• 한국어병학회지
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• 제19권2호
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• pp.119-126
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• 2006

본 연구에서는 Vibrio harveyi의 주요 병원성 인자로 알려져 있는 ECPs를 분리하는 적정 조건을 제시하고자 하였다. 5 개의 분리균주 (FF8, FF10, FR1, FR2 and FT1 strain)와 2 개의 참조균주 (ATCC 35084 및 ATCC 14126)의 ECPs를 다양한 조건에서 분리해 본 결과, 1.5% NaCl 첨가 TSA 배지에서 25℃, 24 시간 배양하는 것이 가장 좋으며, ECPs 분리시의 buffer system은 pH 8.0이 적정한 것으로 나타났다. 나아가 우리 나라에서 분리한 5 개의 분리 균주들의 주요 ECPs 성분이 serine protease인 것으로 조사되었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권1호
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• pp.23-33
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• 2009

V. harveyi는 양식산업에서 중요한 해산 양식 어류와 새우류에 많은 폐사를 일으키는 병원체로 알려져 있다. 본 연구에서는 해산 양식어류에서 분리된 11개 strain의 Vibrio harveyi의 생화학적, 생리학적, 혈청학적, 면역학적 특성을 조사 하였다. 생화학적 특성과 TCBS agar에서 집락의 색깔이 달라 표현형의 차이가 있었고 V. harveyi 분리균주들은 편모항원에 의해 4개 이상의 혈청형으로 구분되었다. 어류에서 분리된 V. harveyi는 western blotting으로 26-34 kDa 사이에 동일한 크기의 major protein을 갖는 group A로 구분 되었고 넙치에 대하여 표준균주인 V. harveyi KCCM40866 보다 강한 병원성을 갖고 있었다. V. harveyi C05011로 면역 유도된 넙치는 다른 group A 균주를 인위감염 시켰을 때 높은 항병력을 나타내었다.

• 한국어병학회지
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• 제20권3호
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• pp.237-247
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• 2007

본 연구에서는 우리 나라에서 분리된 Vibrio harveyi의 미생물학적 특성을 조사하여 V. harveyi 연구의 기초적인 정보를 제공하고자 하였다. V. harveyi는 염분 농도 3%, 배양 온도 30℃에서 가장 잘 증식하였다. Swarming 운동은 1.5% NaCl 첨가 TSA에서 가장 활발하였으며, swarming 운동시 균체는 길어지며, 짧고 곧은 다수의 lateral flagella가 생성된 것을 확인하였다. 우리나라에서 분리된 V. harveyi는 luminometer로 직접 검출하는 방법과 luciferase gene을 검출하는 방법 모두에서 음성으로 나타나, 발광능이 없는 것으로 조사되었다. V. harveyi의 균체 단백질은 50 kDa 부근의 major protein을 가지며, 균주에 따라 40 kDa 근처의 상이한 band pattern을 보였다.

• 한국어병학회지
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• 제20권2호
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• pp.99-108
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• 2007

본 연구는 V. harveyi의 luminescence 유무와 해수 어류에 대한 병원성의 관계를 알아보고자 non-luminous V. harveyi 와 luminous V. harveyi 분리 균주로 조피볼락에 대한 병원성 시험을 시행하였다. 시험 균주 V. harveyi 모두 haemolytic activity를 나타내었으며, 어체 내 생존능은 non-luminous V. harveyi 분리 균주 FR 2가 강한 생존능을 나타내었다. 또한 조피볼락에 인위 감염시, non-luminous V. harveyi 분리 균주 FR 2가 강한 병원성을 나타내었으며 luminous V. harveyi 분리 균주 VIB 391은 낮은 병원성을 나타내었다. 결론적으로 조피볼락에서는 non-luminous V. harveyi 분리 균주 FR 2가 강한 병원성을 나타내었으며 luminous V. harveyi 분리 균주 VIB 391은 매우 약한 병원성을 나타내어 luminescence의 유무에 따라 해수 어종에 대한 병원성의 차이가 있을 것으로 생각된다

• 수산해양교육연구
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• 제26권6호
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• pp.1366-1372
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• 2014

본 연구의 목적은 해산어류와 갑각류에 심각한 위해를 끼치고 있는 V. harveyi에 대한 백신개발을 위하여 V. harveyi 백신생산에 적합한 배양배지를 탐색하고 적정 투여량을 조사하며 또한 S. parauberis 백신과 혼합백신의 형태로 투여시 백신효능에 대해 조사하는 것이다. 이를 위하여 2-2'-dipyridyl이 첨가되거나 첨가되지 않은 TSB와 BHIB에 배양 후 FKC 백신을 제작한 후 넙치에 투여하여 응집항체가의 생산변화와 공격실험에서의 상대생존율을 비교분석하였다. 또한 V. harveyi 백신의 적정 투여량을 정하기 위하여 어체중 kg 당 10mg 또는 20mg을 투여하여 면역반응을 비교하였으며 S. parauberis 백신을 혼합한 백신을 투여한 후 면역반응을 비교하였다. 그 결과 2-2'-dipyridyl이 들어간 TSB와 BHIB에 배양된 V. harveyi 백신은 응집항체형성과 방어력에서 차이를 보이지 않았다. 또한 백신 투여량에 따른 응집항체가에 있어서 큰 차이는 없었으나 어체중 kg 당 10mg을 투여한 실험구가 조금 높은 방어력을 나타내었다. S. parauberis 백신과 혼합한 dual 백신을 투여시 V. harveyi 백신만을 단독으로 투여했을 때와 비교해 방어력이 현저히 증가하였으며 특히 어체중 kg당 두가지 백신을 각각 10mg씩 혼합하여 투여한 실험구에서는 28일동안 폐사가 전혀 일어나지 않아 백신효능이 매우 뛰어난 것으로 나타났다. 결론적으로 넙치를 위한 V. harveyi 백신을 개발할 때는 2-2'-dipyridyl가 첨가된 TSB에 배양 후 제작된 V. harveyi 백신을 어체중 kg당 10mg의 투여량으로서 S. parauberis 백신과 혼합투여하는 것이 효능과 경제적인 면에서 바람직하다고 생각된다.

• 한국수산과학회지
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• 제48권5호
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• pp.661-667
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• 2015

Vibrio harveyi is one of the most serious pathogens causing vibriosis in larval and grow-out shrimp culture. This study was performed to investigate the bactericidal effect of a monopersulfate compound against V. harveyi and its toxicity in Litopenaeus vannamei. The monopersulfate compound was prepared at 0, 0.15, 0.3, 0.6, 1.2, and 2.4 ppm for the bactericidal efficacy study, and then V. harveyi was added at a rate of 1×10⁶ CFU/mL. Subsequently, five shrimps/dose were added to the water bath. The other groups of shrimp were exposed to monopersulfate, but not to the bacterium. None of the shrimps exposed to any of the monopersulfate treatment doses without bacteria died, and no changes in their movement were detected for 7 days. However, shrimps exposed to bacteria without monopersulfate showed decreased movement and lethargy, but no death. The total number of other bacteria and V. harveyi at the different concentrations decreased significantly by 4-6 log values compared to that in the bacterial control group. The monopersulfate compound completely inhibited V. harveyi growth beginning 1 h after exposure to 2.4 ppm. These results show that the monopersulfate compound is an efficient disinfectant against naturally occurring marine bacteria and V. harveyi without being toxic to shrimp.

• 수산해양교육연구
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• 제27권5호
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• pp.1508-1521
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• 2015

Vibrio harveyi is a pathogenic marine bacterium causing systemic symptoms resulting in mass mortalities in fishes and shrimps in aquaculture. Outer membrane proteins(OMPs) are related to the pathogenicity and thus good targets for diagnosis and vaccination for Gram negative bacteria. Recently vaccination strategies using the OMPs have been suggested to control vibriosis in several fish species. In this study, we have isolated V. harveyi from diseased marine fishes from different regions of Korea and investigated genetic variations of four OMP genes including OmpK, OmpU, OmpV and OmpW. Consequently, OmpK and U genes could be divided into 3 subgroups of type I, II, III and type A, B, C, respectively, without any correlation with geographical regions and species while OmpV and W were highly homologous. OmpW gene of V. harveyi FP4138 was fully sequenced and predicted the deduced amino acid sequence to form ${\beta}-barrel$ with hydrophobic channel. Indeed, the immunogenicity of recombinant OmpW produced in Escherichia coli was assessed by vaccinating flounder. As a result, the high antibody response with antibody titer of $4.2{\pm}0.7$ and protection with relative percent survival of 60% against artificial infection of V. harveyi were demonstrated. This result indicates that OmpW is a virulence related factor and it can be a vaccine candidate to prevent a high mortality caused by V. harveyi infection in olive flounder, Paralichthys olivaceus.

• 한국어병학회지
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• 제21권2호
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• pp.81-91
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• 2008

Vibrio harveyi, one of the major causal agent of vibriosis, affects a diverse range of marine vertebrates and invertebrates over a wide geographical area. The aims of this study were to investigate the characteristics of extracellular products (ECPs) from an isolate of the pathogenic non‐luminous V. harveyi and the luminous V. harveyi. And ECPs of V. harveyi were examined the pathogenicity to the black rockfish, Sebastes schlegeli, and histopathological traits of internal organs injected by ECPs. Four strains of V. harveyi cultures produced ECPs showing various enzymatic activites (caseinase, gelatinase, phospholipase, lipase, haemolysin). The ECPs showed strong cytotoxicity on macrophages of black rockfish, Sebastes schlegeli and olive flounder, Paralichthys olivaceus. Especially, the virulence of ECPs from the isolate of V. harveyi FR 2 was higher in the intraperitoneally injected black rockfish. Also, the ECPs of V. harveyi FR 2 caused the expansion of sinusoids in the liver, the activation of ellipsoid in the spleen and the sloughing of the epidermal cell in the intestine. It was suggested that the ECPs from V. harveyi play an important role in the pathogenicity process of the V. harveyi.

• 미생물학회지
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• 제45권4호
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• pp.430-434
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• 2009

세균 16S rRNA 유전자 염기서열은 분자계통분류, 진화역사 규명, 미생물 검출 등 다양한 목적으로 이용되어 왔다. 세균 제놈(genome)은 multiple rRNA 오페론을 갖고 있으며, 이들 유전자 염기서열은 일부 변이가 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 Vibrio 속의 16S rRNA 유전자 염기서열을 이용하여 세포 내 16S rRNA의 이질성을 규명하였다. 분석은 GenBank 자료 중에서 제놈 염기서열 annotation이 완료된 V. cholerae, V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. splendidus, V. vulnificus를 이용하여 실시하였다. Vibrio 속은 1번 염색체에 7~10개의 16S rRNA 유전자 copy를 갖고 있으며, 이들의 세포 내 유전자 변이는 0.9% 이하 상이성(99.1%이상 DNA 상동성)을 보였다. 2번 염색체에서는 16S rRNA 유전자가 1개 이하로 존재하였다. 유전체내 16S rRNA 유전형은 최소 5개(V. vulnificus #CMCP6)에서 최대 8개(V. parahaemolyticus #RIMD 2210633, V. harveyi #ATCC BAA-1116)로 조사되었다. 본 결과는 Vibrio 속의 16S rRNA 유전자 염기서열이 높은 이질성을 갖는 것을 제시해 준다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제9권3호
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• pp.123-128
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• 2006

An epizootic causing mortality among cultured marine finfishes occurred in 1999 in the province of Kyoungsang, Korea. The disease was characterized by the presence of enterocele, abdominal swelling, and gastroenteritis. The causative bacteria were isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus), black rockfish (Sebastes schlegeli), turbot (Scophthalmus maximus) and the rearing water. These bacteria showed swarming activity on agar plates and yellowish or greenish colonies on thiosulfate-citrate-bile salts-sucrose (TCBS) agar plates, but no luminescence. The pathogen was identified as Vibrio harveyi based on morphological and biochemical characteristics and the sequence of l6S rDNA. The lethal doses (LD$_{50}$) of olive flounder and black rockfish were estimated to be $1.24\times10^6-1.36\times10^8$ and $3.24\times10^5-5.8\times10^7$ CFU/fish respectively following intraperitoneal injection.