• 제목/요약/키워드: URP primers

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URP-PCR핵산지문에 의한 눈꽃동충하초 (Paecilomyces japonica.)와 번데기동충하초(Cordypces militaris) 유전적 다양성분석 (Genetic Diversity of Paecilomyces japonica and Cordypces militaris Strains by URP-PCR Fingerprinting)

  • 김종군;강희완
    • 한국균학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.180-184
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    • 2011
  • 본 연구는 URP-PCR 핵산지문법을 이용한 Paecilomyces spp.와 Cordyceps spp.의 종간, 종내 유전적 다양성분석을 실시 하였다. 12종류의 20mer의 URP primer가적용된 바 URP2F, URP2R, URP9F, URP4R, URP17R는 종간에 특이적인 PCR다형성밴드를 형성하였으며 Cordypces militaris 균주간에는 4가지 type의 PCR 다형성이 관찰되었다. 그러나 Paecilomyces japonica의 균주내에는 동일한 PCR 다형성을 나타내었다. URP-PCR profile을 이용하여 경동시장에서 수집한 미 동정 동충하초를 동정 할 수 있었다.

Random amplified polymorphic DNA analysis of bacterial pathogens using universal rice primers

  • Monoldorova, Sezim;Kim, Jinsol;Kim, Joon Hee;Jeon, Bo-Young
    • 한국동물위생학회지
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    • 제40권1호
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    • pp.1-6
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    • 2017
  • Molecular typing of pathogenic microorganisms is important for epidemiological investigation of infectious disease outbreaks. In this study, we applied Universal Rice Primers (URP) that were originated from repetitive sequences in rice chromosomal DNA to random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis of pathogenic bacteria such as Escherichia coli, Listeria monocytogenes, and Salmonella sp. Of the twelve URP primers examined to date, seven primers (URP-2, -3, -4, -5, -6, -8, and -9) generated reproducible and polymorphic PCR products ranging from 1 to 13 bands. One of them, URP-6 was very effective in differentiating seven E. coli serotypes, seven L. monocytogenes clinical isolates, and eight Salmonella subspecies (ssp.) serovars. The results thus indicate that RAPD analysis using URP primers might be useful in typing bacterial pathogens including E. coli, L. monocytogenes, and Salmonella strains.

국내 포도나무 혹병(Agrobacterium vitis) 균주의 유전적 다양성 (Genetic Diversity of Agrobacterium vitis Strains in Korea)

  • 김종군;최재을;강희완
    • 식물병연구
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    • 제13권3호
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    • pp.137-144
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    • 2007
  • 거봉 포도나무에 혹병을 일으키는 A. vitis 균주간의 DNA 다양성 평가를 하기 위하여 12종류의 URP primer 적용 성을 조사한 결과 URP1F, URP2F, URP2R, URP4R, URP17R primer가 균주 간 DNA 다형성검정에 유용하였다. 국내외에서 분리한 59 A. vitis 균주를 URP-PCR 증폭하였던 바 균주간의 매우 다양한 PCR 다형성 밴드를 형성 하였으며 12 strain type으로 나눌 수 있었으며 거봉포도로부터 분리된 A. vitis 균주는 4 strain type의 비교적 단순한 유전적 다양성으로 나타났으나, 거봉이외의 다른 포도 품종이나 국외에서 도입된 A. vitis 균주는 8 strain type의 많은 유전적 다양성을 보여 거봉품종 유래 국내 균주와는 PCR 다형성 type에 있어 차이점을 보였다. URP-PCR 다형성 밴드를 집괴 분석하여 UPGMA dendrogram을 작성한 결과 7개의 대 Group으로 분류할 수 있었으며, 그룹 간에는 $62{\sim}100$%까지 다양한 유전적 유사성이 나타났다.

형태적 특성과 PCR다형성 분석에 의한 국내 큰느타리버섯 계통의 유전적 다양성 분석 (Genetic Diversity of Pleurotus eringii Strains in Korea Based on Morphological Characteristics and PCR Polymorphism)

  • 전선정;김종군;김금희;지정현;서건식;강희완
    • 한국균학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.19-27
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    • 2009
  • 25개의 큰느타리버섯 균주를 국내외의 다양한 지역에서 수집하여 본 실험에 사용하였다. PER-007과 PER-012균주는 다른 균주와 비교하여 볼 때 PDA 배지상에서 특징적인 균총 형태를 보였으나 대부분 균주간 유사한 균사생장률을 보였다. 자실체 유도 및 생육 실험에서 PER-007균주는 자실체가 형성 되지 않았고 PER-012균주의 발이가 되었으나 이후 성숙 자실체로 성장하지 않았으며 그 외의 공시한 균주의 자실체 대부분의 갓모양은 볼록반구형, 평판구형 등 다양하게 나타났다. URP primer의 PCR 반응 조건은 $48^{\circ}C$에서 $52^{\circ}C$의 annealing 온도에서 높은 다형성 밴드를 관찰할 수 있었으며 25개의 P. eringii strains의 다형성은 11개의 URP primer 중 URP1F, URP2R, URP2F, URP4R, URP6R, URP9F, URP17R primer에서 계통간 PCR 다형성 밴드를 형성하였다. URP-PCR다형성밴드를 기초로 하여 유전적 유연관계를 분석한 결과 P. eringii strain들은 $76%{\sim}100%$정도의 유전적 유사도를 가지는 3개의 주요 group으로 나눌 수 있었으며 PER-007과 PER-017균주는 outgroup으로 원연관계를 형성하였다.

Pathogenic and Molecular Characteristics of Agrobacterium vitis strains isolated from Grapevine in Korea

  • Kim, J.G.;Kim, S.H.;Choi, J.E.;Lee, Y.K.;Kang, H.W.
    • 한국식물병리학회:학술대회논문집
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    • 한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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    • pp.120.2-120
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    • 2003
  • Agrobacterium vitis is a causal agent of crown-gall disease on grapevine. In Korea, grapevine variety (GeoBong) have severely been infected by the bacteria since stems of the variety were buried in soil for overwintering. Infection ratio over 70-80% was observed on 7 years old GeoBong grapevine in Ansung and Cheonan. PCR specific primers for A. vitis strains were designed using nucleotide sequences of vir A gene in Ti-Plasmid, pheA gene in chromosomal DNA and a URP-PCR polymorphic band. Three hundred bacterial strains were isolated from the different 80 galls formed on GeoBong grapevine in Cheonan and Ansung of Korea and were screened to identify A. vitis using the three specific PCR primers for Agrobacterium vitis. Twenty-four bacterial strains that are detected by the primers were further confirmed by pathogenicity and biochemical methods. To investigate the genomic diversity of the bacterial strains, twenty primers of 20 mer referred to universal rice primers (URP) were applied for PCR fingerprinting, Of them, URP2R and URP2F primers could effectively be used to detect polymorphism within the bacterial strains.

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Universal Rice Primer (URP)-PCR에 의한 곰팡이 종의 유전적 다양성 검정 (Genetic Divesity Analysis of Fungal Species by Universal Rice Primer (URP)-PCR)

  • 강희완
    • 한국균학회지
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    • 제40권2호
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    • pp.78-85
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    • 2012
  • 20 mer의 URP primers 가 한국 재래적미의 반복배열 DNA 염기서열로부터 고안되어 다양한 곰팡이 종의 PCR 다형성검출에 적용 되어 왔다. URP-PCR 방법은 PCR반응중 $55^{\circ}C$이상의 고온에서 annealing반응을 함으로 하여 재생적인 PCR결과를 얻을 수 있으며 효모균류에서 담자균류의 고등 균류까지 33속, 142 종, 1,489 균주의 다양한 곰팡이 종의 유전체 DNA에 적용되어 그 유용성이 평가 되어 왔다. 본 논문은 URP-PCR의 특성과 지금까지 다양한 곰팡이 종 다양성 검정결과를 종합하여 보고 한다.

RAPD에 의한 감자 품종의 구분 (Discrimination of Potato Varieties by Random Amplified Polymorphic DNA Analysis)

  • 서효원;이정윤;조현묵;박영은;오승은
    • 원예과학기술지
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    • 제19권1호
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    • pp.29-33
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    • 2001
  • 감자 DNA의 다형성을 통한 품종 및 육종 계통의 구분이 가능한 특이적 분자 마커를 찾기 위해 URP primer를 이용한 RAPD 분석을 실시하였다. 8 가지의 감자 품종과 5가지의 감자 육종계통을 분석 재료로 이용하였으며, 이들 중 '조풍', '대관70호', '가원'과 '대관 72호'는 '수미', '남작', '남서'와 '대서'를 각각 모본으로 이용되어 육성되었으며, 다양한 표현형질에서 유사성을 가지고 있다. 따라서 생육단계별 표현형질들 만으로는 각각을 구분하기 곤란한 경우가 있다. 벼(Oriza sativa)의 repetitive sequence로부터 고안된 URP primer는 비교적 높은 annealing 온도를 가지며, 20 mer의 비교적 길이가 긴 RAPD용 primer로써 증폭산물의 다형성과 재현성이 높아 다양한 생물종의 구분이 가능한 것으로 보고되고 있다. 국내에서 상품화되어 시판되는 URP primer 들 중에 URP2, URP4, URP8 등이 감자에 적용될 수 있을 것으로 확인하였다. 전기영동된 DNA 밴드들의 유사성을 분석해본 결과 유전적 유사도와는 차이를 나타내고 있었다. 그러나 높은 재현성을 갖는 URP primer들에 의해 증폭된 DNA 밴드의 다형성은 감자의 종내변이를 구분할 수 있는 분자 마커로서 이용할 수 있을 것으로 확인되었다.

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PCR Based Detection of Phellinus linteus using Specific Primers Generated from Universal Rice Primer(URP) Derived PCR Polymorphic Band

  • Kang, Hee-Wan;Park, Dong-Suk;Park, Young-Jin;Lee, Byoung-Moo;Cho, Soo-Muk;Kim, Ki-Tae;Seo, Geon-Sik;Go, Seung-Joo
    • Mycobiology
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    • 제30권4호
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    • pp.202-207
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    • 2002
  • This study was carried out to develop specific primers for PCR detection of Phellinus linteus. Diverse genomes of 15 Phellinus spp. including five Phellinus linteus isolates were fingerprinted by Primer Universal rice primer(URP)1F. The URP-PCR pattern differentiated P. linteus isolates from other phellinus spp. A polymorphic band(2.8 kb), which is unique for P. linteus isolates, was isolated and sequenced. Twenty four-oligonucleotide primer pairs were designed based on information of DNA sequence. The primer set(PLSPF2/PLSPR1) amplified single band(2.2 kb) of expected size with genomic DNA from seven Phellinus linteus, but not with that of other Phellinus species tested. The primers could be used identically in both DNA samples from mycelium and fruit bodies. This specific primers could offer a useful tool for detecting and identifying P. linteus rapidly.

Genomic Differentiation Among Oyster Mushroom Cultivars Released in Korea by URP-PCR Fingerprinting

  • Kang, Hee-Wan;Park, Dong-Suk;Park, Young-Jin;You, Chang-Hyun;Lee, Byoung-Moo;Eun, Moo-Yong;Go, Seong-Joo
    • Mycobiology
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    • 제29권2호
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    • pp.85-89
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    • 2001
  • URP primers of 20 mer derived from repetitive sequence of rice were used to assess genetic variation of oyster mushroom consisting of 10 cultivars of Pleurotus ostreatus, two cultivars of P. florida and two cultivars of P. sajor-caju which were registered in Korea. URP2F and URP38F primers produced cultivar-specific PCR polymorphic bands in the Pleurotus species. UPGMA cluster analysis using the URP-PCR data showed that 14 Pleurotus cultivars are genetically clustered into large three groups. The URP-PCR data provided important information for more efficient breeding strategies of Pleurotus cultivars.

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RAPD와 URP를 이용한 심비디움 유전자원 유연관계 분석 (Analysis of Genetic Relationship among Cymbidium germplasms Using RAPD and URP)

  • 박부희;김미선;이영란;박필만;이동수;예병우
    • 화훼연구
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    • 제18권3호
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    • pp.201-206
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    • 2010
  • 심비디움속 유전자원 48품종에 대하여 RAPD와 URP를 이용하여 유전적 유연관계를 분석하였다. RAPD분석에는 10mer에 해당하는 random primer (Operon사) 80개를, URP는 20 mer에 해당하는 12종의 상용 primer를 이용하였다. 48 품종의 심비디움에는 34종의 동양 심비디움, 7종의 동서양란 교잡종, 7종의 서양 심비디움이 포함되어 있다. 선별된 41개의 random primer와 6개의 URP primer로부터 각각 407, 56개의 다형성 밴드를 획득하여 총 463개의 마커를 이용하였다. 이들 마커의 크기 범위는 0.4 kb 에서 1.5 kb 에 해당하였다. 유전적 유사도를 바탕으로 UPGMA clustering 프로그램을 이용하여 dendrogram을 작성하였는데 유전자원 48품종은 유사도 0.638 수준에서 총 4그룹으로 구분되었다.