• Title/Summary/Keyword: Vibrio ichthyoenteri

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16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region을 이용한 Vibrio ichthyoenteri Species-specific Primer 개발 (Use of 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region for Species-specific Primer Developed of Vibrio Ichthyoenteri)

  • 문영건;허문수
    • 미생물학회지
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    • 제41권2호
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    • pp.117-124
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    • 2005
  • Rotifer와 병든 넙치 자어로부터 분리된 2개의 균주는 표현형적인 특성 확인 결과 Vibrio ichthyoenteri로 확인이 되었다. V. ichthyoenteri를 검출하기 위래 고감도 PCR 방법 개발을 하기 위래 V. ichthyoenteri 16S-23S rRNA intergenic spacer region(ISR)을 분석하였고, V. ichthyoenteri중 특이적 primer를 개발하였다. V. ichthyoenteri 의 ISR를 분석한 결과 1개의 다형성 ISR type서열을 포함하고 있었다. ISR서열은 길이는 348bp이며 tRNA gene을 가지고 있지 않았다. 이 서열을 가지고 이미 알려진 다른 Vibrio 종의 ISR 서열과 mutiple alignment를 수행한 결과 여러 영역에서 높은 가변성을 나타내어 가변 부위를 표적으로 하여 V. ichthyoenteri를 검출하기 위한 종 특이적 primer를 제작하였다. 제작된 primer의 특이성을 확인하기 위해 Vibrio 표준균주 19종의 genomic DNA와 분리균주 18 group에 genomic DNA 그리고 V. ichthyoenteri와 가장 유사한 서열을 가지고 있다고 알려진 Vibrio 종의 genomic DNA를 가지고 시험하였다. 그 결과 본 연구에서 제작된 종 특이적 primer를가지고 PCR 반응을 하면 V. ichthyoenteri를 검출 할 수가 있다.

넙치(Paralichthys olivaceus)자치어 장관백탁증(Bacterial white enteritis) 원인균의 신속 검출 (Rapid Detection of the pathogenic agent of Bacterial white enteritis of Larval and Juvenile Stages in Olive flounder (Paralichthys olivaceus))

  • 문영건;박근태;손홍주;이상현;이정민;허문수
    • 한국어병학회지
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    • 제17권3호
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    • pp.159-169
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    • 2004
  • 2003년 5월과 2003년 10월동안에 제주도내 5개소의 넙치 종묘배양장에서 초기 먹이로 공급 되어지는 동물성 플랑크톤인 rotifer와 20-30일령 넙치 자어에서 장관백탁증 원인균으로 알려진 V. ichthyoenteri를 분리하기 위해 실험한 결과 총 71개의 Vibrio sp. 분리가 되었고, 생화학적 동정결과 2개의 그룹에서 24개의 V ichthyoenteri가 동정 되었다. V. ichthyoenteri의 신속한 검출을 위한 종특이적 primer를 V. ichthyoenteri(KCCM 40870)ISR의 특이적인 서열을 이용하여 제작하였다. V. ichthyoenteri를 포함한 20종의 Vibrio속 균주의 genomic DNA와 18group 분리균주 genomic DNA를 PCR한 결과 V. ichthyoenteri 만의 특이적인 band가 생성됨을 알 수가 있다. 따라서 V. ichthyoenteri(KCCM 40870) ISR의 서열로 제작한 primer가 넙치 자치어에 발병하는 장관백탁증 원인균인 Vibrio ichthyoenteri의 신속한 검출과 정확한 동정을 할 수 있는 molecular marker로 이용할 수 있음을 확인하였다.

Phenotypic Diversity of Vibrio ichthyoenteri Isolated from the Gastrointestinal Tract of Larval Olive Flounder Paralichthys olivaceus

  • Han, Hyun-Ja;Lee, Deok-Chan;Kim, Do-Hyung;Choi, Hye Sung;Jung, Sung Hee;Kim, Jin Woo
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제16권2호
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    • pp.125-129
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    • 2013
  • Vibrio ichthyoenteri is a facultatively anaerobic gram-negative bacterium with straight or slightly curved rod morphology. The bacterium is an etiological agent of bacterial enteritis of Olive flounder Paralichthys olivaceus. Only a handful of studies, using a limited number of isolates, have investigated the phenotypic and genetic characteristics of V. ichthyoenteri. We isolated 40 V. ichthyoenteri strains, identified based on the 16S rRNA gene sequence, from the diseased flounder larvae and investigated the API 20E and ZYM profiles. The isolates exhibited highly divergent phenotypic characteristics regardless of sampling time point and location, and fish age. Essential enzymes produced by V. ichthyoenteri seemed to be alkaline phosphatase, leucine arylamidase, and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase. This study reveals a much greater enzymatic and biochemical phenotype diversity than has been evident to date. These results suggest that a given population of V. ichthyoenteri could be heterogeneous in terms of its phenotypic characteristics.

Determination of epidemiological tetracycline MIC cut-off value for Vibrio ichthyoenteri

  • Han, Hyun-Ja;Kim, Do-Hyung;Lee, Deok-Chan;Won, Kyoung-Mi;Lee, Soon-Jeong;Cho, Mi-Young;Jee, Bo-Young;Kim, Jin-Woo
    • 한국어병학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.95-102
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    • 2011
  • Normalized resistance interpretation (NRI) analysis for tetracycline was applied to generate information on the epidemiological cut-off value for Vibrio ichthyoenteri isolated from diseased olive flounder (Paralichthys olivaceus) larvae. Thus, 42 strains of V. ichthyoenteri were used to determine minimum inhibitory concentration (MIC) values of tetracycline using Etest. Also, 11 tetracycline resistance related genes were investigated by PCR method. Most tetracycline-resistant strains harbored both tetB and tetM with a few exceptions. NRI-derived mean and 2 SD above the mean of theoretical normal distributions of susceptible isolates were 0.33 mg/L and 1.66 mg/L, respectively. The epidemiological cut-off value for V. ichthyoenteri from the calculations could be set to S ${\leq}$ 2 mg/L. Of the 42 strains, 15 were classified as non-wild type (NWT), and MIC values of the NWT strains vary regardless of tetB and tetM detection, suggesting that there may be other mechanisms involved in tetracycline resistance in this Vibrio species.

미성어 양식 넙치, Paralichthys olivaceus에서 분리한 Vibrio icthyoenteri의 표현형 및 유전형적 특성 (Phenotypic and genetic characteristics of Vibrio ichthyoenteri isolated from the olive flounder, Paralichthys olivaceus of culturing size)

  • 박수일;이화;김수미
    • 한국어병학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.127-139
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    • 2006
  • 2002년에서 2004년에 걸쳐, 우리 나라의 넙치 양식장에서 질병의 증상이 보이는 중간 육성 단계의 넙치를 대상으로 다수의 Vibrio속 세균을 분리 동정하였으며 그 중에서 V. ichthyoenteri균이 높은 비율을 차지하고 있었다. 일반적으로 V. ichthyoenteri는 넙치의 자어기 장관백탁증의 원인균으로 잘 알려져 있으며, 미성어의 병어로부터 분리되었다는 점에서 여러 크기의 넙치 및 종묘 생산에 미치는 영향을 알고자 하였다. 본 연구는 미성어 넙치에서 분리된 균주그룹과 장관백탁증에 걸린 넙치 자어에서 분리한 V. ichthyoenteri 참조 균주 두 그룹간의 생화학적 및 생리학적 성상, 유전학적 특성을 비교 분석함으로서 분리 균주를 V. ichthyoenteri로 동정하고, 이들의 어병학적 특성을 조사하였다.실험 결과 시험 균주와 참조 균주간의 생화학적 특성과 생리학적 성상이 거의 동일한 것으로 나타났다.본 연구에서 분리 균주와 참조 균주의 16S-23S rRNA intergenic space (IGS) region을 cloning하여 염기 서열을 분석한결과 3개의 참조 균주와 19개의 분리 균주들은 V. ichthyoenteri 참조 균주와 99.1 ~ 100% 동일하였으며 V. ichthyoenteri는 3개 이상의 PCR products를 보였다. 이들 각각에 대한 tRNA type을 분석한 결과, no-tRNA, tRNAGlu(TTC) type 그리고 tRNAIle(GAT)와 tRNAAla(TGC) 를 coding하는 3 가지 tRNA type을 밝혔다.

양식 넙치, Paralichthys olivaceus에서 분리된 Edwardsiella tarda, Vibrio spp., Streptococcus spp.의 항균제 내성 경향 (Antimicrobial resistance of Edwardsiella tarda, Vibrio spp., and Streptococcus spp. isolated from olive flounder Paralichthys olivaceus)

  • 김명석;서정수;박명애;조지영;황지연;권문경;정승희
    • 한국어병학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.37-45
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    • 2010
  • 넙치 병원성 세균에 대한 항균제 내성율과 다제내성을 조사하고자 연구를 수행하였다. 우리나라의 양식 넙치 (Paralichthys olivaceus)에서 161균주가 분리되었고 분리균주에는 Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) 그리고 Streptococcus spp. (n=10)가 포함되었다. E. tarda 분리균주는 tetracycline (84.4%)과 oxolinic acid (71.9%)에 높은 내성율을 나타내었고 V. ichthyoenteri와 Vibrio spp.는 ampicillin (94.6%, 81.5%)과 tetracycline (56.8%, 42.6%) 순서로 높은 내성율을 나타내었다. S. parauberis 분리균주는 ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%), erythromycin (35.7%) 순서로 높은 내성율을 보였다. E. tarda의 84.4%, V. ichthyoenteri의 73.0%, Vibrio spp.의 57.4%, S. parauberis의 42.8% 그리고 Streptococcus spp.의 70.0%가 2종류 이상의 항균제에 다제내성을 나타내었다.

오배자(Rhus javanica) 추출물의 어병세균 Vibrio ichthyoenteri와 Streptococcus iniae에 대한 항균활성 (Antibacterial Activity of Rhus javanica against the Fish Pathogens Vibrio ichthyoenteri and Streptococcus iniae)

  • 김경훈;김아라;조은지;주성제;박종훈;문지영;염종화;김태훈;권현주;이현태;김영만;이은우
    • 한국수산과학회지
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    • 제47권1호
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    • pp.18-22
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    • 2014
  • The antibacterial activities of methanol extracts of 19 commercial herbal medicines were measured against the fish pathogens Vibrio ichthyoenteri and Streptococcus iniae, which cause several fish diseases. Rhus javanica showed the strongest antibacterial activity against V. ichthyoenteri and S. iniae. The methanol extract of R. javanica was extracted further using several organic solvents with different polarities. The extract from the ethyl acetate fraction showed strong activity against both fish pathogens. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the R. javanica extract was $32{\mu}g/mL$ for V. ichthyoenteri and $128{\mu}g/mL$ for S. iniae. Further purification and isolation of the active compound (s) responsible for these activities and further study of the synergistic effect using combinations of antibiotics against pathogenic bacteria are needed.

Chitosan Based Silver Nanocomposites (CAgNCs) Display Antibacterial Effects against Vibrio ichthyoenteri

  • Beom, Seo Seung;Shin, Sang Yeop;Dananjaya, S.H.S.;De Silva, A.B.K.H.;Nikapitiya, Chamilani;Cho, Jongki;Park, Gun-Hoo;Oh, Chulhong;Kang, Do-Hyung;De Zoysa, Mahanama
    • 한국임상수의학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.261-267
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    • 2017
  • The aim of this study was to investigate the antibacterial properties of chitosan silver nanocomposites (CAgNCs) using pathogenic Vibrio ichthyoenteri as a bacterial model. Results of agar disc diffusion and turbidimetric assays showed that CAgNCs could inhibit the growth of V. ichthyoenteri in concentration dependent manner. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of CAgNCs were 75 and $125{\mu}g/mL$, respectively. Furthermore, CAgNCs treatment induced the reactive oxygen species (ROS) level in V. ichthyoenteri cells in concentration and time dependent manner, suggesting that it generates oxidative stress, leading to bacterial cell death. The field emission scanning electron microscope (FE-SEM) images of CAgNCs treated V. ichthyoenteri exhibited strong cell membrane damage than un-treated control bacteria. MTT assay results showed the highest cell viability (22%) at $75{\mu}g/mL$ of CAgNCs treated bacteria samples. The results from this study suggest that CAgNCs is a potential antibacterial agent to control fish pathogenic bacteria.

양식 환경이 강도다리, Platichthys stellatus의 혈액 생화학적 성상 및 lysozyme 활성에 미치는 영향 (Effects of aquaculture conditions on blood chemistry property and lysozyme activity of starry flounder, Platichthys stellatus)

  • 권문경;임한규;민병화;변순규;김이청;조병열
    • 한국어병학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.281-289
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    • 2007
  • 어병세균인 Edwardsiella tarda, Vibrio ichthyoenteri, Streptococcus iniae의 강도다리에 대한 병원성, 염분농도가 어병세균의 성장 및 강도다리의 lysozyme 활성과 사육수온, 밀도가 강도다리에 미치는 영향을 조사하였다.연구 결과, E. tarda에 대해서는 병원성이 높았으나, V. ichthyoenteri와 S. iniae에 대해서는 항병력이 높았다.염분농도에 따른 균의 증식속도 조사 결과, E. tarda와 S. iniae는 저염분에서 증식속도가 빨랐으나, V. ichthyoenteri는 저염분에서 낮았으나, 유의적인 차이는 보이지 않았다. 저염분 사육에서 강도다리의 lysozyme 활성은 일반해수구에 비하여 다소 낮게 나타났으나 유의적인 차이는 보이지 않았다.사육수온, 밀도가 강도다리에 미치는 영향을 조사한 결과, 수온은 26℃ 이하, 밀도는 수조저면적의 100% 이하가 강도다리의 생리학적 성상 및 lysozyme 활성이 높게 나타났다.

국내산 봉독의 어류병원성 세균에 대한 항균활성 (Antimicrobial activity of honeybee venom against fish pathogenic bacteria)

  • 한상미;이광길;박관규
    • 한국어병학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.113-120
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    • 2011
  • 본 연구에서는 양식 넙치의 주요 어병세균인 E. tarda, V. ichthyoenteri와 S. iniae에 대한 국내산 꿀벌로부터 분리한 봉독의 항균활성을 검색하였다. 그 결과 봉독은 폐사 납치로부터 분리한 그람음성균인 E. tarda, V. ichthyoenteri와 양성균인 S. iniae 모두에서 강한 항균 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 봉독은 E. tarda와 V. ichthyoenteri에 대하여 최소발육저지 농도는 각각 17.6 ${\mu}g$/ml, 1.76 ${\mu}g$/ml 였으며, 최소살균 농도는 34.6 ${\mu}g$/ml, 6.8 ${\mu}g$/ml, 항균력 지속시간은 5시간, 6시간으로 측정되었다. 또한 그람 양성균인 S. iniae에 대한 최소발육저지농도는 3.49 ${\mu}g$/ml, 최소살균농도는 11 ${\mu}g$/ml였으며, 항균력지속시간은 7시간으로 봉독은 매우 강한 증식 및 살균 억제력을 보였다. 뿐만 아니라, 다양한 pH 조건하에서도 향균활성이 유지되는 것으로 확인되었다.