Newcastle disease virus (NDV) Kr005/V strain was generated through 55 serial passages of NDV Kr005 strain in Vero cells. The Kr005/V virus yielded high infective titers of $10^{7.8}$$TCID_{50}/mL$ in Vero cells and the infected cells showed cytopathic effects such as marked cell rounding, though less frequent syncytia. The Kr005/V virus was heat-stable and classified into the lentogenic type with a Mean Death Time (MDT) of 120h or greater while the Kr005 strain was heat-labile and velogenic (MDT of 49.6 h). Only the single amino acid substitution (T to S) was observed at position 433 of the HN protein of the Kr005/V strain, whereas no amino acid change was found in the F protein. The Kr005/V input virus correlated well (correlation coefficient $r^2$=0.97) with the Kr005 virus when ten field sera were tested by virus neutralization test. The biological properties and usefulness of Vero cell-adapted Kr005/V virus were discussed.
Canine distemper virus (CDV), canine adenovirus type 2 (CAV-2), canine parvovirus (CPV), and canine parainfluenza virus 5 (CPIV-5) are the major viral pathogens in dogs. Despite the availability of vaccines for dogs against these 4 viral pathogens, investigations of antibodies against these pathogens have rarely been reported in South Korea. In this study, we investigated the recent incidence of viral diseases in dogs and conducted sero-surveillance for CDV, CAV-2, CPV, and CPIV-5 in Korean dogs. The most frequently diagnosed canine viral disease in Korean dog samples from 2000 to 2022 was CPV infection, which accounted for 48.7% (464/953) of the cases. A total of 400 dog serum samples collected between 2019 and 2022 were screened for the presence of virus-neutralizing antibodies against CDV, CAV-2, CPV, and CPIV-5. The overall seropositivity rates for CDV, CAV-2, CPV, and CPIV-5 were 83.8%, 77.8%, 99.3%, and 82.0%, respectively. The protection rate against CPV was the highest (98.3%) and that against CAV-2 was the lowest (44.8%) in dog sera. Male and female dogs showed no significant differences in seropositivity rates. CDV and CPIV-5 seropositivity increased with age in dogs, and the highest incidence and seropositivity rates of CPV indicated that Korean dogs have been continuously exposed to wild CPV, and that CPV is a pathogen that urgently requires attention among canine viral diseases.
In vitro elimination of Sweet potato leaf curl virus (SPLCV) from infected sweet potato is difficult due to low number of virus-free plants obtained from meristem tip culture and long growth period required for the virus detection. In this study, efficient production of the SPLCV-free sweet potato by in vitro therapy coupled with a PCR assay for virus detection was investigated. Infected shoots cultured on Murashige and Skoog medium were treated at three different temperatures for 7 weeks followed by meristem tip culture on the medium with or without ribavirin at 50 mg/L. The regenerated plantlets were tested for virus infection by a PCR assay. The results showed that the both heat- and cold-treatments, and addition of the ribavirin did not have significant effect on efficiency of the virus elimination. The meristem size, however, greatly affected the survival rate. Meristems sized over 0.4 mm survived better than smaller ones (0.2-0.3 mm). The PCR assay was approved to be a rapid, sensitive and reliable for the SPLCV detection in regenerated plantlets. Therefore, combination of cultivating meristem tips sized 0.4-0.5 mm on the medium at $22^{\circ}C$ without ribavirin and detection of SPLCV in the regenerated plantlets by the PCR assay was an efficient system for the SPLCV elimination from infected sweet potato.
Since the peculiar virus disease of chinese date tree (Zizyphus jujuba Mill. var. inermis Rehd.) has been noted in South Korea around 1950, 70% to 80% of the economically important trees have been either completely destroyed or infected with the virus, severe damage has been noted, particularly, across the area ranged from middle east to the middle part of Korea, including Seoul area. Yoon-Koock-Byung in 1958 first reported the disease and descirbed it might be caused by a kinds of yellows. But he did not conform in his paper that the disease is pecisely caused by yellows virus. The authors, hereby intend to identify the true cause of the desease of the chinese data tree by studying the external symptoms of the disease and the internal morphological characteristics of the diseaset plant which shows various abnormalities in contrast to the healthy checks. In view of fact that leaves of the infected plants become yellowish in color similar to the peach yellows, aster yellows, it is likely to be identifiable as the common yellows. Furthermore, the abnormal characteristics observed by the authors are as follow: The floral organs such as petals, sepals, stamens, and pistil turn into vegetative leaves, the leaves on heavily infected plant appear as small sized one and also showing as a common witch's broom like symptom. There are also an occuring of numerous advantitious shoots developed from both of stems and roots. The amount of photosynthetic starch grains increases in parenchymatous cells, necrosis takes place in mesophyll, Particularly, Palisade Parenchyma in the leaves of infected plants are distinguished in contrast to the healthy checks. From the symptoms and the present experimetns described above, the authors are believed that the disease of chinese data tree is not caused by the yellows. It appears the disease is rather similar to the symptoms of sandal spike virus which was noted in India early in this centry. But the host plant of standal disease, Santalum albun L. and the insect vector, Jassus indicus Wal., have never been reported in Korean flora and the founa. The termperature and the otehr environmental factors is quite different Korea and India. Thus the authors believe that the peculiar disease must be an endemic new virus origin in Korea and must be called as "shoot cluster disease of chinese date tree."
A new sudden death in rabbits appeared in China and Korea in 1984 and 1985, respectively, and was recognized to be an acute infectious disease caused by a virus. The disease was reported as a "new viral disease," and thereafter, a tentative name of "viral hemorrhagic disease", "hemorrhagic pneumonia" or "viral hemorrhagic pneumonia" has been described in the case reports. But authors had called the viral disease "rabbit viral hepatitis" due to picornavirus infection, because the principal lesion of the disease was an acute hepatitis. The purpose of this report is to describe the electron microscopic findings on the livers in experimentally infected rabbits. All the livers of the affected rabbits were shown to have degenerative changes of a type that is characteristic of acute hepatitis. In the liver cells, there were dilation of rER and mitochondria, vacuole formation of various sizes, and appearances of many virus-like particles in the vicinity of rER, granular bodies and crystalline arrays of viral particles in the cytoplasm with necrotic changes of the nucleus. Clusters of virus-like particles and viral crystals appeared in the cytoplasm of sinusoid endothelial cells and Kupffer's cells with morphological changes of organelles. Also viral crystals were demonstrated in the cytoplasm of macrophages among the liver cells. On the whole, the liver cells had many virus-like particles and a few crystalline arrays of viral particles. Therefore, this implies that the liver cells are the main site of the viral replication in inducing the viremia. It was concluded that the liver was the primary target organ of this viral disease, and the pathological and the ultrastructural evidence suggest that the virus may be belong to genus enterovirus.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.31
no.2
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pp.70-74
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2015
The current market size of insect industry in Korea is estimated at 300 million dollars and more than 500 local farms are related to many insect industry. One of the strong candidates for insect industry is Korean horn beetle, Allomyrina dichotoma. Early this year, we reported a viral disease extremely fatal to A. dichotoma larvae. While we were proceeding a nationwide investigation of this disease, it was informed that similar disease symptom has been occurred occasionally during past over 10 years. The symptom can be easily confused with early stage of bacterial infection or physiological damage such as low temperature and high humidity. A peroral infection with the purified virus to healthy larvae produced a result that only 21% of larvae survived and became pupae. Although some of the survived adult beetle was deformational, many of them had no abnormal appearance and even succeeded in mating. Later, these beetles were examined if they were carrying the virus, and all except one were confirmed as live virus carrier. This implies that these beetles may fly out and spread the disease to the nature. We found the evidence for this possibility by collecting a few wild A. dichotoma larvae which were virus infected, near two local farms rearing A. dichotoma larvae. So far, transovarial transmission of this virus to the eggs, or horizontal transmission to other commercially reared insects is not known yet.
Mo, Jongseo;Angelichio, Michael;Gow, Lisa;Leathers, Valerie;Jackwood, Mark W.
Journal of Veterinary Science
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v.23
no.2
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pp.21.1-21.7
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2022
Newcastle disease (ND), infectious laryngotracheitis (ILT) and avian metapneumovirus (aMPV) can be similar making it critical to quickly differentiate them. Herein, we adapted pre-existing molecular-based diagnostic assays for NDV and ILTV, and developed new assays for aMPV A and B, for use under synchronized thermocycling conditions. All assays performed equivalently with linearity over a 5 log10 dynamic range, a reproducible (R2 > 0.99) limit of detection of ≥ 10 target copies, and amplification efficiencies between 86.8%-98.2%. Using biological specimens for NDV and ILTV showed 100% specificity. Identical amplification conditions will simplify procedures for detection in diagnostic laboratories.
Getah virus (GETV) infection causes sporadic outbreaks of mild febrile illness in horses and reproductive failure in pigs. In this study, we established a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method to detect GETV from suspected virus-infected samples. The reaction conditions were optimized and validated by using RNA extracted from GETV propagated in cell culture. A GETV-specific GED4 primer set was designed and used to amplify a 177 bp DNA fragment from a highly conserved region of the E1 glycoprotein gene in the GETV genome. RT-PCR performed with this primer set revealed high sensitivity and specificity. In the sensitivity test, the GED4 primer set detected GETV RNA at the level of $10^{2.0}\;TCID_{50}/mL$. In the specificity test, the GED4 primer set amplified only a single band of PCR product on the GETV RNA template, without non-specific amplification, and exhibited no cross-reactivity with other viral RNAs. These results suggest that this newly established RT-PCR method is useful for accurate identification of GETV infection in animals.
A method for the rapid detection and quantification of Newcastle disease virus (NDV) produced in an animal cell culture-based production system was developed to enhance the speed of the NDV vaccine manufacturing process. A SYBR Green I-based real-time RT-PCR was designed with a conventional, inexpensive RT-PCR kit targeting the F gene of the NDV LaSota strain. The method developed in this study was validated for specificity, accuracy, precision, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and robustness. The validation results satisfied the predetermined acceptance criteria. The validated method was used to quantify virus samples produced in an animal cell culture-based production system. The method was able to quantify the NDV samples from mid- or late-production phases, but not effective on samples from the early-production phase. For comparison with other quantifiable methods, immunoblotting, plaque assay, and tissue culture infectious dose 50 ($TCID_{50}$) assay were also performed with the NDV samples. The results demonstrated that the real-time RT-PCR method is suitable for the rapid quantification of virus particles produced in an animal cell-culture-based production system irrespective of viral infectivity.
Marek's disease virus(MDV) is a highly cell-associated, lymphotropic $\alpha$-herpesvirus that causes paralysis and neoplastic disease in chickens. The disease has been controlled by vaccination which was provided the first evidence for a malignant cancer being controlled by an antiviral vaccine. Marek's disease pathogenesis is complex, involving cytolytic and latent infection of lymphoid cells and oncogenic transformation of $CD4^+$ T cells in susceptible chickens. MDV targets a number of different cell types during its life cycle. Lymphocytes play an essential role, although within them virus production is restricted and only virion are produced. Innate and adaptive immune responses develop in response to infection, but infection of lymphocytes results in immunosuppressive effects. Hence in MDV-infected birds, MDV makes its host more vulnerable to tumour development as well as to other pathogens. All chickens are susceptible to MDV infection, and vaccination is essential to protect the susceptible host from developing clinical disease. Nevertheless, MDV infects and replicates in vaccinated chickens, with the challenge virus being shed from the feather-follicle epithelium. The outcome of infection with MDV depends on a complex interplay of factors involving the MDV pathotype and the host genotype. Host factors that influence the course of MD are predominantly the responses of the innate and adaptive immune systems, and these are modulated by: age at infection and maturity of the immune system; vaccination status; the sex of the host; and various physiological factors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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