우리나라 연안해역의 해수나 어패류에서 V. cholerae non-O1의 분포를 밝힘과 동시에 1996년 4월부터 동년 11월까지 분리된 환경분리주와 1984년부터 1996년까지 서울 및 부산소재 각 대학병원에서 환자로부터 분리된 총 55균주를 대상으로 생화학적 특성과 혈청형을 분석하였다. V. cholerae non-O1은 한국의 연안에서 206거체중 21검체(10%)에서 분리되었으나 V. cholerae O1 및 O139는 검출되지 않았다. 지역별로는 군산에서 16%로 검출률이 제일 높았다. 환경이나 환자에서 분리된 V. cholerae non-O1 55 균주에 대한 혈청형 분석결과 15종류의 혈청형이 검출되었는데 환경분리주 12종류, 환자분리주에서는 6종류이였다. 그런데 환경분리주에서는 O14가 68.3%(28/41)이였고, 환자분리주에서는 O8이 약 36%(5/14)로 많았고 그다음으로 O2와 O10등의 순이었다. 그리고 O2, O10와 O39는 환경 및 환자분리주에서 동시에 검출되었다.
금강 하구에서 분리한 용혈독소를 생산하는 V. mimicus와 유사하지만 분류되지 않은 기수성 Vibrio속으로 추정되는 균주 Vibrio sp. E10 (V. kunsan)의 세균학적 특징은 다음과 같다. 기본적인 생화학적 시험과 전자현미경 상의 형태에서는 V. mimicus와 유사하였지만 TCBS 배지 상의 colony 형태는 V. vulnifirus와 유사하였으므로 V. mimicus와는 차이를 보였다. Human과 sheep blood agar에서의 뚜렷한 용혈환과 rat에 피부혈관투과항진 작용으로 용혈독성이 있었으며, mouse에 대한 치사독성이 있었으므로 병원성이 확인되었다. 생육 가능한 환경 조건은 염도 0$\~$$4.5\%$, pH 6.2$\~$9.2, 온도 $14\~42^{\circ}C$이 었다. Vibrio sp. E10의 16S rDNA 염기서열은 10여종의 V. cholerae와 1종의 Vibrio mimicus의 염기서열과 $99\%$의 상동성을 보여 유사 종으로 판명되었다. 그러나 세균 자동동정기를 이용한 동정 결과, genus는 Vibrio 속으로 동정되었으나 species는 일치하는 균종이 없었다. 알려진 Vi-brio속 중에서 유사성이 높았던 V. mimicus와 비교해 볼 때 18종류의 항목이, V. cholerae와는 11종류의 항목이 다른 반응을 나타내어 미분류 균종으로 확인되었다.
Vibrio spp. are aquatic bacteria that are ubiquitous in warm estuarine and marine environments. Especially, V. vulnificus and V. cholerae are currently known to cause potentially fatal infections in humans. This study investigated the distribution and antibiotic resistance of V. vulnificus and V. cholerae isolated from coastal areas of Gyeongsangnam-do in 2022. A total of 252 samples of water, shellfish and coastal sediment were collected from 7 locations along the coast, and 124 samples of fishery products were collected from markets. Among the 252 samples, forty-four V. vulnificus (11.7%) and fourteen V. cholerae non-O1/non-O139 (3.7%), none of which carried the ctx gene, were isolated. Out of the 124 samples, 6 (4.8%) tested positive for V. vulnificus and V. cholerae was not detected. The isolation rates of V. vulnificus and V. cholerae showed a significant correlation with environmental factors such as seawater temperature and salinity. In an antibiotic resistance test, V. vulnificus was susceptible to amikacin, gentamicin, imipenem trimethoprim/sulfamethoxazole, and ciprofloxacin, but resistant to cefoxitin (100.0%), followed by tetracycline (9.1%). Multidrug resistance was also observed. Continuous monitoring of Vibrio pathogens with water temperature and salinity is expected to help reduce the outbreaks, and rational use of antibiotic agents is needed to prevent the accession of antibiotic-resistant microorganisms in aquatic ecosystems.
Rambhatla, Prashanthi;Kumar, Sanath;Floyd, Jared T.;Varela, Manuel F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권9호
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pp.914-920
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2011
Vibrio cholerae utilizes mannitol through an operon of the phosphoenolpyruvate-dependent phosphotransferase (PTS) type. A gene, mtlD, encoding mannitol-1-phosphate dehydrogenase was identified within the 3.9 kb mannitol operon of V. cholerae. The mtlD gene was cloned from V. cholerae O395, and the recombinant enzyme was functionally expressed in E. coli as a $6{\times}$His-tagged protein and purified to homogeneity. The recombinant protein is a monomer with a molecular mass of 42.35 kDa. The purified recombinant MtlD reduced fructose 6-phosphate (F6P) using NADH as a cofactor with a $K_m$ of $1.54{\pm}0.1$ mM and $V_{max}$ of $320.8{\pm}7.81\;{\mu}mol$/min/mg protein. The pH and temperature optima for F6P reduction were determined to be 7.5 and $37^{\circ}C$, respectively. Using quantitative real-time PCR analysis, mtlD was found to be constitutively expressed in V. cholerae, but the expression was up-regulated when grown in the presence of mannitol. The MtlD expression levels were not significantly different between V. cholerae O1 and non-O1 strains.
Vibrio cholerae균은 자연적으로 외부 유전자를 받아들이는 능력이 있으므로, 종간 수평적 유전자 전달 작용(LGT)을 받을 것으로 예상된다. 본 연구는 인체에 질병을 일으키는 3종의 비브리오균 사이에서 일어나는 LGT 현상의 정량적 측면들을 분석하였다. V. cholerae N16961, V. parahaemolyticus RIMD2210633, V. vulnificus CMCP6, Escherichia coli K12 substrain MG1655의 유전체 염기서열을 분석하여 4개의 유전체에 모두 존재하는 단백질 발현 유전자들의 4개 일조를 결정하였다. 각 조의 4개 유전자의 계통수를 작성하는 분석을 통하여, 다른 조들 간의 계통성의 일치성과 불일치성을 결정하고, 수직적 계통성과 수평적 계통성을 구분하였다. 약 70%의 조에서 계통수가 확정될 수 있었으며, 그 중 75%는 서로 일치하는 계통성을 보였고, 25%는 LGT 계통수를 보였다. 이 결과에 따르면, 비브리오균의 LGT는 다른 세균 분류균의 속보다는 과단위에서 발생하는 빈도의 LGT계통수를 보였다. 염색체별로 관찰하였을 때, 유전자 제공자별로 LGT가 집중되는 현상이 일부 관찰되었고, V. cholerae 균주의 작은 염색체에서는 염색체의 약 절반 길이에 해당하는 부분에서 제공자별 LGT 위치들이 집중되는 현상을 보였다. 이런 결과는 유전자 제공자에 따라 선택성이 반복적으로 작용하거나, 대규모의 LGT가 있다는 가설을 수립하게 하였으며, 유전자 제공자별로 LGT 유전형질이 선택성을 띄게 되는 원인과 그 현상이 비브리오균의 진화에 미치는 영향에 대한 연구의 필요성을 제시하였다.
The pathogenic Vibrio genus contains halophilic bacteria that are distributed in marine and freshwater environments. Vibrio cholerae, Vibrio vulnificus, and Vibrio parahaemolyticus are potent human pathogens and leading causes of septicemia, wound infection, and seafood-borne gastroenteritis. The aim of this study was to investigate the presence of pathogenic Vibrio species in seawater off the west coast of Korea. Sixty-four seawater samples were obtained from different sites in Gomso Bay and Byeonsan from April 2018 to November 2018. Pathogenic Vibrio species were detected using a combination of most probable number (MPN)-polymerase chain reaction methods. V. cholerae, V. vulnificus, and V. parahaemolyticus were found in 0.0%, 20.3%, and 65.6% of seawater samples, respectively. Quantitative results revealed 3.6-23 MPN/100 mL of V. vulnificus, and 3.6-930 MPN/100 mL of V. parahaemolyticus in the samples. Overall, these results provide new insight into the necessity for seawater sanitation in Gomso Bay and Byunsan; they also provide evidence that will help reduce outbreaks of seafood-borne illness caused by pathogenic Vibrio species.
Bacillus anthracis, Vibrio cholerae, Variola virus and Shigella dysenteriae are classified as category A and B biological weapons. In this study suggest that 4 genes of Bacillus anthracis, 2 genes of Vibrio cholerae, 1 gene of Variola virus and 1 gene of Shigella dysenteriae were detective 50~500 fg of target DNA per reaction using real-time PCR based assay. Also analytical specificity did not show any cross-reactivity with other related bacteria. Reliable and one reaction could be effective early diagnostic and treatment for detection of unknown samples.
패류 중 소비량이 높은 굴에서의 고병원성 Vibrio균(V. vulnificus와 V. cholerae)의 식중독 발생 가능성을 분석하기 위하여 위해평가를 실시하였다. 남해권역, 서해권역, 수도권에서 유통되고 있는 굴 88개를 채취하여 V. vulnificus와 V. cholerae의 오염실태를 조사하고, 생굴에서의 V. vulnificus와 V. cholerae의 생장 경향을 관찰하였다. 2017년의 국민건강영양조사 데이터를 활용하여 생굴의 섭취자 비율 및 섭취량을 조사하였으며, 생굴 섭취로 인한 V. vulnificus와 V. cholerae의 식중독 발생 가능성을 분석하기 위해 @RISK를 통해 위해평가를 실시하였다. 88개의 생굴에서 V. vulnificus와 V. cholerae는 검출되지 않아 Beta distribution과 자연로그를 이용한 식을 통해 초기오염수준을 추정하였다. 그 결과 두 세균 모두 -3.6 Log CFU/g으로 생굴에 오염되어 있는 것으로 추정되었다. 생굴에 bioaccumulation된 V. vulnificus와 V. cholerae는 생장하지 않고 초기 접종 수준을 유지하는 것으로 확인되었다. 생굴을 섭취했다고 응답한 사람은 7,167명 중 25명이었으며, 따라서 섭취자 비율은 0.35%로 나타났다. 섭취량에 대한 최적확률분포는 exponential distribution으로 나타났으며 생굴의 평균 섭취량은 66.8 g으로 확인되었다. V. vulnificus와 V. cholerae의 용량-반응 모델은 Beta-Poisson model을 사용하였다. 이상의 데이터를 이용하여 위해평가 시뮬레이션을 개발하고 분석하였다. 초기오염수준으로 오염된 생굴을 바로 섭취함으로써 발생할 수 있는 식중독발생 가능성은 V. vulnificus의 경우 평균 9.08×10-15, V. cholerae는 8.16×10-13이며, 섭취자 비율이 식중독 발생 가능성에 가장 큰 영향을 미치는 것으로 확인되었다.
Islam, Md. Saiful;Shahik, Shah Md.;Sohel, Md.;Patwary, Noman I.A.;Hasan, Md. Anayet
Genomics & Informatics
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제13권2호
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pp.53-59
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2015
In developing countries threat of cholera is a significant health concern whenever water purification and sewage disposal systems are inadequate. Vibrio cholerae is one of the responsible bacteria involved in cholera disease. The complete genome sequence of V. cholerae deciphers the presence of various genes and hypothetical proteins whose function are not yet understood. Hence analyzing and annotating the structure and function of hypothetical proteins is important for understanding the V. cholerae. V. cholerae O139 is the most common and pathogenic bacterial strain among various V. cholerae strains. In this study sequence of six hypothetical proteins of V. cholerae O139 has been annotated from NCBI. Various computational tools and databases have been used to determine domain family, protein-protein interaction, solubility of protein, ligand binding sites etc. The three dimensional structure of two proteins were modeled and their ligand binding sites were identified. We have found domains and families of only one protein. The analysis revealed that these proteins might have antibiotic resistance activity, DNA breaking-rejoining activity, integrase enzyme activity, restriction endonuclease, etc. Structural prediction of these proteins and detection of binding sites from this study would indicate a potential target aiding docking studies for therapeutic designing against cholera.
Eun Jin Kim;Jonghyun Bae;Young-Jun Ju;Do-Bin Ju;Donghyun Lee;Seonghyeon Son;Hunseok Choi;Thandavarayan Ramamurthy;Cheol-Heui Yun;Dong Wook Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제32권11호
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pp.1396-1405
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2022
Cholera remains a major global public health problem, for which oral cholera vaccines (OCVs) being a valuable strategy. Patients, who have recovered from cholera, develop antibody responses against LPS, cholera toxin (CT), toxin-coregulated pilus (TCP) major subunit A (TcpA) and other antigens; thus, these responses are potentially important contributors to immunity against Vibrio cholerae infection. However, assessments of the efficacy of current OCVs, especially inactivated OCVs, have focused primarily on O-antigen-specific antibody responses, suggesting that more sophisticated strategies are required for inactivated OCVs to induce immune responses against TCP, CT, and other antigens. Previously, we have shown that the toxT-139F allele enables V. cholerae strains to produce CT and TCP under simple laboratory culture conditions. Thus, we hypothesized that V. cholerae strains that express TCP via the toxT-139F allele induce TCP-specific antibody responses. As anticipated, V. cholerae strains that expressed TCP through the toxT-139F allele elicited antibody responses against TCP when the inactivated bacteria were delivered via a mouse model. We have further developed TCP-expressing V. cholerae strains that have been used in inactivated OCVs and shown that they effect an antibody response against TcpA in vivo, suggesting that V. cholerae strains with the toxT-139F allele are excellent candidates for cholera vaccines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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