The lectin was purified through 0.15 M NaCl extraction, ammonium sulfate precipitation, sepharose 4B affinity chromatography and gel filtration using sephadex G-150 from the leaves of Visum album collected in Mt. Duk Yu. The final gel filtration step resulted in 11.64 folds purification with 0.14% of recovery yield. We also performed biochemical characterization of the purified Visum album lectin. HPLC analysis of lectin purified by gel filtration revealed a singel peak. The analysis of the purified lectin by SDS-PAGE showed a tetramer composed of two identical subunits with molecular weights of 32 and 30 kDa. The lectin was a glycoprotein containing 14.4% carbohydrate, which consist of glucose, fructose, arabinose and xylose, and the amino acids such as phenylalanine, lysine and tyrosine. The purified lectin agglutinated human red blood cell types with similar potency, but when tested against red blood cells from mouse, bovine, rabbit, chicken and porcine, significant difference in potency were observed. Hemaggluting activity was inhibited by D-galactose, D-mannose, D-lactose and D-raffinose, but not by D-glucose, D-glucosamine, D-mannosamine, L-fructose, D-xylose, D-arabinose, D-galacturonic acid, D-fructose, L-rhamnose and N-acetyl-D-galactosamine. The optimal pH and thermal stability of the purified lectin were pH 4.0-7.0 and 20-5$0^{\circ}C$, respectively.
These studies were conducted to investigate the alcohol degradation effects of the extract of herbal composition (DTS20) containing Viscum album L., Lycium chinense L., Inonotus obliquus and Acanthopanax senticosus H., on the alcohol administered mice. To investigate anti-hangover effect, alcohol and alcohol dehydrogensae (ADH) concentration of blood were measured after oral administration of ethanol. The administration of DTS20 (200-500 mg/kg) had beneficial actions toward alcohol degradation in acute alcohol treated mice model. The oral administration of DTS20 showed decreased gastric mucous membrane damage produced in ethanol treated mice. In addition, intraperitoneal administration of DTS20 showed anti-inflammatory effects in inhibition tests of vascular permeability produced by acetic acid. DTS20 also reduced the concentration of nitric oxide (NO), tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ in macrophages that were activated by LPS. These results demonstrate that DTS20 possesses potential to stimulate the alcohol degradation and inhibit the inflammatory effects in mice.
We have reported that water-extracted Korean mistletoe (KM-110) had various biological activities such as antitumor and immunomodulatory activity, and the pectin fraction (KML-C) of the extract was one of major factors related to its biological functions. In this paper, we produced murine monoclonal antibody (mAb) against KML-C. The cAbs obtained were largely classified into two groups according to specificity to KML-C and ML-I, a pectin from European mistletoe. One group mAbs (9H7-D10 and 3C2-lH4) strongly reacted with KML-C, but not ML-I. In contrast, another group cAbs (8Bll-2C5, BE12-3E9 and 5E10-Fl) reacted with both KML-C and ML-1. The subisotypes of these mobs were shown to be IgGl (9H7-lD10, 3C2-lH4 and 8Bll-2C5) or IgM (8E12-3E9 and 5E10-Fl). To develop an assay system for determination of the amount of KML-C, we established the sandwich ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) method using these mAbs and horse radish peroxidase (HRP)-labelled cAbs. In various combinations of the cAbs for coated antibody and detection antibody, the sandwich ELISA quantitatively detected KML-C, showing the detection limit ranging from 7-5,000 ng/ml. Especially reproducibility (C.V) of the sandwich ELISA, in which 8E12-3E9 was used for coating antibody and 8Bll-2C5-HRP for detection antibody, was 4.59-5.83 in intra assay, and 3.9-9.4 in inter assay.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.5
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pp.529-534
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2009
Physiological activities of mistletoe extracts were examined. Total polyphenol contents, electro-donating ability, SOD-like activity, nitrite-scavenging ability and tyrosinase of mistletoe extracted with water, 50%, and 100% ethanol were determined. Total polyphenol contents of powder extracts were higher than slice extracts. EDAs showed over 90% at powder extracts. Especially mistletoe extracts with 50% ethanol were higher than water extracts. SOD-like activities of water, 50% and 100% ethanol extracts of all samples were $23.71{\sim}33.4%$ lower than those of 1.0% and 0.1% L-ascorbate solutions. Nitrite-scavenging activities at pH 1.2 were the most effective in water, 50% and 100% ethanol extracts. The results will be useful for understanding the physiolosical activities of mistletoe extracts.
George, V. Cijo;Kumar, D.R. Naveen;Suresh, P.K.;Kumar, R. Ashok
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.13
no.5
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pp.2015-2020
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2012
Oleanolic acid (OA) is a naturally occurring triterpenoid in food materials and is a component of the leaves and roots of Olea europaea, Viscum album L., Aralia chinensis L. and more than 120 other plant species. There are several reports validating its antitumor activity against different cancer cells apart from its hepatoprotective activity. However, antitumor activity against skin cancer has not beed studied well thus far. Hence the present study of effects of OA against HaCaT (immortalized keratinocyte) cells - a cell-based epithelial model system for toxicity/ethnopharmacology-based studies - was conducted. Radical scavenging activity ($DPPH{\cdot}$) and FRAP were determined spectrophotometrically. Proliferation was assessed by XTT assay at 24, 48 and 72 hrs with exposure to various concentrations (12.5-200 ${\mu}M$) of OA. Apoptotic induction potential of OA was demonstrated using a cellular DNA fragmentation ELISA method. Morphological studies were also carried out to elucidate its antitumor potential. The results revealed that OA induces apoptosis by altering cellular morphology as well as DNA integrity in HaCaT cells in a dose-dependent manner, with comparatively low cytotoxicity. The moderate toxicity observed in HaCaT cells, with induction of apoptosis, possibly suggests greater involvement of programmed-cell death-mediated mechanisms. We conclude that OA has relatively low toxicity and has the potential to induce apoptosis in HaCaT cells and hence provides a substantial and sound scientific basis for further validation studies.
Inhibitory effect of the lectins (KML-C) isolated from Korean mistletoe (KM; Viscum album coloratum) on tumor metastases produced by murine tumor cells (B16-BL6 melanoma, colon 26M3.1 carcinoma and L5178Y-ML25 lymphoma cells) was investigated in syngeneic mice. An intravenous (i.v.) administration of KML-C (20-50 ng/mouse) 2 days before tumor inoculation significantly inhibited lung metastases of both B16-BL6 and colon 26-M3.1 cells. The prophylactic effect of 50 ng/mouse of KML-C on lung metastasis was almost the same with that of 100 $\mu$ g/mouse of KM. Treatment with KML-C 1 day after tumor inoculation induced a significant inhibition of not only the experimental lung metastasis induced by B16-BL6 and colon 26M3.1 cells but also the liver and spleen metastasis of L5178Y-ML25 cells. Furthermore, multiple administration of KML-C given at 3 day-intervals after tumor inoculation led to a significant reduction of lung metastasis and suppression of the growth of B16-BL6 melanoma cells in a spontaneous metastasis model. In an assay for natural killer (NK) cell activity. i.v. administration of KML-C (50 ng/mouse) significantly augmented NK cytotoxicity against Yac-1 tumor cells 2 days after KML-C treatment. In addition, treatment with KML-C (50 ng/mouse) induced tumoricidal activity of peritoneal macrophages against B16-BL6 and 3LL cells. These results suggest that KML-C has an immunomodulating activity to enhance the host defense system against tumors, and that its prophylactic and therapeutic effect on tumor metastasis is associated with the activation of NK cells and macrophages.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.1
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pp.14-19
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2010
This study was to investigate antioxidant effects of mistletoe extracts by extraction conditions. Electron donating ability of 50% ethanol extract had shown 92.27% at 50 mL/g, which was higher than 1.0% and 0.1% L-ascorbate solutions (p<0.05). SOD-like activities were the most effective in all samples at 50 mL/g, which were barely detectable. The total polyphenol contents of water extracts including all extracts were the highest at 50 mL/g extracts (p<0.05). The nitrite scavenging effects were different depending on pH value; they were decreased overall as pH value was increased. Especially, nitrite scavenging effects were the most effective in pH 1.2, which showed more than 80% (p<0.05). Tyrosinase-inhibitory activities ranged at fewer than 10%. These results indicate that mistletoe extracts are potential sources of natural antioxidant.
This study was designed to develop microencapsulated Korean mistletoe extract, to determine the stability in vitro and to examine its application in milk. Coating materials used were polyglycerol monostearate (PGMS) and medium-chain triacylglyderol (MCT). The highest efficiency of microencapsulation was 78.3% with 15:1:40 (w/w/v) as PGMS : mistletoe extract : distilled water and 66.1% with 15:1 (w/w) as MCT : mistletoe extract. The size of microcapsule was about 30.0 and $19.5{\mu}m$ with PGMS and MCT, respectively. When microcapsules of mistletoe extract were incubated in simulated gastric fluid at pH 2 for 60 min, 14.8 and 17.2% of lectin was released from capsules which were coated with PGMS and MCT, respectively. Comparatively, 83.2 and 87.3% of lectin was released in simulated intestinal fluid (pH 8) after 60 min incubation of capsules coated with PGMS and MCT, respectively. The subsequent study determined the changes of physicochemical and sensory characteristics of milk with fortification of the mistletoe extract microcapsules during 12 day storage. TBA value was significantly lower in microcapsule-added groups than in the uncapsulated mistletoe extract-added group during the storage. When 100 ppm microencapsulated mistletoe extract was added, the L-, a- and b- values and viscosity were not significantly different from those of the control. In addition, the release of lectin from mistletoe extract over 12 days was 8.3 and 9.5 mg/100 ml in milk containing microcapsules made by PGMS and MCT, respectively. All sensory attributes showed a significant difference in uncapsulated mistletoe extract-added milk compared with other groups. The present study indicated that microcapsules of Korean mistletoe extract could be applied to milk and microcapsules coated with PGMS were effectively released in a simulated intestinal environment.
This study was designed to observe the effects of Korean mistletoe(Viscum album L. var. coloratum Ohwi) hot-water extract administration on the improvement on the lipid components, apolipoprotein and blood pressure level in spontaneously hypertensive rats (SHR, Wistar strain, male) fed the experimental diets for 33 days. Concentrations of total cholesterol, triglyceride (TG), LDL-cholesterol, free cholesterol and atheroscieotic index in serum were significantly lower in the Korean mistletoe extract administration group [group KM(Korean mistletoe 10.0 g% hot-water extract)] than those in the control group. In the ratio of HDL-cholesterol concentration Korean mistletoe 10.0% hot-water extract administration group were higher percentage than in the control group. However, concentrations of total cholesterol and TG in liver and brain were significantly lower in the group KM than those in the control group. But the components of apolipoprotein (Apo) A-I and Apo A-II in serum were significantly higher in the KM group than in the control group. However, components of Apo C-II, Apo C-III, Apo E and ratio of Apo B to Apo A-I in serum were fairly reduced in the group KM than in the control group. The levels of systolic and diastolic blood pressure were significantly lower in KM cup than control group. From these results, Korean mistletoe hot-water extract administration were effective on the improvement of the lipid components, coronary heart disease and hypertension in spontaneously hypertensive rats. And particularly, Korean mistletoe extract administration were more effective as a therapeutic regimen for the control of blood pressure in hypertension.
Antitumor activity of Korean mistletoe extract (KM-110) and European commercial mistletoe preparation (Helixor) was investigated. KM-110 showed the cytotoxic effect that it is high for various tumor cell lines and normal splenocytes in comparison with Helixor. Administration of two mistletoe extracts ($100{\mu}g$) to mice did not show any significant changes on the level of glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic-pyruvate transaminase (GTP), blood creatinine (CRE) and blood urea nitrogen (BUN) in sera. The culture supernatant of macrophages stimulated with KM-110 inhibited effectively tumor growth whereas Helixor had little effect. Administration of KM-110 or Helixor resulted in a effective inhibition of lung metastasis after the i.v. inoculation of colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma and L5178Y-ML25 lymphomas. In all cases, the mice treated with KM-110 showed more effective anti-tumor metastatic activity than the mice of Helixor. These results suggest that Korean mistletoe extracts, KM-110 might be used as an alternative methods having antitumor activity like European mistletoe preparation, Helixor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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