Choi, Bohm;Kim, Tae-Gun;Han, Seung-Hee;Park, Yoon-Hee;Lee, Won
Journal of Korean Dental Science
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제5권1호
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pp.37-44
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2012
Purpose: Among the facilitation of tooth movement in adult orthodontic treatment methods, surgical approaches are gaining popularity but complications following mechanical bone reduction are a problem. In this study, tooth movement was observed after alveolar bone was chemically demineralized to verify whether tooth movement had been facilitated. Materials and Methods: Twelve rabbits were used. In the experimental group, the alveolar bone of the left first molar area was exposed and demineralized. Thirty seven percents phosphoric acid was applied for 5 minutes for demineralization. The opposite first molar area was used as control. Two teeth were pulled with 200 g force and 4 rabbits each were sacrificed at 3, 7, and 14 days after the force was applied. Histologic examination was done with hematoxylin and eosin and tartrate-resistant acid phosphatase staining. Result: The histologic examination results revealed more bone resorption in the demineralized area. As time passed, the number of osteoclasts increased in the compressed area. The amount of tooth movement was larger in the experimental group compared to the control group but the difference was not statistically significant. Conclusion: The demineralization with etchant resulted in limited bone resorption, more tooth movement and less damage of the cementum after applied orthodontic force.
본 연구는 전십자인대가 단열된 개의 슬관절액에서 tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) 와 cathepsin K의 변화를 알아봄으로서 십자인대에 관련된 질병 또는 십자인대 치료 실패에 따른 퇴행성관절염의의 조기 진단 및 치료에 관한 정보를 얻기 위하여 실시하였다. 실험동물로는 전방십자인대가 단열된 30두의 개와 정상 성견 8 두 그리고 어린 정상 개 9두를 사용하였다. 슬관절액 내의 TRAP 과 Cathepsin K의 변화를 확인하기 위하여 조직화학 염색과 면역조직화학염색을 실시하였다. 조직학적인 검사 결과 정상견에서는 TRAP과 Cathepsin K 세포들은 찾아보기 힘들었으나 전방십자인대가 단열된 개에 있어서는 TRAP 과 Cathepsin K 그리고 chondroid metaplasia가 중심부분에서 증가되고 있음을 관찰하였다. 이러한 결과로 보아 TRAP과 Cathepsin K 세포들은 전방십자인대가 단열 또는 단열 후 회복되는 과정에서 상호 보조적으로 관여하며 세포외 방출과 관계가 있는 것으로 생각된다.
Objective : Ssangwha-tang is a traditional medicine formula widely prescribed for a decrease of fatigue after an illness in Korea. The aim of this study is to investigate the effect of Ssangwha-tang fermented by Lactobacillus fermentum (SF) on osteoclast differentiation in vitro and on bone metabolism of an ovariectomized rat in vivo. Methods : Tartrate-resistant acid phosphatase activity and staining were applied to evaluate the formation of osteoclasts. Ovariectomized rats were orally administrated with SF (30 ml/kg/day) for 12 weeks. Serum aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, total cholesterol, high-density lipoprotein-cholesterol, low-density lipoprotein-cholesterol, triglyceride, phosphate, calcium levels were determined. Effect of SF on bone loss were studied by histological analysis and the measurement of bone mineral density. Results : SF significantly inhibited tartrate-resistant acid phosphatase activity and formation of osteoclasts in RAW264.7 cells stimulated by receptor activator for nuclear factor ${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) ligand (RANKL). In addition, SF significantly decreased the level of triglyceride and increased the level of low-density lipoprotein. Moreover, the decrease of trabeculae of the femur was partially prevented in ovariectomized rats administrated with SF. Conclusions : SF treatment could prevent ovariectomy induced bone loss and its effects could be medicated by the inhibition of osteoclastogenesis.
Objectives: This study was conducted to evaluate the inhibitory effect of polygoni cuspidati radix (PCR) extract on osteoclast differentiation. Methods: MTT-assay was performed to estimate cytotoxicity of PCR extract in BMMs stimulated with RANKL. Tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) staining, TRAP activity and RT-PCR were performed to know the inhibitory effect on osteoclast differentiation. actin ring formation were analysed to observe the effect of PCR extract. Results: PCR decreased the number of TRAP positive cells and TRAP activities in BMMs stimulated with RANKL and M-CSF. PCR restrained the formation of actin ring. PCR down regulated the induction of NFATc1, c-Fos, TRAP and OSCAR by RANKL. PCR inhibited NF-${\kappa}B$ activity by inducing degradation of $I{\kappa}B{\alpha}$. Conclusions: We suggest that PCR Extracts can be an effective therapeutic agent on osteoclast differentiation caused by diseases such as osteoporosis.
Su, Xiang-Dong;Yang, Seo Y;Shrestha, Saroj K;Soh, Yunjo
Journal of Veterinary Science
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제23권4호
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pp.47.1-47.11
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2022
Background: In lipopolysaccharide-induced RAW264.7 cells, Aster tataricus (AT) inhibits the nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells and MAPKs pathways and critical pathways of osteoclast development and bone resorption. Objectives: This study examined how aster saponin A2 (AS-A2) isolated from AT affects the processes and function of osteoclastogenesis induced by receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) in RAW264.7 cells and bone marrow macrophages (BMMs). Methods: The cell viability, tartrate-resistant acid phosphatase staining, pit formation assay, polymerase chain reaction, and western blot were carried out to determine the effects of AS-A2 on osteoclastogenesis. Results: In RAW264.7 and BMMs, AS-A2 decreased RANKL-initiated osteoclast differentiation in a concentration-dependent manner. In AS-A2-treated cells, the phosphorylation of ERK1/2, JNK, and p38 protein expression were reduced considerably compared to the control cells. In RAW264.7 cells, AS-A2 suppressed the RANKL-induced activation of osteoclast-related genes. During osteoclast differentiation, AS-A2 suppressed the transcriptional and translational expression of NFATc1 and c-Fos. AS-A2 inhibited osteoclast development, reducing the size of the bone resorption pit area. Conclusion: AS-A2 isolated from AT appears to be a viable therapeutic therapy for osteolytic illnesses, such as osteoporosis, Paget's disease, and osteogenesis imperfecta.
본 연구에서는 마가목 (SC), 현지초 추출물 (GT) 및 이들의 1:1 혼합물 시료 (MIX)가 골손실 및 연골손상 억제에 효과가 있는지 알아보기 위해, 각각의 시료를 조골세포주인 MG-63 세포, 파골세포로의 분화를 유도한 Raw264.7 세포와 연골세포로의 분화를 유도한 ATDC5 세포에 처리하여 세포분화 조절 정도를 확인하였다. 각 세포의 분화 정도는 alkaline phosphatase (ALP) 활성 측정, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) 염색법 및 alcian-blue 염색법으로 확인하였다. 이들 시료는 MG-63 세포에서 ALP 활성에는 영향을 미치지 않았으나, 마가목 추출물 (SC) 및 마가목과 현지초 추출물의 혼합시료 (MIX)는 농도 의존적으로 파골세포의 분화를 억제하고 연골세포의 분화를 촉진하는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 마가목과 현지초는 골손실과 연골 손상으로부터 보호할 수 있는 중요한 천연물 소재임을 확인할 수 있었다. 나아가 이들 추출물의 작용기전 및 활성물질 구명에 대한 연구는 추후 더 진행되어야 할 것이다.
The objective of this study was to investigate the ability of alendronate and taurine in inhibiting in vitro osteoclast differentiation induced by bacteria. Whole cell sonicates of P. gingivalis were used as an osteoclast-stimulating factor in a mouse coculture system and differentiated osteoclasts were confirmed by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining. Alendronate at the concentrations of 10-7, 10-6, and 10-5 M, and taurine at the concentrations of 4mM, 8mM, and 12mM were used.(omitted)
본 연구는 superoxide의 제거물질로 알려진 pyrroloquinoline quinone (PQQ)이 파골세포의 분화 및 성숙한 파골세포의 활성에 미치는 영향을 알아보고자 시행하였다. Superoxide를 인지하는 방법인 nitroblue tetrazolium (NBT) 염색방법을 이용하여 PQQ가 HD-11 세포가 생성한 superoxide를 제거하는지 확인하였다. 본 연구에서 이용된 HD-11세포는 닭 myelomonocytic 세포주로써 1,25-dihydroxyvitamin $D_3\;[1,25(OH)_2D_3]$ 처리시 tartrate-저항성 산성인산분해효소 (tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)의 활성을 나타내는 등 파골세포의 특성을 지니는 세포로 알려져 있다. HD-11세포에서 TRAP 활성을 확인하기 위하여 조직화학적 염색을 시행하였다. PQQ는 NBT의 환원을 감소시켰으며 1,25(OH)2D3에 의해 유도된 TRAP 활성을 억제하였다. 또한 PQQ가 닭 골수세포에서 TRAP 양성 다핵세포의 형성에 미치는 영향도 관찰한 결과 20 ${\mu}M$의 PQQ는 TRAP 양성 다핵세포의 형성을 현저히 억제하였다. 닭 파골세포를 상아질 절편에서 배양하면서 20 ${\mu}M$의 PQQ를 처치한 경우 파골세포에 의한 상아질 흡수가 현저히 억제되었다. 따라서 본 연구결과 PQQ가 superoxide의 제거물질로 작용하여 파골세포의 분화 및 활성도에 영향을 미칠 것으로 사료되며, 이는 생리적 혹은 병적 골흡수에 억제적인 작용을 할 물질로의 가능성을 시사한다.
Gamijangsing-tang (GMJST) has been used for treatment of bone formation in traditional korean medicine. The purpose of this study is to examine effects of GMJST on bone metabolism. The effects on the osteoblasts were determined by measuring (1) cell proliferation, (2) alkaline phosphatase (ALP) activity, (3) osteoprotegerin (OPG) secretion. (4) The morphologic changes of cells were observed by light microscopy and electron microscopy. Mineralization of calcium was determined by quantitative alizarin red-S assay and mineralization of phosphate was observed by von kossa staining. The morphologic changes of mineralization on the cells were observed by transmission electron microscopy (TEM). The effects on the osteoclast were investigated by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining. Following results were obtained: Celluar activity of osteoblastic cells (MG-63) was significantly increased in 10-5 of dilution of GMJST. ALP and OPG activity of osteoblastic cells were increased in GMJST than normal MG-63 cell. Mineralization of osteoblastic cells were increased in GMJST than normal MG-63 cell. The activity of osteoclast cells (RAW 264.7) was significantly decreased in GMJST than normal MG-63 cell. From the results, GMJST stimulated the proliferation and mineralization of bone-forming osteoblast and inhibited by bone- lysis osteoclast.
Periodontitis is a bacteria-induced inflammatory disease associated with alveolar bone loss. Osteoclast is a macrophage-lineage cell that exhibits phagocytic activity; however, osteoclast phagocytic activity has not been demonstrated under pathological conditions. Diabetes is a pathological condition that exacerbates alveolar bone loss via periodontitis; therefore, we examined phagocytic osteoclasts in diabetic rats that had periodontitis. The rats were divided into the control (C), periodontitis (P), and diabetes with periodontitis (DP) groups. Diabetes and periodontitis were induced by streptozotocin injection and ligature of the mandibular first molars, respectively. On days 3 and 20 after the ligature, the rats were sacrificed, and osteoclasts containing inclusions were quantified by tartrate-resistant acid phosphatase staining. On day 3, there were more osteoclasts containing inclusions in the DP group than in the C group. Among inclusions, osteocyte-like cells and dense bodies were more frequently observed in the DP group than in the C group. Cytoplasm-like structures were elevated more in the DP group than in the C and P groups. However, no differences were observed on day 20. Interestingly, some osteoclasts were in contact with the osteocytes within the exposed lacunae and contained several inclusions within a large vacuole. Thus, the elevation of phagocytic osteoclasts in rats with diabetes and periodontitis provides insight into the role of osteoclast phagocytic activity under pathological conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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