• 제목/요약/키워드: agar dilution method

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N-[1-(benzotriazol-1-yl)aryl]arylamine 유도체의 항균성과 정량적 구조활성 관계(QSAR) (Antifungal activity of N-[1-(benzotriazol-1-yl)aryl]arylamine derivatives and quntitative structure-activity relationships(QSAR))

  • 성낙도;김경훈;최우영;김홍기
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제35권1호
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    • pp.14-22
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    • 1992
  • 일련의 새로운 N-[1-(benzotriazol-1-yl)-X-치환-aryl]-Y-치환-arylamine 유도체를 합성하고 Pyricularia oryzae, Fusarium oxysporum f. sp. sesami, Valsa ceratosperma 및 Botrytis cinerea에 대한 항균활성$(pI_{50})$을 한천 희석법으로 측정하여 정량적인 구조-활성 관계$(QSAR_S)$를 분석한 바, X 및 Y-치환기들의 ${\pi}$${\sigma}$$M_R$ 파라미터가 항균 활성을 결정하는 중요한 요소이었다. 4-bromo 치환체(1d 및 2b)가 항균활성이 제일 큰 화합물이었으며, 중성 pH에서 1의 가수분해 반응에 대한 반감기$(T_{1/2})$는 약 1.5일 이었다. 기질 화합물의 분자궤도(MO) 함수와 항균 반응에 대한 자유에너지 관계$(LFER_S)$ 그리고 분자 설계의 결과들이 검토되었다.

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In vitro and In vivo Anti-Helicobacter pylori Activities of Centella asiatica Leaf Extract

  • Zheng, Hong-Mei;Choi, Myung-Joo;Kim, Jae Min;Lee, Kye Wan;Park, Yu Hwa;Lee, Don Haeng
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제21권3호
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    • pp.197-201
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    • 2016
  • Helicobacter pylori infection is associated with an increased risk of developing upper gastrointestinal tract diseases. However, treatment failure is a major cause of concern mainly due to possible recurrence of infection, the side effects, and resistance to antibiotics. The aim of this study was to investigate the activities of Centella asiatica leaf extract (CAE) against H. pylori both in vitro and in vivo. The minimum inhibitory concentrations (MICs) against 55 clinically isolated strains of H. pylori were tested using an agar dilution method. The MICs of CAE ranged from 0.125 mg/mL to 8 mg/mL, effectiveness in inhibiting H. pylori growth was 2 mg/mL. The anti-H. pylori effects of CAE in vivo were also examined in H. pylori-infected C57BL/6 mice. CAE was orally administrated once daily for 3 weeks at doses of 50 mg/kg and 250 mg/kg. CAE at the 50 mg/kg dose significantly reduced H. pylori colonization in mice gastric mucosa. Our study provides novel insights into the therapeutic effects of CAE against H. pylori infection, and it suggests that CAE may be useful as an alternative therapy.

Contamination of Chicken Meat with Salmonella enterica Serovar Haardt with Nalidixic Acid Resistance and Reduced Fluoroquinolone Susceptibility

  • Lee, Ki-Eun;Lee, Min-Young;Lim, Ji-Youn;Jung, Ji-Hun;Park, Yong-Ho;Lee, Yeon-Hee
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제18권11호
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    • pp.1853-1857
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    • 2008
  • Salmonella contamination in chicken meat was studied with 100 chicken meat samples purchased from 55 shops located in various regions. A total of 21 isolates of Salmonella enterica were isolated from 21 chicken meat samples from four shops located at open markets, whereas there were none from supermarkets with well-equipped cold systems. Among these, 18 isolates were identified as Salmonella enterica serotype Haardt (S. Haardt) and three isolates were S. enterica serotype Muenchen. When the minimal inhibitory concentrations of the S. Haardt isolates were assayed with the agar dilution method to determine susceptibility to ampicillin, chloramphenicol, sulfisoxazole, tetracycline, and nalidixic acid, all 18 isolates were resistant to tetracycline and nalidixic acid and nine of these were resistant to ampicillin. These isolates showed reduced susceptibility to eight fluoroquinolones including ciprofloxacin, enrofloxacin, levofloxacin, gatifloxacin, gemifloxacin, moxifloxacin, norfloxacin, and ofloxacin. When quinolone resistance determining regions of gyrA and gyrB were sequenced, every isolate had the same missense mutation Ser83$\rightarrow$Tyr (TCC$\rightarrow$+TAC) in gyrA, whereas no mutation was found in gyrB. Pulsed-field gel electrophoresis with XbaI revealed a close relationship among these isolates, suggesting a contamination of raw chicken meat with clonal spread of nalidixic acid-resistant and quinolone-reduced susceptibility S. Haardt in chickens. Results in this study show the importance of a well-equipped cold system and the prudent use of fluoroquinolone in chickens to prevent the occurrence of quinolone-resistant isolates.

Detection of Colletotrichum spp. Resistant to Benomyl by Using Molecular Techniques

  • Dalha Abdulkadir, Isa;Heung Tae, Kim
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제38권6호
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    • pp.629-636
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    • 2022
  • Colletotrichum species is known as the major causal pathogen of red pepper anthracnose in Korea and various groups of fungicides are registered for the management of the disease. However, the consistent use of fungicides has resulted in the development of resistance in many red pepper-growing areas of Korea. Effective management of the occurrence of fungicide resistance depends on constant monitoring and early detection. Thus, in this study, various methods such as agar dilution method (ADM), gene sequencing, allele-specific polymerase chain reaction (PCR), and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) were applied for the detection of benzimidazole resistance among 24 isolates of Colletotrichum acutatum s. lat. and Colletotrichum gloeosporioides s. lat. The result of the ADM showed that C. gloeosporioides s. lat. was classified into sensitive and resistant isolates to benomyl while C. acutatum s. lat. was insensitive at ≥1 ㎍/ml of benomyl. The sequence analysis of the β-tubulin gene showed the presence of a single nucleotide mutation at the 198th amino acid position of five isolates (16CACY14, 16CAYY19, 15HN5, 15KJ1, and 16CAYY7) of C. gloeosporioides s. lat. Allele-specific PCR and PCR-RFLP were used to detect point mutation at 198th amino acid position and this was done within a day unlike ADM which usually takes more than one week and thus saving time and resources that are essential in the fungicide resistance management in the field. Therefore, the molecular techniques established in this study can warrant early detection of benzimidazole fungicide resistance for the adoption of management strategies that can prevent yield losses among farmers.

인삼 잿빛곰팡이병균의 procymidone에 대한 감수성 변화와 carbendazim/diethofencarb 합제와의 다중 저항성 (Monitoring for the Resistance of Botrytis cinerea Causing Gingseng Gray Mold to Procymidone and Its Multiple resistance with the Mixture of Carbendazim/Diethofencarb)

  • 이선욱;김주형;민지영;배영석;김흥태
    • 식물병연구
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    • 제13권3호
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    • pp.170-176
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    • 2007
  • 인삼의 잎에서 발생한 잿빛곰팡이병의 병반으로부터 병원균인 Botrytis cinerea의 224개 균주를 단포자 분리하여 실험에 사용하였다. 분리한 B. cinerea는 한천희석법을 사용하여 procymidone, carbendazim, carbendazim과 diethofencarb 합제의 균사생장 억제 효과를 $EC_{50}$(균사생장을 50% 억제하는 농도)과 MIC(균사생장을 100% 억제하는 최소농도) 값을 조사하였다. Procymidone에 대한 MIC값을 가지고서 병원균을 분류하면 0.8과 $4.0{\mu}g/ml$ 사이에 속하는 그룹과 $20{\mu}g/ml$ 이상인 그룹으로 크게 분류할 수 있었다. 2005년에 분리한 균주들은 지역별로 procymidone에 대한 감수성의 변화가 매우 다양하게 나타났다. 실험에 사용한 procymidone의 각각의 농도에 대한 균사 생장 억제 양상을 가지고 병원균을 각각 감수성($EC_{50}$ 값이 $2.0{\mu}g/ml$ 이하), 중도저항성($EC_{50}$ 값이 2.0과 $5.0{\mu}g/ml$ 사이), 저항성($EC_{50}$ 값이 $5.0{\mu}g/ml$ 이상) 등의 3개의 그룹으로 분류할 수 있었다. 이 기준으로 분류하였을 때, procymidone에 대해서 저항성인 B. cinerea의 비율은 2005년에 19.3%가 2006년에는 27.5%로 상승하였으며, 저항성 그룹의 평균 $EC_{50}$ 값도 $10.0{\mu}g/ml$에서 $237.3{\mu}g/ml$으로 상승하였다. Procymidone과 carbendazim의 경우에 다중저항성을 보이는 균주는 90개로 전체의 40.2%이었으며, 합제와의 다중저항성을 보이는 균주는 9개 밖에 없었다.

감염근관에서 분리 배양한 세균의 수종 항생제에 대한 감수성 조사 (Antibiotic Susceptibility of Bacteria Isolated from Infected Root Canals)

  • 임상수;김미광;민정범;김민정;박순낭;황호길;국중기
    • 미생물학회지
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    • 제42권3호
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    • pp.185-194
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    • 2006
  • 본 연구는 치근관 감염병소에서 세균을 분리 및 동정하고, 8종의 항생제들에 대한 분리균주들의 감수성을 조사하기 위하여 실시하였다. 세균에 감염된 27개 치아의 괴사된 치근부 치부소직을 바비드 브로치나 페이퍼 포인트로 무균적으로 채취하였다. 치수가 채취된 부위의 바비드 브로치와 페이퍼 포인트를 500 ul의 $1{\times}PBS$ 용액에 담아 잘 혼합하고, 이를 5% 양혈이 포함된 BHI 한천배지(혈액한천배지)에 도말하여 $37^{\circ}C$ 혐기성 배양기에서 2-5일 동안 배양하였다. 혈액한천배지에서 자라난 세균은 16S rRNA 유전자(rDNA) 염기서열결정법을 이용하여 종수준으로 동정하였다. 이들 균주들의 8종 항상제에 대한 감수성은 최소성장억제농도 측정법으로 조사하였다. 본 연구결과, 101개의 세균 집락이 생겼고, Streptococcus spp. (29.7%)와 Actinomyces spp. (21.8%)가 가장 많이 검출되었다. 이들 균주들 중 9균주는 실험 도중 소실되거나 액체배지에 자라지 않아서 항생제 감수성 심험에서는 제외되었다. 각 항생제들에 대한 감수성을 조사한 결과, 분리된 균주들 중 80(87.0%) 균주가 클린다마이신에 감수성을 보였으며, 세프록심 아세틸과 테트라사이클린에 69(75.0%)가, 오그멘틴에 66(71.7%) 균주가, 페니실린 G에 63(68.5%) 균주가, 에리트로마이신에 61(66.3%) 균주가, 아목시실린에 41(44.6%) 균주가 감수성을 보였다. 그러나 시플록사신에는 29(31.5%) 균주만이 감수성을 보였다. 이러한 8종 항생제에 대한 균주들의 감수성 양상은 세균 종의 종류보다는 분리된 숙주에 따라 차이가 있었다. 이러한 결과는 치근관 감염질환의 치료에 항생제가 필요할 경우 항생제 감수성검사를 병행하는 것이 효과적임을 시사한다.

Mepanipyrim에 대한 잿빛곰팡이병균의 저항성 검정 (Monitoring for the Resistance of Botrytis cinerea Causing Gray Mold Against Mepanipyrim)

  • 김아형;김선보;한기돈;김흥태
    • 농약과학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.329-334
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    • 2015
  • 병든 토마토, 딸기, 오이 등의 열매에서 분리한 86개의 Botrytis cinerea의 균주를 가지고 한천희석법을 통하여 mepanipyrim의 균사생장 억제효과를 조사하였으며, $EC_{50}$값을 계산하여 저항성 모니터링을 실시하였다. 병원균의 저항성 모니터링을 PDA 배지에서 실시할 경우 mepanipyrim의 균사생장 억제효과를 정확하게 검정할 수 없었으나, FGA 배지를 사용하였을 때에는 감수성과 저항성 반응을 뚜렷하게 구분할 수 있었다. 실험에 사용한 B. cinerea의 86개 균주를 $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$$EC_{50}$값을 가지고 감수성과 저항성을 구분하였으며, 전체 균주 중에서 20개인 23.3%가 저항성균으로 분류되었다. 지역에 따라서 저항성균의 분리비에는 차이가 있었는데, 경기, 경남/부산, 그리고 충남에서 각각 분리한 균주 중에서 저항성균의 비율은 28.6, 33.3, 12.8%로, 경남/부산 지역에서 가장 높았다. Mepanipyrim에 대한 저항성균은 pyrimethanil에 대해서도 교차저항성을 보였으며, 오이 자엽에 대한 병원성을 감수성 균주와 비교해 보아도 전혀 떨어지지 않았다. 따라서 포장에서 anilinopyrimidine계 살균제를 효과적으로 사용하기 위해서 적극적인 관리가 필요한 상태이다.

Group B β-hemolytic Streptococcus에 의한 소아 감염증의 임상상 (Clinical Features of Group B β-hemolytic Streptococcal Infection in Infants and Children)

  • 김윤경;곽영호;김예진;정혜선;홍정연;이환종
    • Pediatric Infection and Vaccine
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    • 제6권2호
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    • pp.194-202
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    • 1999
  • 목 적 : 이전까지는 국내에서 발생 증례가 적었던 GBS 감염증이 최근에는 자주 접하게 되었다. 이에 최근 수년간의 발생 증례에 대한 고찰을 하여 그 임상적, 역학적 특성을 고찰하고자 하였다. 방 법 : 1985년 6월부터 1999년 6월까지 서울대학교 병원 소아과에서 균이 증명된 GBS 감염증 환아들을 대상으로 하였다. 이들의 의무 기록을 후향적으로 검토하였고, 분려된 일부 균주의 혈청형과 항균제 감수성을 경시하였다. 결 과 : 기간 별 증례 수를 비교해 보면, 1990년대 후반에 그 이전보다 증례가 많았다. 총 27례중 25례가 신생아 감염증이었고, 지발형이면서 뇌막염인 증례가 많았다. 혈청형은 III(6균주), Ib(6), Ia(1)와 II(1)였다. 검사된 10개의 항균제에 대하여 모든 균주가 감수성을 보였다. 결 론 : 국내에서 신생아 GBS 감염증은 증가하고 있는 추세이므로, 신생아 패혈증 또는 뇌막염의 원인균으로서 GBS의 가능성을 고려하여야 하며, 향후 빈도가 더욱 증가하면 산모에게 산전 검사와 예방적 항생제 요법 등을 고려해야 할 것으로 사료된다.

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전나무 정유의 항진균 효과와 유효성분의 시너지효과 평가 (Evaluation on Anti-fungal Activity and Synergy Effects of Essential Oil and Their Constituents from Abies holophylla)

  • 김선홍;이수연;조성민;홍창영;박미진;최인규
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제44권1호
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    • pp.113-123
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    • 2016
  • 본 연구는 전나무 정유의 Epidermophyton floccosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum과 같은 피부사상균에 대한 항진균 활성을 구명하고 피부염 치료제로서의 전나무 정유의 잠재력을 평가하고자 하였다. 전나무 정유와 분획물, 유효성분의 표준시약을 이용하여 한천희석법, paper disc 확산법, TEM을 이용한 세포 변화 관찰 등을 통해 항진균 활성을 평가하였고, 주성분은 GC-MS로 분석하였다. 유효성분들의 시너지효과는 체커보드법을 통해 평가하였다. 그 결과, 가장 높은 활성을 나타낸 물질은 ${\alpha}$-bisabolol을 함유하고 있는 분획 G4였으며 다른 분획 보다 뛰어나게 높은 활성을 나타냈다. 체커보드법을 통해 ${\alpha}$-bisabolol과 bornyl acetate를 병용시 뛰어난시너지 효과를 나타냈고 세포 변화 관찰을 통해 분획 G4에 노출된 E. floccosum과 T. rubrum 균사는 정상세포와 달리 세포막과 세포소기관이 파괴됨이 관찰되었다. 따라서 전나무 정유와 그 구성성분들은 높은 항진균 효과를 가지고 있기 때문에 피부염 치료제의 원료로 이용이 가능할 것이라 기대되며, 특히 ${\alpha}$-bisabolol의 우수한 항진균 활성에 주목할 필요가 있다고 사료된다.

새로운 N-치환 benzotriazol-1-yl유도체의 항균활성에 미치는 치환기 효과 (Substituent Effect on the Fungicidal Activity of New N-substituted Benzotriazol-1-yl Derivatives)

  • 유성재;성민규;김대황;성낙도
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제40권1호
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    • pp.80-84
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    • 1997
  • 일련의 새로이 합성된 chira핀 N-치환 benzotriazol-1-yl유도체들의 구조와 잿빛 곰광이균(Botrytis cinerea), 배 검은 무늬병균(Alternaria kikchiana) 및 고추 역병균(Phytophthora capsici) 등 3종의 곰광이균류에 대한 항균활성에 미치는 치환기의 효과를 검토한 결과, 전자끌게(${\sigma}_I$,Y>0)로써 phenoxy 또는 thiophenoxy group(X) 보다는 alkyl또는 phenyl group(Y)이 더 큰 영향을 미쳤으며 phenoxy-치환체, 1이 thiophenoxy-치환체, 2보다 높은 항균활성을 나타내었다. 항균활성에 영향을 미치는 요인으로는 소수성(${\Sigma}logP$)과 유도효과(${\sigma}_I$,Y) 및 Van der Waals(${\Sigma}Vw$) 체적(${\AA}^3$) 등 이었으며 chiral성은 활성개선에 기여하지 못하였으나 tribromomethyl-치환체, 1g는 제일 큰 활성을 나타내는 화합물이었다.

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