Two low-salt complex media, bactopeptone and desalted yeast extract, were used for high density cultivation of the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus (DSM 1617). Bactopeptone, which has low mineral ion content among various complex media, was good for cell growth in batch cultures; the maximal cell density in bactopeptone was comparable to that in yeast extract. However, cell growth was rather poor when bactopeptone was added by the fed-batch procedure. Since several vitamins are deficient in abctopeptone, the effect of vitamins on cell growth was examined. Among the vitamins tested, pyridoxine was found to improve the growth rate of S. solfataricus. To reduce the growth inhibition caused by mineral ions, yeast extract was dialyzed against distilled water and then fed-batch cultures were carried out using a fed medium containing desalted yeast extract. Although the concentrations of mineral ions in yeast extract were significantly lowered by the dialysis whether low molecular weight solutes in yest extract are crucial for cell growth, we investigated the effect of trehalose, a most abundant compatible solute in yeast extract, on the growth pattern. Cell densities were increased and the length of the lag phase was markedly shortened by the presence of trehalose, indicating that trehalose plays an important role in the growth of S. solfataricus.
The effects of yeast on the fermentation of kimchi were investigated. The treatments were divided into two groups; yeast treatment during salting of Chinese cabbage(YS) and yeast treatment added in kimchi preparation(YF kimchi). The edible periods of the kimchi after yeast treatment during salting (YS kimchi) was extended 4~5 days by the results of pH, acidity, sensory quality. The activities of amylase, polygalacturonase and galactosidase of YS kimchi were retained at low levels compared to non treated condition throughout all fermentation periods, whereas protease activity was not significant different from the non treated condition. In addition, the contents of total hexose and uronic acid did not show remarkable change throughout fermentation, but total pentose was decreased by more than 7% at the early middle stage of fermentation(7~14 day after soaking). The change of free amino acid content was decreased by 16~44% than the non treated condition. In contrast, in the YF kimchi, the sensory quality was not good. The activities of amylase, protease, polygalacturonase and gal actosidase were appreciably higher than that of the non treated condition. Meanwhile, the contents of total hexose, total pentose and uronic acid, as products of degradation of cell wall constituents by the above enzymes, were decreased by 18~68% throughout fermentation than the non treated con dition, and total free amino acids were higher than the YS kimchi. Thus, yeast treatment during salting was found to be more effective to extend the edible periods of the kimchi.
Kim, Moo-Kyum;Song, Moo-Young;Yu, Myeong-Hee;Yu, Myeong-Hee;Park, Hee-Moon;Kim, Jinmi
미생물학회지
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제30권2호
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pp.108-112
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1992
To investigate the expression and the secretion of heterologous proteins in yeast, we constructed an yeast secretion vector and produced a human secretory protein, .alpha.-1-antitrypsin (.alpha.-1-AT), from yeast cells. The secretion vector pGAT8 was constructed by inserting the signal sequence of yeast acid phosphatase gene (PH05) into the .alpha.1-AT expression vector pGAT6 which contained .alpha.-1-AT cDNA fused to GAL10-CYC1 promotor. The .alpha.-1-AT was produced efficiently in the yeast cells transformed with plasmid pGAT8, which was onfirmed both by the .alpha.-1-AT activity assay and by the immunoblot method using .alpha.-1-AT antibody. We also showed the secretion of .alpha.-1-AT into the culture media and into the periplasmic space by immunoblot.
The selection of ethanol-tolerant strains was applied to enrichment culture of YPD broth medium containing various concentrations of ethanol. Isolates were identified to be Saccharomyces cerevisiae, the others as S. dairensis, S. exiguus, S. telluris, Saccharomycodes ludwigii, Schwanniomyces occidentalis var. occidentalis and Zygosaccharomyces florentinus. Among isolates S. cerevisiae YO-1 was screened as having the highest ethanol tolerance and produced 18% (v/v) ethanol after 4 days fermentation. The change of fatty-acyl residues represents that a progressive decrease in fatty-acyl unsaturation and a proportional increase in saturation in phospholipids of yeast cells during fermentation affected the yeast viability. Supplementation ethanol to the cultures led to an increase of unsaturated fatty-acyl residues, especially $C_{16}$ or $C_{18}$ residues, along with a decrease in the proportion of saturated residues in cellular phospholipids. Increasing the amount of soy flour led to an increase in the maximum number of viable yeast cells and ethanol production. It was possible in 4 days to reach 21% (v/v) ethanol by adding 4% soy flour as source of unsaturated fatty-acyl residues to the fermentation medium. Soy flour not only increased yeast population but also enhanced the physiological properties of yeast cells to be ethanol tolerant in the anaerobic culture.
Fusarium moniliforme으로부터 순모세포벽 분해효소를 생산하고 분리, 정제하여 효소특성 및 protoplast 제조실험을 하였다. Ammonium nitrate를 0.2% 첨가한 Baker's yeast 배지에서 7일간 진탕배양으로 효소를 생산한 후 Ammonium sulfate로 분획하고 Sephadex(G-100) column chromatography하여 세개의 peak를 얻었다 첫 번째 peak는 proteolytic, lytic activity 및 laminarin 분해력가를 보였으며, 두 번째 Peak는 lytic activity와 laminarin 분해력가를 동시에 가지고 있었으며, 세 번째 peak는 lytic activity만을 가지고 있었다. 분리된 세개의 peak를 혼합하였을때 개개의 peak보다 훨씬 높은 역가을 나타내어 상승효과를 보였고 또한 환원제에 의한 효소력가의 상승효과도 있었다. protoplast 수율은 99.2%정도였다
효모에는 여러 가지 종류의 thiol peroxid se 동위 효소들인 cytoplasmic TPx I, cTPx II, cTPx III, mitochodrial TPx (mTPx), 및 nuclear TPx (nTPx)가 존재하고 있다. 특히 cTPx II는 다른 효모TPx와 비교해 볼 때 매우 낮은 peroxidase 활성을 보이나, cTPx II를 제거한 cTPx II mutant균주는 심하게 성장이 저해되는 특징을 보인다. 본 연구에서는 효모에서의 cTPx II의 생리학적 기능을 밝히는 연구의 첫 과정으로 cTPx II와 상호 작용하는 단백질을 탐색하였다. Sacchromyces cerevisiae genomic DNA library에서 yeast two-hybrid system을 이용하여 cTPx II와 상호 결합하는 단백질을 탐색하여 그 단백질들의 기능을 연구하여, 궁극적으로 cTPx II의 생리기능을 밝히는데 이 연구의 목적을 두었다.
BACKGROUND: This study was performed for selecting yeast mutants with a high tolerance for targeted metals, and determining whether yeasts strains tolerant to multiple heavy metals could be induced by sequential adaptations. METHODS AND RESULTS: A mutant yeast strain tolerant to the heavy metals cadmium (Cd), copper (Cu), nickel (Ni), and zinc (Zn) was selected by sequential elevated exposures to each metal with intermittent mutant isolation steps. A Cd-tolerant mutant was isolated by growing yeast cells in media containing $CdCl_2$ concentrations that were gradually increased to 1 mM. Then the Cd-tolerant mutant was gradually exposed to increasing levels of $CuCl_2$ in growth media until a concentration of 7 mM was reached, thus generating a strain tolerant to both Cd and Cu. In the subsequent steps, this mutant was exposed to $NiCl_2$ (up to 8 mM), and a resultant isolate was further exposed to $ZnCl_2$ (up to 60 mM), allowing the derivation of a yeast mutant that was simultaneously tolerant to Cd, Cu, Ni, and Zn. CONCLUSION: This method of inducing tolerance to multiple targeted heavy metals in yeast will be useful in the bioremediation of heavy metals.
A study of the immunogenicity and reactogenicity of two doses of lot H(10, 20 mcg), two doses of lot L (20, 40 mcg) of the Smith Kline-RIT recombinant DNA yeast-derived hepatitis B vaccine and a 20-mcg dose of the Merck Sharp and Dohme plasma-derived hepatitis B vaccine was conducted in young adults under randomized, double-blind conditions. Immunization was carried out according to a 0-, 1-, and 6-month vaccination schedule. Results indicated that the yeast-derived hepatitis B vaccine was well tolerated and immunogenic. Reactogenicity to both yeast- and plasma-derived vaccines was mild in severity and low in incidence with no significant differences appearing between the study groups. One month after the third dose, the yeast-derived vaccines induced a high degree of soroconversion ranging between 95.0% and 100%. The response was not lot or dose-dependent. The administration of the plasma-derived vaccine resulted in anti-HBs geometric mean titres statistically signifirantly higher than those elicited by the different yeast-derived hepatitis B vaccines one month after the third dose of vaccine but the difference was not large enough to be of great clinical significance.
269 yeast strains were isolated from water samples collected from different sites in Minia governorate. These included 126 strains from fresh water, 108 strains from sewage and 35 strains from wastewater from sugar-cane factory. On the basis of 23 different physiological and morphological merkmals, the isolated strains were assigned to 16 species belonging to 11 genera. Total yeast cell counts as well as spectra of yeast species were highly variable in tested water. Total yeast cell counts ranged between $3.0{\times}10^3/l\;and\;1.8{\times}10^6/l$ for fresh water, $3.0{\times}10^4/l\;and\;3.0{\times}10^7/l$ for sewage and $1.5{\times}10^6/l\;and\;2.6{\times}10^7/l$ for wastewater from sugarcane factory. Debaryomyces hansenii, Rhodotorula mucilaginosa and Torulaspora delbrueckii were the dominant species in fresh water, whereas Debaryomyces hansenii, Thrichosporon beigelii, Rhodoforula mucilaginosa and Kluyveromyces marxianus were the dominant species in sewage and Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces marxianus and Trichosporon beigelii were the dominant species in wastewater from sugar-cane factory. Yeast human pathogens, Trichosporon beigelii, Rhodotorula mucilaginosa and Candida albicans were encountered in water samples indicating that water in El-Minia governorate is also polluted by some pathogenic yeasts.
We investigated the effect of nutritional and environmental factors on Ophiocordyceps longissima mycelial growth. The longest colony diameter was observed on Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Sabouraud dextrose agar (SDA); however, malt-extract yeast-extract agar, SDA plus yeast extract, yeast-extract malt-extract peptone dextrose agar, SDA, oatmeal agar, and potato dextrose agar showed higher mycelia density. A temperature of $25^{\circ}C$ was optimum and 7.0 was the optimum pH for mycelial growth. Colony diameter was similar under light and dark conditions. Maltose and yeast extract showed the highest mycelial growth among carbon and nitrogen sources respectively. The effect of mineral salts was less obvious; however, $K_3PO_4$ showed slightly better growth than that of the other mineral salts tested. Among all nutrition sources tested, complex organic nitrogen sources such as yeast extract, peptone, and tryptone were best for mycelial growth of O. longissima. Ophiocordyceps longissima composite medium, formulated by adding maltose (2% w/v), yeast extract (1% w/v), and $K_3PO_4$ (0.05% w/v) resulted in slightly longer colony diameter. In vitro mycelial O. longissima growth was sustainable and the production of fruiting bodies could be used for commercial purposes in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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