This study was carried out to establish improved techniques on organogenesis from callus culture of Gladiolus. Organogenesis from the callus was effective in the half strength of MS solid medium without 2,4-D at 15 $^{\circ}C$ under 24 hours of daylength. Formation of adventitious root was most effective in the liquid shaking culture, and adventitious shoot induction was effective in the liquid stationary culture. From these results, we could find optimal culture conditions for redifferentiation from callus, in addition, liquid shaking culture revealed as more useful when compared with that of solid culture method for the redifferentiation of callus in Gladiolus `Topaz'.
Jo, Man-Hyun;Ham, In-Ki;Lee, Bong-Chun;Kim, Jae-Whune;Lee, Won-Seok;Kwon, Suk-Yoon;Lee, Haeng-Soon;Kwak, Sang-Soo
Journal of Plant Biotechnology
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v.31
no.3
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pp.203-207
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2004
To establish high frequency shoot formation from two cultivars (Cheongyangjaerae and Myungan) of boxthorn (Lycium chinense Mill.), hypocotyl segments with cotyledons from seedlings were used as explants. High frequency adventitious shoot formation (more than 80%) were obtained from hypocotyl segments with cotyledon on MS medium supplemented with 1.0 mg/L zeatin, when precultured for 3 weeks under dark conditions followed by transfer to light conditions. But there was no shoot induction in the explants cultured without preculture under dark conditions. Roots were induced from the shoots when transferred to rooting medium supplemented with 1.0 mg/L IAA for 4 weeks. Regenerated plantlets were grown to normal mature plants in soil.
Robinia pseudoacacia var. umbraculifera, commonly called umbrella black locust were regenerated after co-cultivation of internode segments with Agrobacterium tumefaciens which included yeast cadmium factor 1 (YCF 1) gene. The tolerance to cadmium and lead for plants can be increased by the YCF1 gene expression. Moreover, the recent studies have shown that YCF1 gene transgenic plants increase the accumulation of cadmium and lead into plant vacuoles. The effect of plant growth regulator such as 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid (NAA), 6-benzyladenine (BA), and thidiazuron (TDZ) were studied to evaluate the propagation of plants through internode explants. The efficient induction of multiple adventitious shoots and callus were observed on a medium supplemented with 0.1 mg/L TDZ + 0.2 mg/L BA. To induce shoot elongation and rooting, regenerated shoots were transferred into basal MS medium without any plant growth regulator. Successful Agrobacterium tumefaciens mediated transformation was obtained by 20 min vacuum-infiltration with $50{\mu}M$ acetosyringone on the optimal multiple shoot induction medium with 30 mg/L hygromycin and 300 mg/L cefotaxime. To confirm the integration and expression of transgene, Polymerase Chain Reaction (PCR) and Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR) were performed with specific primers. The frequency of transformation was approximately 18.94%. This study can be used to genetic engineering of phytoremediator.
Iris koreana (Iridaceae) is an endangered plant native to Korea. In order to develop an in vitro propagation method, we investigated the effect of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and a-naphthalene acetic acid (NAA) on callus induction in different I. koreana tissues. In addition, we also investigated the effect of 2,4-D and Benzyl aminopurine (BA) treatments on adventitious shoot induction in viable calli and the effect of indole-3-butyric acid (IBA) on root formation in viable shoots. We found that callus production was highest with 1.0 mg/L NAA (94.4% cultured rhizome explants), and adding low concentrations of 2,4-D to BA containing media significantly increased the frequency of shoot primordial formation. The best rooting results were obtained with 1.0 mg/L IBA, on which 98% of regenerated shoots developed roots and produced an average of 7.4 roots within 45 days. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation, as well as for mass propagation.
Adventitious shoots were induced from cambial tissue cultures of 3-year-old seedlings using BLG mineral salts medium supplemented with 10 mM glutamine and 30 mM sucrose. The optimum growth regulator level for bud induction was 4,5 $\mu$M BA which produced average 25.5 shoots per cambium segment. Induced buds were elongated on GD medium supplemented with 30 mM sucrose followed by LMG medium supplemented with 30 mM sucrose for further shoot elongation. Elongated shoots were rooted on half-strength GD medium containing $0.54 ;\mu\textrm{M}$ NAA with the frequency of 20%. This system proved the high morphogenic potential of cambial tissue in larch.
Kim, Kwang-Soo;Hwang, Sung-Jin;Pyo, Byoung-Sik;Kim, Sun-Min
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.3
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pp.105-108
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2005
Culture conditions for plant regeneration of Camellia japonica were achieved by organogenesis in explants of cotyledon. Seed cotyledons were cultured on MS medium containing various auxin, 2,4-D or NAA and cytokinins BA. The adventitious shoot buds were efficiently formed without embryogenesis on the basal region of cotyledon cultured on MS medium supplemented with $0.1\;{\mu}g/m{\ell}$ 2.4-D and $1\;{\mu}g/m{\ell}$ BA. Seed cotyledons could be used as a source of explants in experiments of genetic transformation of the genotypes evaluated for improving the efficiency of production of transgenic Camellia plants.
The maize mitochondrial mutant (NCS2) is derived from homologous recombination between genes encoding NADH dehydrogenase subunit 4 and subunit 6. Plants from mitochondria mutants exhibited severe related growth and development including dwarfism and striping on the leaves. Aborted embryos from NCS2 mutants have been rescued and cultured on the N6 medium supplemented with 2,4-D 1 mg/l. Most calli from NCS2 aborted embryos showed slow growing pattern at first stage. However, upon continuous culturing them on the medium, those were segregated into mutant and normal callus lines. These segregations could be detected by using PCR method with three primers. Such segregation seems to be resulted from the preferential growth of normal cells over the mutant cells on the normal culture condition. Therefore, this method can be used for determining rate of indirect cytoplasmic segregation by estimating amplified band intensities. When NCS2 mutant callus lines cultured on regeneration medium, no adventitious shoot induction was observed. However, callus lines with more mitochondria induced adventitious shoots. These studies suggest that mitochondria NADH-dehydrogenase for electron transport in the inner membrane of mitochondria is essential for the differentiation and development of plants.
Park, Hyae-Jeong;Ahn, Young-Sup;Jeong, Byeong-Choon;Park, Hyeon-Yong
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.3
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pp.245-249
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2003
This study was carried out to establish a regeneration system from leaf explant of purple sweetpotato(Ipomoea batatas L.) The optimal concentrations of plant growth regulators for callus induction and shoot formation were determined. The optimal combination for callus formation was 1$\mu$M 2,4-D 5$\mu$M BM, and highest yield of embryogenic calli were observed on Murashige and Skoog basal medium containing 0.5$\mu$M 2,4-D under light condition after 4weeks of culture. Embryogenec callus was subcultured on medium supplemented with 5$\mu$M ABA for 4 days. Subsequently, regeneration of adventitious shoots occurred when these embryogenic calli were transferred onto medium with 3∼6$\mu$M gibberellic acid. Regenerated shoots were developed into normal plantlets.
In order to investigate the effect of plant growth regulators on effective in vitro micropropagation, apical meristems of Pulsatilla cernua var. koreana were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium with 2,4-D, NAA, TDZ and BA. Media containing 2,4-D and kinetin, 2,4-D and TDZ, NAA and TDZ were not effective on callus induction. However, embryogenic or organogenic callus was obtained on media containing NAA and BA. Especially, on MS medium with 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA was optimal for a high frequency (62%) of shoot or shoot bud obtained from callus. Callus proliferation, shoot multiplication and elongation were significantly increased by adding 10% coconut water on MS media with 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA. Repeated subculturing of in vitro grown shoots resulted in propagation rate of 12.9 shoots per explant every 30 days. Root formation from the adventitious shoots was not easily achieved. However, roots were only produced through callus on MS medium with 2.0mg/L NAA alone or 0.5mg/L NAA and 1.0mg/L BA. These roots were used materials for callus and shoot production repetitively.
To establish the system of in vitro plant regeneration, the different explants (stem with axillary bud and stem without axillary bud) of Hylotelephium ussuriense were cultured on the Murashige and Skoog's medium containing 6-benzylaminopurine (BA) and indolebutyric acid (IBA). The adventitious shoot induction was more effective in the stem with axillary bud explants than the stem without axillary bud explants, and was the best on MS medium containing 3.0 mg/L BA and 0.01 mg/L IBA. Frequency of plantlet growth was not significantly treated on MS and sucrose. Total chlorophyll contents under ventilation treatment were higher than those in control (non-ventilation). This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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