Ra, Do Kyung;Choi, Jae Yeon;Lee, Ju Ho;Nam, Ji Hyun;Lee, Jeoung Gu;Lee, Sung Mo
한국동물위생학회지
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제42권3호
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pp.127-133
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2019
The purpose of this study was to investigate the contamination level of representative mycotoxins that have adverse effects on livestock by using LC-MS/MS method and to utilize the results as basic data for the establishment of quality control system for feed, and to provide information on production and storage. A total of nine mycotoxins, including aflatoxin $B_1$, aflatoxin $B_2$, aflatoxin $G_1$, aflatoxin $G_2$, ochratoxin A, fumonisin $B_1$, fumonisin $B_2$, deoxynivalenol (DON), zearalenone (ZEN) were simultaneously analyzed in LC-MS/MS under ESI positive mode. Fumonisin $B_1$ and fumonisin $B_2$ were detected from 3 cases of 75 forage produced in Incheon area, the detection rate was 4.0%. The detection concentration was 0.01~0.02 mg/kg, which was lower than the domestic recommended limit. Fumonisins were detected in a slightly different manner from the results of mycotoxin studies reported in Korea, which is attributed to the high temperature and dry summer weather of the year. The result of LC-MS/MS method performance of 9 mycotoxins, the recovery of DON was quite low as $41.53{\pm}3.91%$ that is not suitable for simultaneous analysis. This is probably due to that the extract solution used in this study was not suitable for the extraction of DON, along with the characteristics of a very dry forage. For the study of mycotoxins in Incheon area forage for the first time, further investigation is needed for the safe supply of livestock products.
An attempt has been made to investigate the possible occurrence of aflatoxins, a group of micotoxin which are toxic metabolites produced by Aspergillus flavus, and aflatoxin like substances in fungal fermented soybean products such as meju and soybean paste. Chloroform extracts from 15 samples which has been defated with petroleum ether are subjected to separations with thin-layer chromatography on silica gel washed with methanol prior to film coating, improves the chromatographic separation and ultraviolet absorption spectral identification. In addition to fluorescencing spot having an Rf value which is same as aflatoxin $B_1$, many of the fluorescencing spots have been occurred in every sample examined. Each fluorescencing spot is scratched and the ethanol extracts are subjected to further separation with thin-layer chromatography. Each fluorescence substance is eluted with ultra violet transparent absolute ethanol and the ultraviolet absorption spectra are checked. None of the absorption curve of eluates shsow accordance with the curve of aflatoxin. 2, 4-Dinitrophenyl hydrazine reagent, Tollen's reagent and ninhydrin reagent are applied on the chromatogram- The data show that aflatoxin is not present in any of the fungal preparations examined.
The ability of chemicals, 10% sodium hypochlorite, 28% ammonium hydroxide, 5% sodium hydroxide, 5% sodium bicarbonate, 0.1% hydrochloric acid, 5% hydrogen peroxide, and 5% acetone, to destroy aflatoxins in laboratory waste water containing 3.26 ppb of B$_{1}$ 7.64 ppb of B$_{6}$3 ppb of G$_{1}$, and 11.39 ppb of G$_{2}$ with the total of 29.11 ppb was investigated. High performance liquid chromatograph (HPLC) was used for the separation and quantitation of aflatoxins. Treatment for 2 hours by the chemicals affected the destruction of aflatoxins and the most effective chemical was 10% sodium hypochlorite (p<0.05). Sodium hypochlorite concentrations more than 1% significantly reduced aflatoxin B$_{2}$, G$_{1}$, G$_{2}$ and total aflatoxins and more than 3% reduced B$_{1}$ (p<0.05). No further significant decreases were observed above the concentration of 5% for all 4 aflatoxins. Complete destruction of aflatoxins B$_{2}$, G_{1}$, and G$_{2}$ was achieved by 5% sodium hypochlorite at 48 hours and B$_{1}$ at 72 hours.
동치미에서 분리한 유산균인 Leu. mesenteroides subsp.cremoris DLAB19 균주의 aflatoxin Bl에 대한 항 돌연변이원성 물질 생산을 위한 최적 조건을 조사한 결과, 탄소원으로 glucose를 첨가시 가장 높은 항 돌연변이 효과를 나타내었으며, 질소원으로서는 yeast extract 첨가시 항 돌연변이 효과가 우수하였다. 탄소원으로 glucose의 농도을 2$\%$ 첨가시aflatoxin Bl에 대한 항 돌연변이 효과가 가장 우수하였으며,질소원으로서 yeast extract 1$\%$ 첨가시 가장 우수한 항 돌연변이 효과를 나타내었다. 항 돌연변이원성 물질 생산을 위한 최적 배양 조건은 초기 pH, 배양 온도, 진탕 속도가 각각 7.0, 30$^{\circ}C$ 및 150 rpm이었다. 상기의 최적 조건에서 36시간 배양시 가장 높은 항 돌연변이 효과를 나타내었는데 S. enterica serovar Typhimurim TA100과 TA98을 이용한 경우항 돌연변이 효과가 87.11$\%$와 75.04$\%$이었다.
Strains of Aspergillus flavus produced aflatoxin $B_1$ was found in the corns for eed and cultured them in the incubator. The aflatoxin $B_1$ was produced from the Aspergilli and intubated into the pharynx of the ducklings for the to
Two Rice cultivars , a high yield variety of Cheongcheong and a Korea native kind of Chucheong were grown in paddy. 1$\mu\textrm{g}$ and 10$\mu\textrm{g}$ of aflatoxin B1 and Aspergillus flavus (106 conidia/ml) were inoculated at milk stage. At harvest, kernels from the inoculated plant showed slightly lower ripening rates and 100-grain weight than did those of controls. The nutrient and fatty acid composition of unpolished rice of inoculated group were similar to those of controls and difference between the control and inoculated group were not significantly different.
An immunochromatography (ICG) strip test using a nanocolloidal gold-antibody probe was developed and optimized for the rapid detection of aflatoxin B1 (AFB1). A monoclonal antibody specific to AFB1 was produced from the cloned hybridoma cell (AF78), coupled with nanocolloidal gold, and distributed on the conjugate pad of the ICG strip test. The visual detection limit of the ICG strip test was 0.5 ng/ml, and this method showed a cross-reaction to aflatoxin B2, G1, and G2. In total, 172 grain and feed samples were collected and analyzed by both the ICG strip test and HPLC. The results of the ICG strip test showed a good agreement with those obtained by HPLC. These results indicated that the ICG strip test has a potential use as a rapid and cost-effective screening tool for the determination of AFB1 in real samples and could be applied to the preliminary screening of mycotoxin in food and agricultural products, generating results within 15 min without complicated steps.
Chitosan이 항돌연변이 활성을 나타내는 분자량 범위를 알아보기 위해, chitosan 가수분해물의 3-amino-1methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole(Trp-P-2), aflatoxin $B_1$, 2-nitrofluorene 및 4-nitroquinoline oxide에 대한 억제활성을 Salmonella typhimurium reversion assay와 SOS chromotes로 조하였다. Chitosan을 산가수분해한 후 한외여과하여 6가지 fraction를(분가량 1,000 이하, $1,000{\sim}3,000,\;3,000{\sim}10,000,\;10,000{\sim}30,000,\;30,000{\sim}100,000$, 100,000 이상)의 chitosan 가수분해물을 제조하였다. 제조된 각 fraction의 탈아세틸화도는 큰 차이가 없었으며, 시료 자체의 pH가 복귀 돌연변이수와 SOS 유도 반응에 미치는 영향은 없는 것으로 나타났다. 얻어진 fraction별로 Salmonella typhimurium reversion assay를 실시한 결과, Trp-P-2에 대한 항돌연변이 활성은 fraction 6의 5% 농도에서 78%, aflatoxin $B_1$에 대해서는 fraction 5의 10% 농도에서 92%, 그리고 2-nitrofluorene에 대해서는 fraction 6의 5% 농도에서 51%의 최고 활성을 나타냈다. 한편 SOS chromotest에서는 Trp-P-2에 대하여 $0{\sim}54%$, 4-nitroquinoline oxide에 대하여 $0{\sim}77%$의 억제 활성을 나타냈다.
원유중의 아플라톡신 M1의 오염도를 측정한 결과, 일부 지역 원유 중, 일반수준으로 관리한 지역의 집합유, HACCP으로 지정되어 관리되는 농가의 집합유, 아플라톡신 M1 저감화 배합사료를 제공한 지역의 집합유를 검체로 하여 1년간 아플라톡신 M1의 수준을 모니터링을 실시한 결과, 일반적인 관리를 통해 집유된 집합유의 평균검출농도는 0.023±0.005 μg/l, HACCP 지정관리를 통해 집유된 집합유의 평균검출농도는 0.017±0.004 μg/l 그리고 저감화배합사료 제공을 통해 집유된 집합유의 평균검출농도는 0.013±0.003 μg/l으로 나타났다. 이러한 결과는 3개 지역 모두 한국이나 미국 그리고 유럽에서 정한 아플라톡신 M1의 기준치 이하로 검출되었으며, 저감화 배합사료를 제공한 농가의 아플라톡신 M1수준이 가장 적게 검출되었다. 아플라톡신 M1의 특성으로서 사료공급상태에 따른 평균검출농도가 계절별로 차이가 나는 경향을 보이며, 3가지 실험군에서 공통적으로 여름철에 비해 겨울철 아플라톡신 M1 수준이 가장 높게 검출되었다. 이는 겨울철 사료의 관리미흡과 더불어 사료 보관기간이 늘어나며 일반배합사료의 섭취량이 증가되고 장기화됨에 따라, 젖소에서의 아플라톡신 B1의 양이 농축되어 결과적으로 아플라톡신 M1 수준이 증가된 것으로 판단된다. 아플라톡신 M1의 수준을 낮출 수 있는 가장 직접적인 방법으로는 곰팡이 독소를 흡착하게 하는 배합사료를 공급하여 원유로 아플라톡신 M1이 전이되지 못하도록 하는 것으로써 일반수준으로 관리한 농가의 집합유에 비해 아플라톡신 M1의 수준이 감소하는 경향을 보였다. 효율적이고 경제적인 측면을 고려하여 아플라톡신 M1의 수준을 낮출 수 있는 가장 효과적인 방안은 HACCP 지정관리를 통한 농가 및 사료의 관리라 할 수 있다. 또한 보다 실질적인 아플라톡신 M1의 수준을 감소시키기 위해서는 정부의 제도적인 지원과 낙농업계의 관리 및 농가의 철저한 위생관리가 필요하다고 사료된다.
고시된 아플라톡신 시험법의 정량한계, 검출한계를 개선한 분석법을 유효화하였으며, 개선한 분석법으로 강활, 개자 등의 생약 400개의 시료를 분석하였다. 사군자와 제니 각 1건에서 아플라톡신 $B_1$이 각 $2.3\;{\mu}g$/kg 검출되었으며, 사군자와 대풍자 1건에서 정량한계 미만의 아플라톡신이 검출되었다. 탕제로의 이행률은 아플라톡신 $B_1$의 경우 약 20% 정도의 이행률을 나타냈다. 아플라톡신 $B_1$ 기준치보다 낮게 검출되어 현재까지는 아플라톡신으로부터 안전한 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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