Objectives: Toad venom, called Chan-Su, is a traditional Oriental medicine secreted from the auricular and the skin glands of the Bufo bufo gargarizanz Cantor or B. melanosticus Schneider and has been widely used in China, Korea and other parts of Asia for the treatment of pain, heart conditions, and cancer. We examined the concentrations of the main chemical constituents within a commercially available toad venom product and compared the levels for different extraction methods. Methods: Toad venom was extracted using either cold or hot water, ethanol (EtOH), methanol (MeOH), or ethyl acetate (EtOAc), was fractionated using precipitation or reflux, and was then analyzed using thin layer chromatography (TLC), high-performance liquid chromatography (HTLC), and liquid chroma-tography - mass spectrometry (LC-MS). Individual components were identified by comparisons of the retention times, the ultraviolet spectra, and mass spectras and differences in chemical constituents for different solvents and extraction methods are presented. Results: Components with authentic standards, including serotonin and bufodienolides (cinobufagen, bufalin, cinobufalin, and resibufogenin), were detected. The water extract of toad venom contained the greatest amount of serotonin ($75.7{\pm}0.1$ mg/g), but very small amounts of bufodienolides ($3.8{\pm}0.0$ mg/g). In contrast, the use of MeOH or EtOH extraction solutions resulted in 5-26 times higher concentrations of bufodienolides, with only trace amounts of serotonin. The relative and the absolute concentrations of the component also varied based on the extraction method; i.e., EtOH extracts yielded the greatest total amounts of bufodienolides, and EtOAc precipitation had the lowest amounts of bufodienolides. Conclusions: Toad venom consists of serotonin and several bufodienolides, and the choice of solvent to extract chemical the constituents is important as a way to enrich the purported active components for treating different conditions.
Kim, Seok-Yun;Lee, Jung-Min;Jung, In-Il;Lim, Gio-Bin;Ryu, Jong-Hoon
KSBB Journal
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v.24
no.6
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pp.533-540
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2009
In this work, 5'-nitroindirubinoxime (5'-NIO) has been prepared as solid dispersions using a supercritical aerosol solvent extraction system (ASES) process in order to enhance its water solubility and dissolution rate. Solid dispersions of 5'-NIO and poly(vinyl pyrrolidone) (PVP) were prepared in various weight percent ratios. Three-component solid dispersions consisting of 5'-NIO, PVP, and poloxamer 188 (P188) were also prepared to study the influence of P188 level on their morphology, crystallinity, and dissolution behavior. All samples were prepared at $35^{\circ}C$ and 180 bar using supercritical carbon dioxide. The particle morphology and size of the two-component solid dispersions were found to be nearly spherical and much smaller (100-200 nm) compared with the original 5'-NIO. The morphology of three-component solid dispersions became more agglomerated as the level of P188 increased. The crystallinity of the original 5'-NIO was not observed in the solid dispersions prepared by the ASES process. Faster dissolution rates were observed for the three-componet solid dispersions because the arrangement of ethylene oxide and propylene oxide blocks of the poloxamer 188 enabled the formation of micelles in an aqueous phase.
Cyanidin-3-glucoside (C3G) and cyanidin-3-rutinoside (C3R) were isolated by high-performance countercurrent chromatography (HPCCC) using a two-phase solvent system composed of tert-butyl methyl ether/n-butanol/acetonitrile/water/trifluoroacetic acid (1 : 3 : 1 : 5 : 0.01, v/v) to give pure C3G (34.1 mg) and C3R (14.3 mg) from 1.5 g crude mulberry fruit extract. Using the pure C3G and C3R, a reliable high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed and validated to determine the C3G and C3R contents in mulberry fruit. C3G and C3R were separated simultaneously using an Eclipse XDB-C18 column ($4.6{\times}250mm$ I.D., $5{\mu}m$) coupled with a photodiode array detector (PDA). The gradient elution of the mobile phase consisting of acetonitrile (0.5% formic acid) and water (0.5% formic acid) was applied (1.0 mL/min), and the detection wavelength was 520 nm. The calibration curves of C3G and C3R showed good linearity (both with $r^2=0.9996$) in the concentration range $15.625-500{\mu}g/mL$, and the relative standard deviations (RSD%) of intra- and inter-day variability were in the ranges 2.1 - 8.2% and 4.1 - 17.1%, respectively. The accuracies were ranged 96.5 - 102.6% for C3G and C3R, respectively. The developed HPLC method was used to determine the contents of C3G and C3R in newly harvested mulberry from eight different provinces of Korea.
Choi, Jiyeon;Kim, Kyun Ha;Choi, Jun Yong;Han, Chang Woo;Ha, Ki Tae;Jeong, Han-Sol;Joo, Myungsoo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.28
no.3
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pp.303-309
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2014
The fruit of Gleditsia sinensis has been extensively used as a key ingredient of an herbal remedy for the treatment of various inflammatory diseases in traditional Korean Medicine. However, the reason of using the fruit of G. sinensis for the remedy is unclear. Since Nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (Nrf2) is a key anti-inflammatory transcription factor, which is activated by the fruit of G. sinesis, we examined whether other plant parts of G. sinensis are also capable of suppressing inflammatory responses by activating Nrf2. Water extracts of various parts of G. sinensis were prepared and tested for Nrf2 activation by reporter assay and western blot analysis. Our results show that the hull of G. sinensis is the most potent in activating Nrf2. Sequential organic solvent extraction of the hull show that all the fractions had a higher potency in activating Nrf2 than the water extract, albeit differential degrees. The hull originated from Korea in general activated Nrf2 strongly compared to that of China. Chloroform fraction of the hull was further examined, showing that the fraction induced nuclear localization of Nrf2, indicative of activated Nrf2, and Nrf2-dependent gene expression including NAD(P)H dehydrogenase quinone 1 (NQO-1), glutamate-cysteine ligase catalytic subunit (GCLC), and heme oxygenase - 1 (HO-1). Therefore, our results show that, among other plant parts examined in this study, the hull of G. sinensis is the most potent, providing the experimental basis for the use of the hull of G. sinensis as an active ingredient for an anti-inflammatory remedy.
For the purpose of developing natural antioxidant, the antioxidative activity and antimicrobial of phenolics isolated from Baek-bu-ja (Aconiti koreani Rhizoma) were determined. Optimum extracting condition for phenolics were water extracts. HPLC analysis showed that the four major phenolic metabolites were rosemarinic, protocatechuic, caffeic and chlorogenic acids. The water extracts of Baekbuja did not have antimicrobial activity against H. pylori; however, the ethanol extracts revealed higher antimicrobial activity. Electron donation ability on DPPH of Baekbuja ethanol extract was 20% higher than other ethanol extracts. The 2,2'-azinobis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid radical decolorization (ABTS) and antioxidant protection factor (PF) were determined with extracts from Aconiti koreani Rhizoma. 94% inhibition and 1.14 PF were shown on ABTS and antioxidant protection factor with 60% ethanol extracts. Also, TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) showed $0.19\;{\mu}M$ in the control and $0.07\;{\mu}M$ in the 80% ethanol extracts. The result suggests that Baekbuja extract may be useful as potential sources of anti Helicobacter pylori, antioxidant.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.35
no.3
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pp.622-632
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2018
The aim of the present study was to evaluate of turmeric (Curcuma longa L.) on the physiological activities and oxidation inhibitory action. The effects of various solvents (distilled water DW, 70% ethanol and n-butanol) on the total phenolics content (TPC) of turmeric and their corresponding biological activity were studied. Bioactive compound of total saponin $7.506{\pm}0.349mg\;SE/g$ dry weight. Turmeric extracts yield were DW (17.11%), 70% ethanol (15.26%) and n-butanol (4.12%), respectively. Oxidation inhibitory action of the samples exhibited a dose-dependent increase. However, in the current study, none of the samples evaluated showed activity as strong as the BHA, ascorbic acid and EDTA. Results showed that extraction solvent had significant effects on TPC and oxidation inhibitory action (DPPH radical scavenging activity, ABTS radical scavenging activity, reducing power and ferric reducing antioxidant power) of n-butanol. Turmeric exhibited the antioxidant properties, which suggests that the plant material could be used for further studies as a potential source for bioactive and natural antioxidant.
This study was carried out to investigate potential applications of the extract of Castanopsis cuspidata var. sieboldii $N_{AKAI}$ nut as a functional food ingredient. The pH and $^{\circ}Brix$ of nut were 6.43 and 3.17, respectively. L, a and b values as Hunter's color were 83.07, 1.49 and 10.48, respectively. Total content of monosaccharide was 54.26 mg% and organic acids were composed of oxalic acid 495.37 mg%, formic acid 200.03 mg%, malic acid 93.65 mg%, citric acid 27.80 mg%, and succinic acid 16.61 mg%. Total phenolic contents in various solvent extracts were as follows: water 27.69 mg%, 75% ethanol 16.50 mg%, ethyl acetate 16.50 mg%, and methanol 10.30 mg%. The antioxidant activity ($SC_{50},\;{\mu}g/mL$) of the nut extracts by various solvents was in the order of ethyl acetate 74.88 > methanol 155.00 > n-hexane 213.33 > ethanol 249.33 > butanol 274.78 > chloroform 314.67 > 75% ethanol 848.33 > water extracts 869.67. The results indicated that the extract of C. cuspidata nut contained a potential food ingredient.
This study was worked out to investigate the compounds of antioxidant constituents extracted from Stachys Sieboldii MiQ. and their effects on antioxidant activity by DPPH method, ferric thiocyanate method, and nitrite scavenging ability. Solvents such as methanol, hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water were used for this purpose. Total concentrations of polyphenols and flavonoids were measured in the methanol fraction. The ethyl acetate fraction showed the strongest activity by DPPH method, ferric thiocyanate method, and nitrite scavenging ability. The ethyl acetate extract was fractionated on a silica gel column using elution solvent (chloroform: methanol: water = 70 : 30 : 5 lower phase) at a flow rate of 1.0 mL/min. UV-VIS spectral data of each fraction showed adsorption maxima in the range of 284~330 nm. Among fractions, the fraction 1 that has λ$\_$max/ (nm) of 284 nm showed the strongest activity by DPPH method. The UV-VIS spectral data of phenolic compounds were known to lie in the range of 210~290 nm and 300~550 nm. Therefore, the results of our study suggested that Stachys sieboldii MIQ. contains phenolic compounds showing natural antioxidant activity.
Experiments were performed for investigate the immune activities on human B and T cell growth and secretion of their cytokines. Also, antibodies in serum were investigated in female ICR mouse by feeding the extracts of Acer mono at dose of 30 and 100 mg/mL of one day orally for 15 days. The cytotoxicity of the samples on normal human cell (HEL299) was below 24.15% in adding the all extracts. Both human immune B and T cells were increased up to about 40% by the high pressure extraction process. The secretion of cytokines (IL-6, TNF-${\alpha}$) on human B and T cells were increased up to 20-50% by adding the high pressure extraction process compare to the hot water extraction process. Also, total serum IgG levels increased by feeding Acer mono extacts. It can be conclude that optimum condition for efficient extraction of Acer mono as functional materials is solvent extraction process using water with high pressure at below $100^{\circ}CA$ than typical process.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.1
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pp.14-18
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2009
This study was to determine the inhibitory effect against food borne pathogens of ethanol and water extracts from leaf, stem and root of Orostachys japonicus. On the paper disc assay, no detectable bactericidal activity in the water extracts from leaf, stem and root of Orostachys japonicus and ethanol extracts form stem and root of Orostachys japonicus was shown. However, ethanol extract of Orostachys japonicus leaf showed the highest antimicrobial activity. Minimum inhibitory concentration (MIC) of ethanol extracts was determined to range from 0.05 to 0.1% in leaf of Orostachys japonicus against gram positive bacteria and yeast. Antimicrobial activity of ethanol extracts was stable by heating at $121^{\circ}C$ for 15 min, and not affected by pH $2{\sim}10$ except for B. subtilis. These findings suggest ethanol extract from leaf of Orostachys japonicus may be useful as natural preservative.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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