증의 주요 원인균과 항생제의 감수성을 조사하여 적절한 항생제 선택에 도움을 주고자 하였다. 방 법 : 2002년 1월부터 2003년 12월까지 삼성제일병원 소아과에 입원하여 요세균 배양 검사상 단일 집락수가 $1.0{\times}10^5/mL$ 이상으로 배양되어 요로감염증으로 진단된 5세 이하 환아 69명을 대상으로 성별 및 연령별 발생 빈도, 방사선 소견, 주요 원인균과 원인균에 따른 항생제 감수성을 후향적으로 조사하였다. 결 과 : 1) 요로감염증 환아 69례에서 남아 52례(75.4%), 여아 17례(24.6%)로 남녀비가 3.05 : 1이였고 영아기에는 남아가 많았으나 이후에는 유의한 차이가 없었다. 연령별로는 1세 이하가 61례(88.4%), 1-2세가 5례(7.2%), 2세 이상이 3례(4.4%)로 1세 이하가 가장 많았다. 2) 전체 환아 69례의 원인 균주는 그람 음성 균주가 68주(98.5%)로 대부분이었고 그중 E. coli가 54주(78.3%)로 가장 많았다. 그 외의 균주로는 Klebsiella 8주(11.6%), Pseudomonas 2주(2.9%), Proteus 2주(2.9%), Enterobacter 1주(1.4%), Morganelle 1주(1.4%), Enterococcus 1주(1.4%) 순이었다. 3) 69례 중 신장 초음파 검사는 68례에서 시행하여 7례(10.3%)에서 이상 소견을 보였고, 배뇨성 방광 요도 조영술은 44례에서 시행하여 8례(18.2%)에서 역류가 관찰되었다. 4) 그람음성 균주에 대한 항생제 감수성은 imipenem(98.4%)이 가장 높은 감수성을 보였고 다음으로 amikacin 96.9%, aztreonam 87.5%, cefepime 87.5%, cefoxitin 84.4%, ceftriaxone 84.4% 순으로 나타났다. 반면에 tobramycin 75.0%, gentamicin 70.3%, TMP/SMX 57.8%, ampicillin/sulbactam 28.1%, ampicillin 23.4%은 낮은 감수성을 보였다. 결 론 : 본 연구 결과에서는 amikacin과 cephalosporin계열의 항생제가 높은 감수성을 보였고 반면에 ampicillin과 aminoglycoside 계열은 감수성이 낮아지고 있음을 나타내었다. 따라서 요로감염에 경험적 초기 치료제로 ampicillin, gentamicin이 사용되고 있고 예방적인 치료제로 TMP-SMX이 권장되고 있으나 본 연구 결과에 의하면 이들 항생제의 내성률이 높게 나타나므로 요로감염의 치료에 있어 경험적 항생제 선택에 재평가가 이루어져야 한다.
Purpose: The aim of this study was to evaluate the prevalence of increased aminotransferase levels and to identify associated factors in children admitted to hospital with urinary tract infections (UTIs). Methods: The study included children with a diagnosis of UTI who were admitted to the Konyang University Hospital from January 2007 to May 2011. The total number of patients was 249 and the mean age was $15.88{\pm}28.21$ months. UTI was defined as a positive urine culture (> $10^5$/colony forming unit [CFU]) with pyrexia. Patients were treated by intravenous antibiotics, such as ampicillin/sulbactam, aminoglycoside, cephalosporins or vancomycin. Patients with neonatal jaundice or other liver disease were excluded. We investigated the relationship of aminotransferase levels with the type of antibiotic, degree of vesicoureteral reflux (VUR), and causative organisms. Results: Children with increased aminotransferase levels were younger than those with normal levels (p=0.001), but white blood cell count, platelet count, causative organisms, type of antibiotics and presence of VUR were not associated with aminotransferase levels. Aminotransferase levels became normal within 1 month after discharge without special measures, except in 1 case. Conclusion: We found that many children with UTI have abnormal aminotransferase levels. In most cases, this change is mild and self-limiting. We conclude that increased aminotransferase level increase during UTI do not require unnecessary tests and excessive treatment.
This study explored the analytical conditions for 21 veterinary antibiotics which have been popularly sold in South Korea in 2014 but have not yet been targeted in EPA method 1694. Most of the selected antibiotics were separated by a reverse-phase C18 column with a combination of (buffered) water and organic polar solvent, which was commonly methanol and acetonitrile in the gradient elution mode. Volatile additives such as formic acid, ammonium acetate and ammonium formate were usually added to the mobile phases to minimize asymmetrical and tailing of antibiotics' peaks and to increase their ionization in mass spectrometry. The analytical methods of aminoglycoside antibiotics were distinct from those of the other antibiotics in terms of adoption of ion-pair chromatography (IPC) and hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) capable of retaining and separating extremely polar compounds due to their hydrophilicity. Trifluoroacetic acid or heptafluorobutyric acid was frequently added to the mobile phase as an ion-pair reagent for the IPC. Tandem mass spectrometry was numerously applied to the detection of antibiotics using positive electrospray ionization (ESI) and the selected reaction monitoring (SRM) mode. All reviewed analytical methods had been/were validated by evaluating recovery, limits of detection and quantification, decision limit or detection capability of the methods.
Background: Clostridium difficile is the primary reason of the nosocomial diarrhea. The antimicrobial therapy plays a central role in the pathogenesis of Clostridium difficile associated diarrhea (CDAD). Although nearly all classes of antimicrobial agents have been associated with CDAD, clindamycin and the third-generation cephalosporins have traditionally been considered to the greatest risk factor. Recent studies have also implicated fluoroquinolones as high-risk agents due to increasing use of the agents. This study was to determine the incidence and the risk factors of CDAD related to the administered antibiotics and to assess the therapeutic regimen of metronidazole or vancomycin based on the C. difficile toxin assay Methods: A retrospective study was performed in patients with Clostridium difficile toxin assay at I Hospital (Incheon, South Korea) during the period from January 2007 through December 2007. Administrative, laboratory, and pharmacy data were collected from Electronic Medical Databases. Results: The analysis included 129 reported C.difficile toxin assay results, with 42 positive cases and 87 negative cases. Significant antibiotic risk factors for CDAD included the use of the fourth-generation cephalosporinse (OR=5.97, 95% CI 1.37-25.98, P=0.017). Administration of metronidazole was protective against CDAD (OR=0.30, 95% CI 0.12-0.74, P=0.009). Prolonged antimicrobial therapy has been associated with an increased risk of CDAD. The third-generation cephalosporins (OR=3.81, 95% CI 1.08-13.41, P=0.037) and aminoglycoside (OR=5.50, 95% CI 1.43-21.10, P=0.013) demonstrated greater risk for CDAD over 15 days than 8days or less days of treatment duration. Conclusions: The fourth and third generation cephalosporin, aminglycoside were the significant risk factors compared with other antibiotics, whereas metronidazole appears to be protective. The longer duration of antiobiotic use increased CDAD.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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