The inhibition of osteoblast by glucocorticoid is recognized as its action mechanism of decreased bone formation. In this study, the effect of JY, Jahyulyangkeuntang, on the differentiation and mineralization of osteoblastic cells was investigated in the presence of dexamethasone. The cell counting, enzyme activity assay, MTT assay, collagen content assay were done to determine the cell proliferation, alkaline phosphatase(ALP) activity, bone martrix production, and cell apoptosis. JY enhanced the cell proliferation after the culture for 10 days. ALP activity and total protein synthesis, and intracellular collagen synthesis were increased when the cells were treated with JY. And JY restored calvarial cell function decreased by dexamethasone.
Kong, Jinhwa;Won, Jungim;Yoon, Jeehee;Lee, UnJoo;Kim, Jong-Il;Huh, Sun
Parasites, Hosts and Diseases
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제54권6호
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pp.751-758
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2016
This study aimed at constructing a draft genome of the adult female worm Toxocara canis using next-generation sequencing (NGS) and de novo assembly, as well as to find new genes after annotation using functional genomics tools. Using an NGS machine, we produced DNA read data of T. canis. The de novo assembly of the read data was performed using SOAPdenovo. RNA read data were assembled using Trinity. Structural annotation, homology search, functional annotation, classification of protein domains, and KEGG pathway analysis were carried out. Besides them, recently developed tools such as MAKER, PASA, Evidence Modeler, and Blast2GO were used. The scaffold DNA was obtained, the N50 was 108,950 bp, and the overall length was 341,776,187 bp. The N50 of the transcriptome was 940 bp, and its length was 53,046,952 bp. The GC content of the entire genome was 39.3%. The total number of genes was 20,178, and the total number of protein sequences was 22,358. Of the 22,358 protein sequences, 4,992 were newly observed in T. canis. Following proteins previously unknown were found: E3 ubiquitin-protein ligase cbl-b and antigen T-cell receptor, zeta chain for T-cell and B-cell regulation; endoprotease bli-4 for cuticle metabolism; mucin 12Ea and polymorphic mucin variant C6/1/40r2.1 for mucin production; tropomodulin-family protein and ryanodine receptor calcium release channels for muscle movement. We were able to find new hypothetical polypeptides sequences unique to T. canis, and the findings of this study are capable of serving as a basis for extending our biological understanding of T. canis.
Jiang, Qian;Yu, You-Cheng;Ding, Xiao-Jun;Luo, Yin;Ruan, Hong
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권5호
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pp.2273-2278
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2014
Purpose: The purpose of our study was to explore the molecular mechanisms in the process of oral squamous cells carcinoma (OSCC) development. Method: We downloaded the affymetrix microarray data GSE31853 and identified differentially expressed genes (DEGs) between OSCC and normal tissues. Then Gene Ontology (GO) and Protein-Protein interaction (PPI) networks analysis was conducted to investigate the DEGs at the function level. Results: A total 372 DEGs with logFCI >1 and P value < 0.05 were obtained, including NNMT, BAX, MMP9 and VEGF. The enriched GO terms mainly were associated with the nucleoplasm, response to DNA damage stimuli and DNA repair. PPI network analysis indicated that GMNN and TSPO were significant hub proteins and steroid biosynthesis and synthesis and degradation of ketone bodies were significantly dysregulated pathways. Conclusion: It is concluded that the genes and pathways identified in our work may play critical roles in OSCC development. Our data provides a comprehensive perspective to understand mechanisms underlying OSCC and the significant genes (proteins) and pathways may be targets for therapy in the future.
This study was performed to elucidate the effects of Gokajisilsosiho-Tang(GJST) on the lactic dehydrogenase(LDH) release, cell viability and activity, lipid peroxidation, DNA synthesis and the changes of total protein synthesis and GSH changes in vivo and in vitro in rat cultured hepatocytes from hydrogen peroxide$(H_2O_2)$-induced injury. The GJST extract had not an effect on cytotoxicity in all experimental results. The treatment of GJST extract of $160{\mu}g/ml$, $320{\mu}g/ml$ showed the significant effect to decrease LDH leakage induced by t-BHP in cultured rat hepatocytes. The higher concentration of GJST extract than $160{\mu}g/ml$, showed the inhibitory effect on decreasing cell viability induced by t-BHP. The treatment of t-BHP to rat cultured hepatocytes resulted in a concentration dependent increase in TBARS, in the presence of GJST extract the production of TBARS induced by hydrogen peroxide was inhibited concentration dependently, significantly inhibited at $80{\mu}g/ml$ of GJST extract and above. The GJST extract simutaneously present with t-BHP prevented the loss of total protein and GSH in a concentration dependent manner. These results suggested that GJST extract may play a hepatoprotective role in oxidative damage induced by hydrogen peroxide and a therapeutic potential of inhibiting liver injury.
In order to clarify the neuroprotective effect of Cornu Saigae Tataricae(CST) water extract on cultured mouse spinal motor neuron damaged by hydrogen peroxide (H₂O₂), MTT [3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay, LDH (Lactate Dehydrogenase) activity assay and SRB (Sulforhodamine B) assay were carried out after the cultured mouse spinal motor neuron were preincubated with various concentrations of CST water extract for 3 hours prior to exposure of hydrogen peroxide Cell viability of cultured mouse spinal motor neurons exposed to various concentrations of hydrogen peroxide for 6 hours was decreased in a dose-dependent manner. MTT50 values were 40 uM hydrogen peroxide. Cultured mouse spinal motor neurons in the medium containing various concentration of hydrogen peroxide for 6 hours showed increasing of LDH activity and decreasing of total protein synthesis. We know that hydrogen peroxide was toxic on cultured spinal motor neurons. Pretreatment of CST water extract for 3 hours following hydrogen peroxide prevented the hydrogen peroxide-induced neurotoxicity such as increasing of LDH activity and decreasing of total protein synthesis. These results suggest that hydrogen peroxide shows toxic effect on cultured spinal motor neurons and CST water extract is highly effective in protecting the neurotoxicity induced by hydrogen peroxide.
Our previous results showed that kisspeptin-10 (Kp-10) injections via intraperitoneal (i.p.) once daily for three weeks notably promoted the egg laying rate in quails. In order to investigate the mechanism behind the effects of Kp-10 on enhancing the egg laying rate in birds, this study focused on the alternations of lipids synthesis in liver after Kp-10 injections. 75 female quails (22 d of age) were allocated to three groups randomly, and subjected to 0 (control, Con), 10 nmol (low dosage, L) and 100 nmol (high dosage, H) Kp-10 injections via i.p. once daily for three weeks, respectively. At d 52, quails were sacrificed and sampled for further analyses. Serum $E_2$ concentration was increased by Kp-10 injections, and reached statistical significance in H group. Serum triglyceride (TG) concentrations were increased by 46.7% in L group and 36.8% in H group, respectively, but did not reach statistical significance, and TG contents in liver were significantly elevated by Kp-10 injections in a dose-dependent manner. Serum total cholesterol (Tch) concentrations significantly decreased in H group, while in H group the hepatic Tch content was markedly increased. The level of non-esterified fatty acid (NEFA), apolipoprotein A1 and B (apoA1 and apoB) were not altered by Kp-10 injections. The genes expression of sterol regulatory element binding protein-1 (SREBP-1), fatty acid synthetase (FAS), apolipoprotein VLDL-II (apoVLDL-II), cholesterol $7{\alpha}$-hydroxylase (CYP7A1) and vitellogenin II (VTG-II) were significantly up-regulated by high but not low dosage of Kp-10 injection compared to the control group. However, the expression of SREBP-2, acetyl-CoA carboxylase ($ACC_{\alpha}$), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA (${\Delta}9$) desaturase 1 (SCD1), apolipoprotein A1 (apoA1), fatty acid binding protein 2 (FABP2), 3-hydroxyl-3-methyl glutaryl-coenzyme A reductases (HMGCR), estrogen receptor ${\alpha}$, ${\beta}$($ER{\alpha}$ and ${\beta}$) mRNA were not affected by Kp-10 treatment. In line with hepatic mRNA abundance, hepatic SREBP1 protein content was significantly higher in H group. Although the mRNA expression was not altered, the content of $ER{\alpha}$ protein in liver was also significantly increased in H group. However, SREBP-2 protein content in liver was not changed by Kp-10 treatment. In conclusion, exogenous Kp-10 consecutive injections during juvenile stage significantly advanced the tempo of egg laying in quails, which was associated with the significant elevation in hepatic lipids synthesis and transport.
Anantasook, N.;Wanapat, M.;Cherdthong, A.;Gunun, P.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권6호
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pp.820-826
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2013
The objective of this study was to determine the effect of rain tree pod meal with palm oil supplementation on feed intake, digestibility, microbial protein synthesis and microbial populations in dairy cows. Four, multiparous early-lactation Holstein-Friesian crossbred (75%) lactating dairy cows with an initial body weight (BW) of $405{\pm}40$ kg and $36{\pm}8$ DIM were randomly assigned to receive dietary treatments according to a $4{\times}4$ Latin square design. The four dietary treatments were un-supplementation (control), supplementation with rain tree pod meal (RPM) at 60 g/kg, supplementation with palm oil (PO) at 20 g/kg, and supplementation with RPM at 60 g/kg and PO at 20 g/kg (RPO), of total dry matter intake. The cows were offered concentrates, at a ratio of concentrate to milk production of 1:2, and chopped 30 g/kg of urea treated rice straw was fed ad libitum. The RPM contained condensed tannins and crude saponins at 88 and 141 g/kg of DM, respectively. It was found that supplementation with RPM and/or PO to dairy cows diets did not show negative effects on feed intake and ruminal pH and BUN at any times of sampling (p>0.05). However, RPM supplementation resulted in lower crude protein digestibility, $NH_3$-N concentration and number of proteolytic bacteria. It resulted in greater allantoin absorption and microbial crude protein (p<0.05). In addition, dairy cows showed a higher efficiency of microbial N supply (EMNS) in both RPM and RPO treatments. Moreover, NDF digestibility and cellulolytic bacteria numbers were highest in RPO supplementation (p<0.05) while, supplementation with RPM and/or PO decreased the protozoa population in dairy cows. Based on this study, supplementation with RPM and/or PO in diets could improve fiber digestibility, microbial protein synthesis in terms of quantity and efficiency and microbial populations in dairy cows.
Kim, Jungeun;Lee, Jeong-Eun;Lee, Jae-Sung;Park, Jin-Seung;Moon, Jun-Ok;Lee, Hong-Gu
Journal of Animal Science and Technology
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제62권2호
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pp.263-275
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2020
Studies on promoting milk protein yield by supplementation of amino acids have been globally conducted. Nevertheless, there is a lack of knowledge of what pathways affected by individual amino acid in mammary epithelial cells that produce milk in practice. Phenylalanine (PHE) and valine (VAL) are essential amino acids for dairy cows, however, researches on mammary cell levels are still lacking. Thus, the aim of this study was conducted to evaluate the effects of PHE and VAL on milk protein synthesis-related and energy-mediated cellular signaling in vitro using immortalized bovine mammary epithelial (MAC-T) cells. To investigate the effects of PHE and VAL, the following concentrations were added to treatment medium: 0, 0.3, 0.6, 0.9, 1.2, and 1.5 mM. The addition of PHE or VAL did not adversely affect cell viability compared to control group. The concentrations of cultured medium reached its maximum at 0.9 mM PHE and 0.6 mM VAL (p < 0.05). Therefore, aforementioned 2 treatments were analyzed for proteomics. Glucose transporter 1 and mammalian target of rapamycin mRNA expression levels were up-regulated by PHE (166% and 138%, respectively) (p < 0.05). Meanwhile, sodium-dependent neutral amino acids transporter type 2 (ASCT2) and β-casein were up-regulated by VAL (173% in ASCT2, 238% in and 218% in β-casein) (p < 0.05). A total of 134, 142, and 133 proteins were detected in control group, PHE treated group, and VAL treated group, respectively. Among significantly fold-changed proteins, proteins involved in translation initiation or energy metabolism were detected, however, expressed differentially between PHE and VAL. Thus, pathway analysis showed different stimulatory effects on energy metabolism and transcriptional pathways. Collectively, these results showed different stimulatory effects of PHE and VAL on protein synthesis-related and energy-mediated cellular signaling in MAC-T cells.
Objective: An experiment was conducted to investigate the effects of feed intake restriction during late pregnancy on the function, anti-oxidation capability and acute phase protein synthesis of ovine liver. Methods: Eighteen time-mated ewes with singleton fetuses were allocated to three groups: restricted group 1 (RG1, 0.18 MJ ME/kg $W^{0.75}$ d, n = 6), restricted group 2 (RG2, 0.33 MJ ME/kg $W^{0.75}$ d), n = 6) and a control group (CG, ad libitum, 0.67 MJ ME/kg $W^{0.75}$ d, n = 6). The feed restriction period was from 90 days to 140 days of pregnancy. Results: The ewe's body weight, liver weights, water, and protein content of liver in the restricted groups were reduced compared with the CG group (p<0.05), but the liver fat contents in the RG1 group were higher than those of the CG group (p<0.05). The increased hepatic collagen fibers and reticular fibers were observed in the restricted groups with the reduction of energy intake. The concentrations of nonesterified free fatty acids in the RG1 and RG2 groups were higher than those of the CG group with the reduction of energy intake (p<0.05), but there were decreased concentrations of lipoprotein lipase and hepatic lipase in both restricted groups compared with the CG group (p<0.05). In addition, the increased concentrations of ${\beta}$-hydroxybutyric acid, triglycerides, malondialdehyde, total antioxidant capacity and activities of superoxide dismutase activity and catalase were found in the RG1 group, and the concentrations of cholinesterase in the RG1 group were reduced compared with the CG group (p<0.05). For the concentrations of acute phase proteins, the C-reactive protein (CRP) in the RG1 group were reduced compared with the CG group, but there were no differences in haptoglobin relative to the controls (p>0.05). Conclusion: The fat accumulation, increased hepatic fibrosis, antioxidant imbalance and modified synthesis of acute phase proteins were induced in ewe's liver by maternal malnutrition during late pregnancy, which were detrimental for liver function to accommodate pregnancy.
시호 추출물로부터 자외선에 의한 주름개선 효과를 확인하여 화장품 소재로서의 가능성을 검증하였다. 주름 활성 검증을 위하여 전자공여능, elastase, pro-collagen 생합성, Matrix metalloprotease-1 (MMP-1)의 활성을 측정하였다. 시호 추출물의 세포 독성을 측정하기 위하여 MTT assay를 하여 세포 독성이 100%에 가까운 농도인 5, 10, $50{\mu}g/mL$의 농도에서 pro-collagen 생합성과 MMP-1의 활성 검증하였다. 시호 추출물의 전자 공여능과 elastase 활성을 측정한 결과 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서 각각 80, 52%의 저해 활성을 가졌다. 또한 pro-collagen 생합성 역시 UVB를 조사한 후 시호 추출물을 농도 별로 처리 한결과 농도의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 주름생성에 관련되어져 있는 MMP-1의 발현을 알아본 결과 시호 추출물에 의해 total protein 양이 또한 감소되는 것을 확인 할 수 있었다. 따라서 시호는 주름활성을 개선시킬 수 있는 기능성 소재로 활용 될 수 있을것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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