Schizandrin (SZ), was isolated from the fruit of Schizandra chinensis, has been reported to have many biological properties, including anti-inflammatory and antitumor activities. However, its anti-allergic effects are not completely elucidated. We focused on the anti-allergic effects of SZ in PMA/ionomycin (PI)-induced rat basophilic leukemia (RBL-2H3) cells and P815 mast cells. Cytokines (IL-4, IL-13), synthesized by basophils and mast cells, are implicated in pathological conditions such as asthma and allergy. The production of IL-4 and IL-13 was quantified by ELISA and the mRNA expression was detected by using RT-PCR assay. In this study, we found that SZ did not show cytotoxic effect at up to 100 ${\mu}M$ on RBL-2H3 cells and mast cells. In addition, SZ inhibited the production of IL-4 and IL-13 and also decreased the level of mRNA in PI-induced RBL-2H3 cells and mast cells in a dose-dependent manner. Thus, we suggest that SZ may have the effect on preventing allergic disorders by inhibiting IL-4 and IL-13 cytokines.
Rumen bacterial amino acids in sheep on urea diet were monitored to assess a possible change in amino acid synthesis as a long term response to high rumen ammonia environment. A sheep was fed a semipurified diet with soybean meal, followed by a diet with urea as a main nitrogen source. Mixed rumen bacteria were harvested from ruminal fluid taken 3 h after feeding (twice in soybean meal feeding and 6 times in urea feeding) and fractionated as cell wall, proteins and protein-free cell supernatant of monitor amino acids in each fraction. Ruminal ammonia concentration at the sampling ranged from 5.7 to 39.5 mgN/dl. Cell wall and protein fractions of mixed rumen bacteria were stable in their amino acid composition regardless of nitrogen sources of diet and the feeding duration. However, protein-free cell supernatant fraction showed a higher alanine proportion with urea feeding (18.6 and 28.2 molar % of alanine for samples from sheep fed soybean meal and urea, respectively) and its duration (20.6 and 32.9 molar % for samples from sheep on urea diet for 1 and 65 days, respectively). Total free amino acid level of bacteria was depressed in the initial period of urea feeding but restored on 65th day of the feeding. These results suggest that an alanine synthesizing system may develop in rumen bacteria as urea feeding becomes longer.
Kim, Dae-Yeon;Gweon, Bo-Mi;Kim, Dan-Bee;Choe, Won-Ho;Shin, Jennifer H.
Proceedings of the KSME Conference
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2008.11a
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pp.1539-1542
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2008
Plasma is 4th state of matters, which consists of electrons, neutral, and ionized particles. In biomedical research, cold plasma, which is generated in atmospheric condition, has been applied to disinfect microorganisms such as bacteria and yeast cells. Because of its low temperature condition, the heat-sensitive medical device can be easily sterilized by the cold plasma treatment. In recent years, the effects of plasma on mammalian cells have arisen as a new issue. Generally, plasma induces intensity dependent necrotic cell death. In this research, we investigate the feasibility of cold plasma treatment for cancer therapy by conducting comparative study of plasma effects on normal and cancer cells. We use THLE-2 (human liver normal cell) and SK-Hep1 (human liver metathetic cancer cell) as our target cells. The needle type of cold plasma is generated by the Helium plasma device. Two types of cells have different onset plasma conditions for the necrosis, which may be explained by difference in electrical properties of these two cell types.
8-10 week old ICR mice were infected intracerebrally and intraperitoneally with different encephalomyocarditis virus(K$_3$, $K_{11}$, ATT-VR 129) to observe histopathological and immunohistochemical change. Results obtained throuh the experiments were summarized as follows : 1. No differences in clinical signs by the virus strains and the inoculation routes were found. Mice infected with EMCV showed clinical signs after 3 days of inoculation. Main clinical signs were tremors, convulsions, circling movement, and uni or bilateral hindleg paralysis followed by death on the 3-8 days. In general, most of the infected animals died or recovered closely on the 8th day of postinoculation. 2. At necropsy, petechial and ecchymotic hemorrhages in lung were observed and no specific findings in other were observed. 3. In histopathological observation, neuroal cell degeneration perivascular mononucear cell in-filtration gliosis were appeared in central nervous system. Myocarditis with myocardial degeneration and necrosis, calcification were observed along with acinar cell necrosis of exocrine glands in pancreas, severe glomerulonephritis in kidney. Also, focal necrosis of hepatocytes and interstitial pneymonia hyperemia, hemorrhages in lungs were observed. 4. By immunohistochemical staining using ABCIT method, the positive cells were recognized in intracytoplasm of acinar cell in pancreas and intracytoplasm of neuronal cells in cerebrum.
This study examined the effects of GATA-3-dependent Th2 cells and IgE inhibition by using PM-E and PM-70M isolated from Sasao. It was analyzed that the 70 % methanol layer contained adsorbed chromatograms of the fraction of sodium hypochlorite that inhibited GATA-3 transcription factor activity. As a result, PM-70 %MFL fraction seems to have an antiallergic effect by inhibiting GATA-3 which regulates Th2 cytokine. PM-30A, PM-70A, and PM-30A layers by inhibiting IgE secretion in B cells by co-culturing the fractions with anti-CD40/rmIL-6 and TNF-${\alpha}$ mRNA and IgE were not different from control. However, expression of IL-6 and TNF-${\alpha}$ mRNA was $0.69{\pm}0.058$ (p<0.001) and $0.72{\pm}0.58$ (p<0.05), respectively. The amount of IgE secretion was $94.6{\pm}16.0$, which was significantly decreased by 45.6% (p<0.01) compared with the control group. This study suggests that the PM-70% MFL layer in the fraction of Sasao contains the components that inhibit the differentiation and activity of B cells.
The studies were conducted to investigate the combined effects of several combined preparation of crude drugs and mitomycin C(MMC). The combined effects on the proliferation of HepG2, A549, KHOS-Np, A431 and HeLa cells were estimated by MTT colorimetric assays. Sa Kunja Tang(SKT), Boyang Hwanoh Tang(BHT) and Hyulbu Choogo Tang(HCT) inhibited the proliferation of A549 and HeLa cell. The inhibitory action of MMC was increased by the combined treatment of SKT and MMC, and Sa Mul Tang(SMT) and MMC, respectively. When the mice were treated by MMC, the number of leukocyte was decreased significantly at the 3rd day, but recovered at the 7th day. In the groups of MMC treated with SKT or HCT, the number of leukocyte was increased significantly that the group of MMC treated only at the 1st and 3rd day. The combined treatment of SKT, SMT, BHT, HCT and MMC retained the spleen weight of mice at the level of normal mice, but decreased the thymus weight of mice. The combined treatment of SKT, SMT, BHT, HCT and MMC increased the number of PFC significantly than the MMC treated group. The combined treatment of SKT, SMT, BHT, HCT and MMC increased the T cell proliferation significantly thant the MMC treated group.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.27
no.5
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pp.385-396
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2001
The purpose of this experiment was to examine the histological changes and the pattern of expression of proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and type I collagen in the elongated bone affected by osteodistraction of the mandibular body in an adult canine model. Seven adult male mongrel dogs weighing over 20kg were used for this experiment. The author excluded 3 animals because they died before the planned time of sacrifice. The custom-made linear extraoral device and 4 bicortical fixation screws 2.3mm in diameter, 50mm in total length, 15mm in screw length were used in each animal. The distal part of the distractor produced a 0.75mm gap between proximal and distal bony segments every $360^{\circ}$ turn of the rotation rod of the device. The mandibular body of the right side from each animal was experimental side and the left side was left intact and served as control. At the experimental side, the mandibular body was osteotomized. After 5-day latency period, the segments were distracted with a rate of 1.1mm/day and a rhythm of two/day for ensuing 7 days. The animals were sacrificed at the 4th. 17th, and 32th day after the end of the distraction. The bony specimens were decalcified, embedded in paraffin, sectioned $5{\mu}m$ thick and stained with Masson trichrome and examined under the light microscope. The immunohistochemical examinations using anti-PCNA antibody and anti-type-I collagen antibody were performed to examine the pattern of the expression of PCNA and type I collagen, respectively. Results : 1. The mean increment of the distance between the proximal and distal screw-holding parts of the distractor was 6.8mm. The average elongation of the mandible in the experimental side was 5.3mm. The loss of elongation was 1.5mm in average. 2. New bone was already observed at the 4th. day after the end of distraction. But, bony union was not completed in the distraction gap at the 32th. day after the end of distraction by radiographic and microscopic examinations. 3. The expression rate of PCNA positive cells in the distraction gap had a tendency of decrease from 35.1-68.8% initially, to 49.1%, and finally to 17.6-27.2%. But at the final period, the tissue of the elongated gap still had the ability of cell proliferation. On the other hand, the expression of PCNA positive cells in the control side were negligible through the experimental period. 4. PCNA positive cells were observed primarily both at the central fibrous zone and at the region of just adjacent to CFZ which initiated new bone formation. 5. The expression pattern of the type I collagen was not zone-specific. They were observed diffusely throughout the elongation gap. 6. The predominant mechanism of new bone formation in the distraction gap was intramembranous. But, some of the regenerated bone was formed by endochondral ossification.
Jo, Eun-Hee;Jo, Il-Joo;Park, Seong-Ju;Jo, So-Hyun;Park, Min-Cheol
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.27
no.3
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pp.84-95
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2014
Objective : Ephedra sinica (ES) has has been used as remedy of allergic diseases for a long time in Korea. In the present study, we investigated the anti-allergic effects of ES on experimental allergic asthma mouse model using ovalbumin (OVA). Methods : BALB/c mice were sensitized and challenged with 100 ug of OVA and 1 mg of aluminum potassium sulfate of 0.2 ml phosphate-buffered saline(PBS) intraperitoneally on day 1 and 15. mice were challenged on 3 consecutive days with 5% OVA and AHR was assessed 24 h after the last challenge. we examined the lung histology, airway hyper sensitivity, total inflammatory cell count in bronchoaveloar lavage fluid(BALF), Th2-associated cytokines production and IgE production. Results : ES potently inhibited the lung damage and the development of Penh. ES also reduced the number of BAL cells during OVA-induced allergic asthma. Furthermore, ES inhibited cytokines production such as IL-4, IL-13 productions, and IgE level of serum. Conclusion : These results suggest that ES may inhibit the production of IL-4, IL-13, IgE and infiltration of inflammatory cell and be beneficial oriental medicine for allergic asthma.
Jo, Eun-Hee;Jo, Il-Joo;Park, Seong-Ju;Jo, So-Hyun;Park, Min-Cheol
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.27
no.3
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pp.96-105
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2014
Objective : Glycyrrhiza uralensis Fisch (GUF) has been used as remedy of allergic diseases for a long time in Korea. In the present study, we investigated the anti-allergic effects of GUF on experimental allergic asthma mouse model using ovalbumin (OVA). Methods : BALB/c mice were sensitized and challenged with 100 ug of OVA and 1 mg of aluminum potassium sulfate of 0.2 ml phosphate-buffered saline (PBS) intraperitoneally on day 1 and 15. Mice were challenged on 3 consecutive days with 5% OVA and AHR was assessed 24 hrs after the last challenge. We examined total inflammatory cell number in bronchoaveloar lavage fluid (BALF), Th2-associated cytokine productions and lung histology. Results : GUF potently inhibited the development of airway hypersensitivity and also reduced the number of BAL cells during OVA-induced allergic asthma. GUF also inhibited cytokine productions such as IL-4, IL-13 in lung tissue. Furthermore, GUF treatment inhibited allergic airway inflammation. Conclusion : These results suggest that GUF may inhibit the production of IL-4, IL-13 and infiltration of inflammatory cell and be beneficial oriental medicine for allergic asthma.
Currently asthma is considered to be an inflammatory disease characterized by airway hyperresponsiveness and pulmonary eosinophilia, and mediated by Th lymphocytes expressing a Th 2 cytokine pattern. In many recent studies, molecular biological methods have been used to investigate the role of cytokines in pathogenesis and new therapeutic targets of asthma. Objectives: We aimed to identify the effect of Haepyoijin-tang on the transcriptional activities of cytokines involved in the asthma model. Materials and Methods: RBL-2H3 cell lines were used. Cells were stimulated with DNP-IgE or Calcium inophore+PMA for maximal gene expression. After 24 hours of Haepyoijin-tang-treatment, total cellular RNAs were collected using the Trizol solution method. Then the transcriptional activities of cytokines(IL-1, 4, 5, 10, 13, $TNF-{\alpha}$) were measured by RT-PCR with electrophoresis. Results: DNP-IgE and Calcium inophore+PMA induced IL-4/IL-5 production separately peaked at 3 hours after the stimulation, but the efficacy was better in the Calcium inophore+PMA group. In the IL-4 study, sample groups of 10%, 1 %, 0.01 % Haepyoijin-tang-treatment showed 83%, 98%, 96% of transcriptional activities compared to the control group. In the IL-5 study, sample groups of 10%, 1%, 0.1 %, 0.01 % Haepyoijin-tang showed 97%, 99%, 99%, 99% of transcriptional activities compared to the control group. In other studies any result was not obtained. Conclusions: This study shows that Haepyoijin-tang has an inhibitory effect on the transcription of IL-4 and IL-5 gene expression in RBL-2H3 cell lines. Advanced studies are required to investigate the mechanisms of inhibition by herbal medicine in the asthma model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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