Aims and Background: Ginsenoside Rh2, which exerts the potent anticancer action both in vitro and in vivo, is one of the most well characterized ginsenosides extracted from ginseng. Although its effects on cancer are significant, the underlying mechanisms remain unknown. In this study, we sought to elucidate possible links between ginsenoside Rh2 and phosphoglucose isomerase/autocrine motility factor (PGI/AMF). Methods: $KG1{\alpha}$, a leukemia cell line highly expressing PGI/AMF was assessed by western blot analysis and reverse transcription- PCR (RT-PCR) assay after transfection of a small interfering (si)-RNA to silence PGI/AMF. The effect of PGI/AMF on proliferation was measured by typan blue assay and antibody array. A cell counting kit (CCK)-8 and flow cytometry (FCM) were adopted to investigate the effects of Rh2 on PGI/AMF. The relationships between PGI/AMF and Rh2 associated with Akt, mTOR, Raptor, Rag were detected by western blot analysis. Results: KG1${\alpha}$ cells expressed PGI/AMF and its down-regulation significantly inhibited proliferation. The antibody array indicated that the probable mechanism was reduced expression of PARP, State1, SAPK/JNK and Erk1/2, while those of PRAS40 and p38 were up-regulated. Silencing of PGI/AMF enhanced the sensibility of $KG1{\alpha}$ to Rh2 by suppressing the expression of mTOR, Raptor and Akt. Conclusion: These results suggested that ginsenoside Rh2 suppressed the proliferation of $KG1{\alpha}$, the same as down-regulation of PGI/AMF. Down-regulation of PGI/AMF enhanced the pharmacological effects of ginsenoside Rh2 on KG1${\alpha}$ by reducing Akt/mTOR signaling.
Purpose: For periodontal tissue engineering, it is a primary requisite and a challenge to select the optimum types of cells, properties of scaffold, and growth factor combination to reconstruct a specific tissue in its natural form and with the appropriate function. Owing to fundamental disadvantages associated with using a two-dimensional substrate, several methods of seeding cells into three-dimensional scaffolds have been reported and the authors have asserted its usefulness and effectiveness. In this study, we explore the cell attachment of periodontal ligament fibroblasts on nanohydroxyapatite (n-HA) scaffold using avidin biotin binding system (ABBS). Methods: Human periodontal ligament fibroblasts were isolated from the health tooth extracted for the purpose of orthodontic procedure. HA nanoparticles were prepared and $Ca(NO_3)_2-_4H_2O$ and $(OC_2H_5)_3P$ were selected as precursors of HA sol. The final scaffold was 8 mm in diameter and 3 mm in height disk with porosity value of 81.55%. $1{\times}10^5$ periodontal ligament fibroblasts were applied to each scaffold. The cells were seeded into scaffolds by static, agitating and ABBS seeding method. Results: The number of periodontal ligament fibroblasts attached was greater for ABBS seeding method than for static or agitating method (P<0.05). No meaningful difference has been observed among seeding methods with scanning electron microscopy images. However, increased strength of cell attachment of ABBS could be deduced from the high affinity between avidin and biotin ($Kd=10^{-15}\;M$). Conclusions: The high-affinity ABBS enhances the ability of periodontal ligament fibroblasts to attach to three-dimensionally constructed n-HA scaffold.
Kim, Seongjun;Cho, Jiyong;Choi, Jaesoon;Lee, Don Haeng;Kim, Jung Kyung
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.37
no.9
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pp.807-814
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2013
A fundamental study on laser-tissue interaction was conducted with the aim of developing a therapeutic medical device that can remove lesions on the intestinal wall by irradiating a high-power 808-nm infrared laser light incorporated in an endoscopic system. The perforation depth was linearly increased in the range of 1~4 mm in proportional to laser output (3~12 W) and irradiation time (5~20 s). We demonstrated that the perforation depth during laser irradiation was varied according to the tissue property of each extracted porcine organ. The measurement of the temperature distribution suggests that the energy is localized in the irradiation spot and transferred to deep tissue, which protects the surrounding tissue from thermal injury. These results can be used to set the driving parameters for a laser incision technique as an alternative to conventional surgical interventions.
Aim of the study: An alternative source of adult stem cells that could be obtained in large quantities, under local anesthesia, with minimal discomfort would be advantageous. Adipose tissue could be processed to obtain a fibroblast-like population of cells or adipose tissue-derived stromal cells (ATSCs). This study was performed to confirm the availability of ATSCs in bone tissue engineering. Materials amp; Methods: In this study, adipose tissue-derived mesenchymal stem cell was extracted from the liposuctioned abdominal fat of 24-old human and cultivated, and the stem cell surface markers of CD 105 and SCF-R were confirmed by immunofluorescent staining. The proliferation of bone marrow mesenchymal stem cell and ATSCs were compared, and evaluated the osteogenic differentiation of ATSCs in a specific osteogenic induction medium. Osteogenic differentiation was assessed by von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific BMP-2, ALP, Cbfa-1, Osteopontin and osteocalcin were confirmed by RT-PCR. With differentiation of ATSCs, calcium concentration was assayed, and osteocalcin was evaluated by ELISA (Enzyme-linked immunosorbant assay). The bone formation by 5-week implantation of HA/TCP block loaded with bone marrow mesenchymal stem cells and ATSCs in the subcutaneous pocket of nude mouse was evaluated by histologic analysis. Results: ATSCs incubated in the osteogenic medium were stained positively for von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific genes was also detected. ATSCs could be easily identified through fluorescence microscopy, and bone formation in vivo was confirmed by using ATSC-loaded HA/TCP scaffold. Conclusions: The present results show that ATSCs have an ability to differentiate into osteoblasts and formed bone in vitro and in vivo. So ATSCs may be an ideal source for further experiments on stem cell biology and bone tissue engineering.
In this paper, we investigate the thermal response of skin tissue to high-intensity focused ultrasound (HIFU) by means of infrared (IR) thermal imaging. For skin tightening, a 7-MHz ultrasound transducer is used to induce irreversible tissue coagulation in porcine skin. An IR camera is employed to monitor spatiotemporal changes of the temperature in the tissue. The maximum temperature in the tissue increased linearly with applied energy, up to $90^{\circ}C$. The extent of irreversible tissue coagulation (up to 3.2 mm in width) corresponds well to the spatial distribution of the temperature during HIFU sonication. Histological analysis confirms that the temperature beyond the coagulation threshold (${\sim}65^{\circ}C$) delineates the margin of collagen denaturation in the tissue. IR thermal imaging can be a feasible method for quantifying the degree of thermal coagulation in HIFU-induced skin treatment.
Stem cells have self-renewal capacity, long-term viability, and multiline age potential. Adult bone marrow contains mesenchymal stem cells. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) are progenitors of skeletal tissue components and can differentiate into adipocytes, chondrocytes, osteoblasts, and myoblasts in vitro and undergo differentiation in vivo. However, the clinical use of BMSCs has presented problems, including pain, morbidity, and low cell number upon harvest. Recent studies have identified a putative stem cell population within the adipose tissue. Human adipose tissue contains pluripotent stem cells simillar to bone marrow-derived stem cells that can differentiate toward the osteogenic, adipogenic, myogenic, and chondrogenic lineages. Human adipose tissue-derived stem cells (ATSCs) could be proposed as an alternative source of adult bone marrow stem cells, and could be obtained in large quantities, under local anesthesia, with minimal discomfort. Human adipose tissue obtained by liposuction was processed to obtain ATSCs. In this study, we compared the osteogenic differentiation of ATSCs in a specific osteogenic induction medium with that in a non-osteogenic medium. ATSCs were incubated in an osteogenic medium for 28 days to induce osteogenesis respectively. Osteogenic differentiation was assessed by von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific bone sialoprotein, osteocalcin, collagen type I and alkaline phosphatase, bone morphogenic protein 2, bone morphogenic protein 6 was confirmed by RT-PCR. ATSCs incubated in the osteogenic medium were stained positively for von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific genes was also detected. Since this cell population can be easily identified through fluorescence microscopy, it may be an ideal source of ATSCs for further experiments on stem cell biology and tissue engineering. The present results show that ADSCs have an ability to differentiate into osteoblasts. In the present study, we extend this approach to characterize adipose tissue-derived stem cells.
Park, Jung-Whan;Lee, Jun-Hee;Cho, Hyeon-Uk;Lee, Su-Hee;Park, Su-A;Kim, Wan-Doo
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.29
no.1
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pp.33-40
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2012
The scaffold serves as 3D substrate for the cells adhesion and mechanical support for the newly grown tissue by maintaining the 3D structure for the regeneration of tissue and organ. In this paper, we proposed integrated scaffold fabrication system using multi-axis rapid prototyping (RP) technology. It can fabricate various types of scaffolds: arbitrary sculptured shape, primitive shape, and tube shape scaffolds by layered dispensing biocompatible/ biodegradable polymer strands in designated patterns. In order to fabricate the 3D scaffold, we need to generate the plotting path way for the scaffold fabrication system. We design a data processing program - scaffold plotting software, which can convert the 3D STL file, primitive and tube model images into the NC code for the system. Finally, we fabricated the customized 3D scaffolds with high accuracy using the plotting software and the fabrication system.
Kim, Sung Eun;Cho, Yong Woo;Kang, Eun Jung;Kwon, Ick Chan;Lee, Eunhee Bae;Kim, Jung Hyun;Chung, Hesson;Jeong, Seo Young
Fibers and Polymers
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v.2
no.2
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pp.64-70
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2001
A three-dimensional, porous collagen/chitosan complex sponge was prepared to closely simulate basic extracellular matrix (ECM) constitutes, collagen and glycosaminoglycan. The complex sponge was prepared by a lyophilization method and had the regular network with highly porous structure, suitable for cell adhesion and growth. The pores were well interconnected, and their distribution was fairly homogeneous. The complex sponge was crosslinked using 1-ethyl-3-(3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide (EDC) and N-hydroxysuccinimide (NHS) to increase its boilogical stability and enhance its mechanical properties. The crosslinking medium has a great effect on the inner structure of the sponge. The homogeneous, porous structure of the sponge was remarkably collapsed in an aqueous crosslinking medium. However, the morphology of the sponge remained almost intact in a water/ethanol mixture crosslinking milieu. Mechanical properties of the collagen/chitosan sponge were significantly enhanced by EDC-mediated crosslinking. The potential of the sponge as a scaffold for tissue engineering was investigated using a Chinese hamster ovary cell (CHO-K1) line.
Park, Suk-Hee;Park, Jean Ho;Lee, Hye Jin;Lee, Nak Kyu
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.31
no.12
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pp.1067-1076
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2014
To date, biomedical application of three-dimensional (3D) printing technology remains one of the most important research topics and business targets. A wide range of approaches have been attempted using various 3D printing systems with general materials and specific biomaterials. In this review, we provide a brief overview of the biomedical applications using 3D printing techniques, such as surgical tool, medical device, prosthesis, and tissue engineering scaffold. Compared to the other applications of 3D printed products, the scaffold fabrication should be performed with careful selection of bio-functional materials. In particular, we describe how the biomaterials can be processed into 3D printed scaffold and applied to tissue engineering area.
This study aimed to develop a novel bioactive hybrid xerogel consisting of silk fibroin /$SiO_2-CaO-P_2O_5$ by sol-gel process at room temperature. Scanning electron microscopy (SEM), FT-IR Spectroscopy, pore measurement, mechanical property testing, in vitro bioactivity test and cytotoxicity assay were performed to characterize the xerogel for bone tissue engineering application. We have found that the xerogel possessed excellent pore structures and mechanical property. Once immersed in a simulated fluid (SBF), the xerogel exhibited profound bioactivity by inducing hydroxyapatite layers on its surfaces. The cell toxicity study also demonstrated that there was little toxic to MC3T3-E1 cells. These results indicate that silk fibroin /$SiO_2-CaO-P_2O_5$ hybrid xerogel potentially could be used as a bone tissue engineering material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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