Enhanced disease susceptibility1 (EDS1) is a regulator of basal defense responses required for resistance mediated by TIR-NBS-LRR containing R proteins. We identified three transcripts of EDS1-like genes encompassing diverse/separate expression patterns, based on the transcriptome analysis by Next Generation Sequencing (NGS) of V. flexuosa inoculated with Elsinoe ampelina. These genes were designated VfEDL1 (Vitis flexuosa Enhanced Disease Susceptibility1-like1), VfEDL2 and VfEDL3, and contained 2464, 1719 and 1599 bp, with 1791, 1227 and 1599 bp open reading frames (ORFs), encoding proteins of 596, 408 and 532 amino acids, respectively. The predicted amino acid sequences of all three genes showed the L-family lipase-like domain (class 3 lipase domain), and exhibited a potential lipase catalytic triad, aspartic acid, histidine and serine in the conserved G-X-S-X-G. All three VfEDL genes were upregulated at 1 hpi against the bacterial and fungal pathogens Rizhobiumvitis and E. ampelina, respectively, except VfEDL1, which was downregulated against E. ampelina at all time points. Against E. ampelina, VfEDL2 and VfEDL3 showed downregulated expression at later time points. When evaluated against R. vitis, VfEDL1 showed downregulated expression at all time points after 1 hpi, while VfEDL3 showed upregulation up to 24 hpi. Based on the expression response, all three genes may be involved in plant resistant responses against R. vitis, and VfEDL2 and VfEDL3 show additional resistant responses against E. ampelina infection.
착색용 포도품종(Vitis hybrid)의 조직으로부터 callus를 유도하고 액체 진탕배양을 행하여 세포 생육 및 anthocyanin의 생성에 미치는 각종 인자들에 대하여 조사한 결과 광조사량 및 무기질소원 농도가 가장 큰 영향을 미치는 것으로 나타났다. 즉, 광조사량이 10,000lux 였을 때는 암소에서 배양했을 때보다 anthocyanin 생성량은 약 2배 증가하였다. 또한 기존 MS 배지의 무기질소원 농도를 20배로 감소시켜 배양했을 때 전체 anthocyanin 생성량은 약 5-6배, 건조 중량당 함량은 약 16배 증가함을 알 수 있었다. 또한 무기질소원으로 nitrate만을 첨가했을 때 가장 높은 수율을 나타냈다. 고농도의 Co$^{2+}$, Fe$^{2+}$와 Miller 배지, Gamborg 배지 등이 anthocyanin 생산에 적합한 것으로 나타났으며, MS medium 및 modified MS medium을 이용한 2단계 배양을 시도하여 약 40mg/flask의 높은 anthocyanin 수율을 얻을 수 있었다.
In this study, antibacterial activity and cytotoxicity of the extracts from pericarp and seed of $Vitis$$coignetiea$, which were extracted with 0.1% HCl-60% ethanol, were analyzed. The antibacterial activity of the extracts was determined by paper disc diffusion method against food spoilage and food-borne pathogens. The pericarp extract showed high antibacterial activity against $Bacillus$$cereus$, $Escherichia$$coli$ O157:H7, and $Pseudomonas$$aeruginosa$, and the seed extract represented the high antibacterial activity against $B.$$cereus$, $E.$$coli$ O157:H7, and $Staphylococcus$$aureus$. The cytotoxicity of the $Vitis$$coignetiea$ extract against human cancer cells was determined using the MTT assay and SRB assay. The pericarp extract represented strong growth-inhibition activity against G361 and Hep3B cells and the seed extract greatly inhibited the growth of HeLa and G361 cells in the MTT assay. In addition, the pericarp extract displayed a high inhibition activity against the growth of AGS cells and the seed extract greatly inhibited the growth of HeLa, Hep3B, and MCF7 cells in the SRB assay. Especially, the cytotoxicities of the seed extract against HeLa were significantly higher than those of the extract against other cancer cells at all test concentrations. This study demonstrates that the extract from pericarp and seed of $Vitis$$coignetiea$ possess high antibacterial activity and cytotoxicity.
Plants protect themselves from pathogen attacks via several mechanisms, including hypersensitive cell death. Recognition of pathogen attack by the plant resistance gene triggers expression of carboxylesterase genes associated with hypersensitive response. We identified six transcripts of carboxylesterase genes, Vitis flexuosa carboxylesterase 5585 (VfCXE5585), Vf-CXE12827, VfCXE13132, VfCXE17159, VfCXE18231, and VfCXE47674, which showed different expression patterns upon transcriptome analysis of V. flexuosa inoculated with Elsinoe ampelina. The lengths of genes ranged from 1,098 to 1,629 bp, and their encoded proteins consisted of 309 to 335 amino acids. The predicted amino acid sequences showed hydrolase like domains in all six transcripts and contained two conserved motifs, GXSXG of serine hydrolase characteristics and HGGGF related to the carboxylesterase family. The deduced amino acid sequence also contained a potential catalytic triad consisted of serine, aspartic acid and histidine. Of the six transcripts, Vf-CXE12827 showed upregulated expression against E. ampelina at all time points. Three genes (VfCXE5585, VfCXE12827, and VfCXE13132) showed upregulation, while others (VfCXE17159, VfCXE18231, and VfCXE47674) were down regulated in grapevines infected with Botrytis cinerea. All transcripts showed upregulated expression against Rhizobium vitis at early and later time points except VfCXE12827, and were downregulated for up to 48 hours post inoculation (hpi) after upregulation at 1 hpi in response to R. vitis infection. All tested genes showed high and differential expression in response to pathogens, indicating that they all may play a role in defense pathways during pathogen infection in grapevines.
The root of Vitis labrusca, is used as a source of health promoting drug in Korean traditional medicine. It has been reported that root of Vitis labrusca has antioxidant, anti lipid peroxidation and anti-reactive nitrogen species (RNS) activities. The aim of this study was to elucidate the molecular changes of apoptotic signaling pathways in phorbol 12-myristate 13 acetate (PMA)-induced human hepatocellular carcinoma cell line (Hep G2). The root of Vitis labrusca, ethanol extract (RVLEE) was tested for cell viability on Hep G2 cell using the MTT assay. RVLEE exhibited weak cytotoxic activity. However, treatment of Hep G2 cells with RVLEE suppressed PMA-induced cell proliferation. Also, dramatic changes of cell death signals in cellular molecules such as Chk2/Cds1, CIDE-B, CLIMP-63, Bax, Bcl-xL, C-myc, Bcl-2, Bric-5, NIP-3, TRAF2 and BAR but not CIDE-B and DR4. Futhermore, our results showed that the treatment of Hep G2 cells with 25 and $50\; {\mu}g/ml$ of RVLEE suppressed PMA-induced COX-2 gene activity. These data suggest that RVLEE have inhibitory effect of cell proliferation, induction of apoptosis and, thus, may offer therapeutic potential in Hep G2.
This study was purposed to investigated the antioxidant effects of water (VLWS) and aqua-acupuncture solution (VLAS) from root of Vitis labrusca. VLWS and VLAS was were assessed to determine the mechanisms of its antioxidant activities. The VLWS and VLAS exhibitde a concentration-dependent inhibition of DPPH free radicals. This VLWS-mediated antioxidant activity was similar to that L-ascorbic acid (vitamin C). In addition, the VLWS and VLAS showed dose-dependent free radical scavenging activity, including superoxide anions and hydroxyl radicals, using different assay systems. The VLWS and VLAS were also found to be strongly inhibited linoleic acid oxidation in a ferric thiocyanate assay (FTC) system. Finally, the VLWS and VLAS significantly prevented Fenton's reagent-induced DNA nicking.
본 연구는 4종류의 한국산 포도를 이용하여 포도주를 제조한 후 이들의 발효와 후 발효중의 심혈관 관련 angiotensis I 전환효소 저해 확정과 혈전 용해 활성 및 항치매성 $\beta$-secretase 저해활성을 조사하였다. 발효 10일 후 모든 시료 포도주들의 항고혈압성 엔지오텐신 전환효소(ACE)저해활성은 $38.6%{\sim}58.8%$ 이었다. 그러나 후발효가 진행됨에 따라 ACE저해활성은 증가하여 세리단(Vitis hybrid) 포도주가 후발효 120일 후 최고인 76.9%에 도달하였다. 혈전용해활성은 모든 시료 포도주들에서 미약하거나 없었다. 발효 10일 후, 켐벨어리(Vitis labrusca B) 포도주가 54.8%의 가장 높은 항치매성 $\beta$-secretase저해 활성을 보였으나 후발효 120일 후에는 10% 미만으로 현저하게 감소되었다. 결론적으로 본 연구에서는 세리단 포도를 S. cerevisiae K-7 효모로 $25^{\circ}C$에서 10일간 발효 시킨 후 $4^{\circ}C$에서 120일간 후발효 시켜서 고부가가치의 생리 기능성을 가진 세리단 적포도주를 제조하였다.
본 연구는 강원도 일원에서 수집된 왕머루 (GW-22, GW-45, GW-56, GW-200, GW-202, GW-300)의 화형에 따른 화분 특성 및 포도와 교배친화성을 구명하고자 수행하였다. 각각의 꽃 구조와 화분발아능력, 화분 형태, 화분크기 및 포도와 교배화합성을 조사하였다. GW-22와 GW-56의 꽃은 암술이 퇴화하고, 5개의 수술대가 곧은 직선이었다. 이들 각각의 계통은 인공배지에서 화분발아율은 $27.6{\sim}29.8%$였다. GW-45, GW-200, GW-202, GW-300의 꽃은 잘 발달된 암술과 5개의 수술대가 바깥쪽으로 말린 형태였다. 이들 계통은 모두 인공배지에서 화분발아율은 0%였다. 이들 계통은 자가수분된 머루에서는 과립과 종자를 얻을 수 없었다. 머루간의 상호교배에서는 착과율이 $14.1{\sim}45.4%$였다. 따라서 왕머루의 꽃 형태는 Vitis종의 자웅이주식물이다. 암머루와 수머루의 교배시 정상적인 종자를 형성하였고, 포도와 수머루의 교배시 정상적인종자를 형성하였다. 그러나 암머루와 암머루의 교배시 종자를 형성하지 못하였다. 그러므로 머루는 포도와 상호교배친화성이 있으며, 왕머루계통은 포도속 식물의 육종연구에 기여할 것이다.
This study was conducted to investigate the effect of dietary supplementation of wild grape (Vitis coignetiae) on egg qualities. Laying hens were randomly assigned to three different dietary groups containing 0, 0.25, and 0.5% of wild grape and fed for 8 weeks, respectively. Eggs were collected after feeding period and stored at $4^{\circ}C$ for 7 days. Egg quality traits and cholesterol level of egg yolk were measured at 0 and 7 days of storage. There were no significant differences in total cholesterol content of egg yolk and egg shell thickness among the treatments. However, egg weights of wild grape-fed groups significantly increased compared to that of control. Dietary supplementation of 0.25% wild grape increased the shell and yolk colors compared to the control. Dietary supplementation of 0.5% wild grape significantly increased albumen height and Haugh unit and decreased egg shell hardness and pH values at day 0. However, no differences were found after 7 days of storage. Consequently, the dietary supplementation of wild grape improved the egg qualities on some extent including egg weights, shell and yolk color, albumen height, and Haugh unit.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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