이 논문의 목적은 미강추출물 및 탈지미강추출물의 항산화력과 피부에 대한 안전성을 살펴보는데 목적이 있다. 미강과 탈지미강은 물과 에탄올로 추출하여 사용하였다. 미강추출물의 항산화능을 보기위해 DPPH로 유도된 free radical의 소거능에 의한 항산화 활성, 리보플라빈에 의해 유도된 Superoxide 생성 억제 활성, Xanthine Oxidase 저해활성을 측정하였으며 피부에 대한 안전성을 보기위해 인간 섬유아세포의 세포독성을 MTS방법을 통하여 살펴보았다. 본 연구결과는 미강추출물과 탈지미강추출물 중에서 특히 에탄올추출물은 탁월한 항산화력을 보였으며 인간 섬유아세포에서 세포독성 없이 안전하였다. 이상의 결과로 미강 및 탈지미강 추출물 중 에탄올 추출물은 화장품과 같은 미용산업 분야에서 기능성 소재로 활용과 스킨케어분야에 융복합 할 수 있을 것으로 사료된다.
한국산 검정콩의 종피색소를 1$\%$ HCL 용액으로 4$^{\circ}C$에서 24시간 추출하여0.45$\mu$mmembrane filter로 여과한 후 Sep-pak plus $C_{18}$ cartridge를 통과시켜 흡착된 색소성분을 메탄올로 용출시켜 30$^{\circ}C$에서 농축하여 실험을 실시하였다. 검정콩 세 가지 품종의 조색소액의 생리활성 효과를 살펴본 결과 고혈압에 관여하는 angiotensin converting enzyme 저해실험에서는 검정콩 1호, 일품검정콩 및 밀양 95호에서의 $IC_{50}$는 각각 0.22, 0.28, 0.38mg/mL로 나타나 검정콩 1호가 가장 우수하였다. 통풍에 관여하는 xanthine oxidase 저해실험에서의 $IC_{50}$이 각각 0.118, 0.165, 0.163mg/mL로 나타나 angiotensin converting enzyme 저해실험에서와 동일하게 검정콩 1호가 가장 높게 나타났다. 항염증효과를 살펴본 결과 $cPLA_2$를 50$\%$ 저해하는 $IC_{50}$값이 19.7, 10.7, 25.3$\mu$g/mL로 나타났으며, 암세포 증식 억제능을 실험한 결과 각각의 시료 중 밀양 95호가 0.5mg/mL의 농도에서 사람 유래의 결장암 세포주인 HT-29 및 사람과 마우스 유래의 간암 세포주인 HepG2와 Hepa에 대하여 각각 66.0$\%$, 58.2$\%$, 64.4$\%$의 억제능을 보여 시료 중 구성된 검정콩 1호보다는 여러 색소 성분이 공존하는 것이 더 유리한 결과를 나타내었으며, 여러 가지 가능성을 가지는 색소임을 알 수 있었다.
전라북도 고군산열도 선유도 일대에서 2014년 4월에 개화한 야생화들로부터 효모들을 분리한 후 이들의 26S rDNA의 D1/D2 부위의 염기서열을 결정한 다음 NCBI의 BLAST database에 등록되어 있는 효모들과의 상동성을 비교 분석하여 동정하였다. 야생화 51점에서 21종의 효모들을 61 균주 분리하였고, 이들 중 Cryptococcus aureus SY1-4 등의 Cryptococcus 속 균들이 가장 많았고, Metschnikowia reukaufii SY20-1등 Metschnikowia 속 균과 Rhodotorula ingeniosa SY1-1등 Rhodotorula 속 균들도 비교적 많이 분리되었다. 이들 61 균주들의 배양상등액과 무세포추출물을 제조한 후 생리기능성을 측정한 결과 M. reukaufii SY44-6의 배양상등액이 각각 49.6%의 XOD 저해활성과 38.4%의 미백성 Tyrosinase 저해활성을 보여 우수하였다.
Objectives :Ginkgo-Chunghyul-dan (GCHD) is newly developed herbal medicine to prevent and treat stroke. In this study, we investigated whether the GCHD had antioxidant activity and anti-platelet aggregation effect in vitro and hypolipidemic activities in vivo. Methods :Anti-oxidant activity of GCHD was measured using the Blois method, anti-platelet effect of GCHD was assessed by the Born method, and hypolipidemic activities of GCHD were evaluated in corn oil- or Triton WR-1339-induced and cholesterol-fed rats. Results :GCHD showed anti-oxidant activity in the study inhibiting the formation of 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals and xanthine oxidase activity. GCHD had anti-platelet aggregation activity. GCHD significantly lowered total cholesterol (TC), triglyceride (TG), and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) in high cholesterol diet and Triton WR-1339 induced model TG in corn oil-induced model. GCHD had no acute toxicity at a single dosage. Conclusion : These results suggest that GCHD has the potential to treat hyperlipidemia and stroke.
In this study, Tongue fern (Pyrrosia lingua) plants that have been used traditionally as medicines. Their traditional medicinal uses, regions where indigenous people use the plants, parts of the plants used as medicines. This study was designed to assess the antioxidant and inhibition activities of extracts from P. lingua. In the P. lingua extracts was measured ethanol activity, 80.0% ethanol was high activity. The antioxidant activity was measured in 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-Azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), assays. DPPH and ABTS radical in this experiment, solid and phenolic of extract were tested, but only an average concentration of 100 ㎍/mL was used. However, the phenolic extract is shown phenolic activity reached a peak. Also, phenolic extracts ware reached peak water and ethanol extracts. As a result, using the phenolic extracts did other antioxidant assays such as DPPH, ABTS, protection factor, and thiobarbituric acid reactive substances at 50-200 ㎍/mL concentrations. The activity of elastase and collagenase, inhibiting their activities may retard skin aging. α-Glucosidase and α-amylase, inhibitors need to be explored for the benefit of postprandial hyperglycemia in diabetic patients. Activities of tyrosinase, hyaluronidase and xanthine oxidase inhibitors of these enzymes are increasingly important ingredients in cosmetics and medications to protect the skin against hyperpigmentation and skin aging. Inhibition effects were investigated using the P. lingua extracts at 50-200 ㎍/mL concentrations. The expression levels of enzyme inhibitions activities were decrease in dependent-concentrations manner when P. lingua extracts were treated.
Reactive oxygen species (ROS) are highly reactive molecules due to their unpaired electron. They have been suspected as one of the major tissue damage inducers in biological metabolic systems. Antioxidant enzymes, such as catalase and superoxide dismutase, could not repair all the oxidative damages resulting from those excessive toxic ROS. It is, therefore, urgent to develop effective antioxidants to relieve from the oxidatire damages. In this study antioxidative effects were investigated by using two flavonoids such as quercetin and naringenin and a flavonoid-rich extract, Ginkgo biloba extract in combination with paraquat that is known as a strong generator of oxygen radicals. The results are summeringed as follows: 1. To assess radical scavenging ability reduction concentrations (IC$_{50}$) of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine (DPPH) within 15 minutes were measured. The values of the IC$_{50}$ of quercetin and Ginkgo biloba extract were 15.4 $\mu$M and 13.2$\mu$g/ml, respectively. Their radical removing activities showed concentration-dependent manners. 2. In the hydrogen peroxide assay by using PMS-NADH system, quercetin, naringenin and Ginkgo biloba extract led to removing hydrogen peroxide in concentrationdependent manner whose removing abilities at 100$\mu$M or 100 $\mu$g/ml were 75.6, 25.8 and 26.0%, respectively. 3. In the hydrogen peroxide-induced rat blood hemolysis assay all three compounds led to similar effects whose hemolysis inhibition ratios at 100$\mu$M or 100$\mu$g/ml were 68.0, 5.14 and 55.8%, respectively. 4. In the xanthinee oxidase assay by measuring degree of NADH oxidation in the presence of hypoxanthine and xanthinee oxidase, both quercetin and Ginkgo biloba extract showed excellent activities showing 42.8 and 24.2% inhibiting xanthine oxidase activity at 100$\mu$M or 100$\mu$g/ml concentrations, respectively.
Bobitang(BBT) is one of the most important prescription that has been used in oriental medicine(dongyibogam) for recovering spleen condition. The study was done to evaluate effects of BBT water extract on the spleen lipid peroxide content and metabolic enzyme system changes. After pretreatment of BBT I (100mg/kg), BBT II(250mg/kg), BBT III(350mg/kg), BBT IV(500mg/kg) for 1 week, lipid peroxide content and metabolic enzyme system changes of the spleen was measured in 8 months rats. The results were obtained as follows : 1. The content of spleen lipid peroxide was significantly decreased in all experimental groups as compared with control, and best in BBT III IV treated groups. 2. The activity of spleen superoxide generation was significantly decreased in all experimental groups as compared with control, and best in BBT IV III treated groups. 3. The activity of cytochrome P-450 and aminopyrine demethylase wasn't significant change. 4. The activity of aniline hydroxylase was significantly decreased in BBT IV II treated groups, xanthine oxidase was significantly decreased in all experimental groups, aldehyde oxidase was significantly decreased in BBT IV treated group as compared with control. 5. The activity of antioxidant enzymes as superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase was significantly increased in all experimental groups as compared with control. 6. The activity of glutathion S-transferase was significantly increased in all experimental groups, the concentration of spleen glutathione was significantly increased in BBT IV treated group as compared with control. 7. The activity of ${\gamma}$ -glutamylcystein synthetase was significantly increased in BBT III IV I treated groups as compared with control, the activity of glutathione reductase wasn't significant change. From the above results, BBT is cosidered to have effect of remove peroxide content and free radical that was made during ageing process. It is expected that treatment of BBT can be applied in future clinical study of delaying the ageing process.
To evaluate the influence of hepatic oxygen free radical systems on liver injury by topical p-phenylenediamine (PPD) application on rat skin, PPD (25 mg/16.5 $\textrm{cm}^2$) was topically applied to the abdominal region 5 times every other day and sacrificed. By PPD treatment, increasing rate of liver weight/body weight (%), serum activities of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase and decreasing rate of microsomal glucose-6-phosphatase activity were higher in the rats fed tungstate supplemented diet than those fed a standard diet. These findings indicate that group fed tungstate supplemented diet have more severe liver injury compared with group fed standard diet on topical PPD application. However, the activities of oxygen free radical generating enzymes such as xanthine oxidase (XO) and cytochrome P450 dependent aniline hydroxylase and those of oxygen free radical scavenging enzymes were not found to be different between these two animal groups. In the present study, a novel monitoring method to detect the generating of oxygen free radicals in liver extract was devised. Throughout this method, the oxidized PPD produced by oxygen free radicals was determined colorimetrically. The increasing rate of PPD oxidation by liver homogenate was higher in tungstate fed animals than in standard diet fed ones. Among the fractionations of liver extract, the mitochondrial and postmitochondrial fractions in the liver extract of tungstate fed animals led to a higher availability of PPD oxidation by PPD treatment compared with standard diet fed ones. In conclusion, these results suggest that an enhanced liver injury in tungstate fed animals treated with PPD may be due to oxygen free radicals produced in other systems except oxygen free radicals generating from cytosolic XO system. Especially, oxidative availability by PPD can be used for oxygen free radical detection in some tissue.
This study investigated the hypothesis that carcinogen-induced elevation of oxyradical during the hepatocarcinogenesis in rat. The hepatic preneoplastic lesions in the Spraque-Dawley rats were induced by the carcinogen treatment such as diethylnitrosamine(DEN) and acetylaminofluorene(AAF) in combination with partial hepatectomy(PH). The liver sample was taken at 2, 6, 10 and 16 months after carcinogen treatments followed by PH. Carcinogen treatments initially increased the indices of oxidative damage(activities of xanthine oxidase and production rates of superoxide anion, microsomal hydrogen peroxide, hydroxyl radical) in the liver compared to PH groups. However, cytosolic hydrogen peroxide did not change significantly throughout the full time period. Of hydrogen peroxide scavenger, the catalase was remained lower than PH groups, whereas the peroxidase was increased after carcinogen treatments. Morphologically, the immunohistochemical analysis with glutathione-S-transferase of a placenta form(GSTP) antibody was used to detect the induction of preneoplastic nodules. During the hepatocarcinogenesis, both production rate of hydroxyl radical and activity of glutathione-S-transferase(GST) markedly increased with the appearance of the preneoplastic nodule. These results indicated that the hydroxyl radical of reactive oxygen species seemed to have a major influence on the hepatocarcinogenesis and the effect of time after removal of the carcinogen also appeared to be highly critical in the hepatocarcinogenesis.
Objective: Previously, we found that oocyte specific homeobox (Obox) 4 plays significant role in completion of meiosis specifically at meiosis I-meiosis II (MI-MII) transition. The purpose of this study was to determine the mechanism of action of $Obox4$ in oocyte maturation by evaluating downstream signal networking. Methods: The $Obox4$ dsRNA was prepared by $in$$vitro$ transcription and microinjected into the cytoplasm of germinal vesicle oocytes followed by $in$$vitro$ maturation in the presence or absence of 0.2 mM 3-isobutyl-1-metyl-xanthine. Total RNA was extracted from 200 oocytes of each group using a PicoPure RNA isolation kit then amplified two-rounds. The probe hybridization and data analysis were used by Affymetrix Gene-Chip$^{(R)}$ Mouse Genome 430 2.0 array and GenPlex 3.0 (ISTECH, Korea) software, respectively. Results: Total 424 genes were up (n=80) and down (n=344) regulated after $Obox4$ RNA interference (RNAi). Genes mainly related to metabolic pathways and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway was changed. Among the protein kinase C (PKC) isoforms, PKC-alpha, beta, gamma were down-regulated and especially the MAPK signaling pathway PKC-gamma was dramatically decreased by $Obox4$ RNAi. In the cell cycle pathway, we evaluated the expression of genes involved in regulation of chromosome separation, and found that these genes were down-regulated. It may cause the aberrant chromosome segregation during MI-MII transition. Conclusion: From the results of this study, it is concluded that $Obox4$ is important upstream regulator of the PKC and anaphase-promoting complex action for maintaining intact germinal vesicle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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