• Title/Summary/Keyword: Suspension Culture

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Peroxidase from Rice Suspension Culture

  • Lee, Mi-Young;Kim, Hyun-Bae;Han, Chang-Up;Hwang, Eui-Sun
    • 한국동물학회:학술대회논문집
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    • 한국동물학회 1996년도 한국생물과학협회 국제학술대회
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    • pp.183.1-183
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    • 1996
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형질 전환된 담배 세포에서 hGM-CSF 생산 연구 (hGM-CSF Production from Transgenic Nicotiana tabacum)

  • 변한열;변상요
    • KSBB Journal
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    • 제18권6호
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    • pp.435-439
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    • 2003
  • 형질 전환된 담배 seed에서 담배 식물체를 유도하여 White 액체 배지에서 기관 배양하였다. 암조건, sucrose 2%의 조건에서 좋은 growth pattern을 나타내었고, 계대 배양은 외마디법을 이용하여 2주마다 하였다. 기관 배양에서 hGM-CSF production pattern을 보면, intracellular에서는 큰 변화 없이 약 30 ng/g의 일정한 농도를 나타내었다. Extracellular에서 hGM-CSF 농도는 배양 6일 이후부터 급속하게 증가하기 시작하여 배양 12일째에 약 0.2ng/$m\ell$의 농도를 나타낸다. 기관배양은 다른 식물세포 배양 시스템에 비해 생산되어진 단백질의 안정성이 크다는 장점에 비해 세포 내에서 배지 내로의 단백질 분비가 적다는 단점이 있다. 이를 극복하기 위해 다양한 permeabilizing agents를 투여하여 담배 세포의 permeability를 증가시키고자 하였다. 그 결과, Pluronic F-68과 PEG8000을 첨가한 경우 담배 세포에서 배지 내로의 단백질 분비가 원활해졌음을 확인할 수 있었다.

Botryococcus braunii 배양에서 탄화수소의 two-stage 동시추출공정

  • 안진영;최정규;심상준;김병우
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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    • pp.229-232
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    • 2000
  • 본 연구에서는 균주의 배양과 동시에 생산물을 회수할 수 있는 동시추출공정을 건조질량의 $15{\sim}75%$의 탄화수소를 생산한다고 알려진 B. braunii 배양에 적용하고자 한다. 일반적인 two-phase 동시추출공정의 적용시 B. braunii의 경우 생산된 탄화수소가 균주 외벽의 matrix에 강하게 부착되어 있기 때문에, two phase 추출공정 적용시 bubble column내에서 단지 폭기에 의한 교반만으로는 충분한 탄화수소의 회수율을 얻을 수가 없었다. 본 연구에서는 배양액과 유기용매층의 접촉기회를 증대시킨 two-stage 동시추출 공정을 개발하여 기존의 two-phase 동시추출 공정보다 2배 이상 높은 56.2%의 탄화수소 회수율을 얻을 수가 있었다.

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Effect of Nitrogen Source on Cell Growth and Anthocyanin Production in Callus and Cell Suspension Culture of 'Sheridan' Grapes

  • Kim, Seung-Heui;Kim, Seon-Kyu
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제4권2호
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    • pp.83-89
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    • 2002
  • To establish in vitro mass production system of grape anthocyanin pigments through callus and cell suspension culture, the effects of nitrogen amount and the ratio of $NO_3^-$/$NH_4^+$ in the medium on cell growth and anthocyanin production were investigated. Total nitrogen amount and the ratio of $NO_3^-$/$NH_4^+$ in the medium strongly affected anthocyanin production and cell growth. When $NH_4^+$ was fixed, the cell growth was promoted by 50 mM total nitrogen (20 mM $NO_3^-$ : 30 mM $NH_4^+$ ) than other nitrogen combinations, and was strongly inhibited when $NO_3^-$ was lacking (0 mM $NO_3^-$ : 60 mM $NH_4^+$ ) while anthocyanin production was increased. When $NO_3^-$ was fixed, the cell growth was promoted by 70 mM total nitrogen (40 mM $NO_3^-$ : 30 mM $NH_4^+$) than other nitrogen combinations, and was strongly inhibited when $NO_3^-$ was lacking (0 mM $NO_3^-$ : 60 mM $NH_4^+$ ) while anthocyanin production was increased. Cell growth was gradually increased by all nitrogen combinations, but anthocyanin production reached its peak on day 4 in culture. Anthocyanin content increased with decreasing cell density. Sucrose was rapidly hydrolyzed to fructose and glucose within 4 days. Glucose and fructose concentrations in the medium increased and peaked at the 4th day. The anthocyanin content of $NH_4^+$-free 2% sucrose media was 2 times (200 $\mu\textrm{g}$/g) higher than that of 1% sucrose. When $NO_3^-$ was lacking, the highest anthocyanin production was observed at 4% sucrose after 12 days of culture, and increased along with the sucrose concentration.

당근(Daucus carota L.)의 현탁배양을 통한 체세포배 발생에 미치는 카드뮴의 영향 (Effect of Cadmium on Somatic Embryogenesis from Cell Culture of Daucus carota L.)

  • 조덕이;신은경;소웅영
    • 식물조직배양학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.227-232
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    • 2000
  • 당근 유식물체의 자엽을 절편으로 유도된 배형성능 세포를 여러가지 농도의 카드뮴 (0, 50. 100, 200. 500, 1000 $\mu$M)이 첨가된 MS 액체배지에 배양한 다음 MS 기본배지에 옮겨서 체세포배 발생을 유도했고 한편 카드뮴 처리구와 카드뮴이 처리되지 않은 대조구에서 체세포배를 얻었다. 현탁배양에서 정상적인 2개의 자엽을 갖는 체세포배 발생은 카드뮴 첨가 배지에서 감소하였으나 비정상적인 3개의 자엽을 갖는 체세포배가 많이 관찰되었다. 또한 비정상적인 1개, 3개 및 4개의 자엽을 갖는 체세포배보다 정상적인 2개의 자엽을 갖는 체세포배의 식물체 재생률이 가장 높았다. 카드뮴 처리구에서 발생된 체세포배의 발아율은 자엽수에 관계없이 대조구에서 발생된 체세포배의 발아율에 비해 감소하였다.

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오이 배발생세포의 현탁배양을 통한 고빈도 식물체 재분화 (High Frequency Plant Regeneration in Embryogenic Cell Suspension Cultures of Cucumber)

  • 정원중;우제욱;박효근;최관삼;유장렬
    • 식물조직배양학회지
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    • 제26권4호
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    • pp.289-291
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    • 1999
  • 발아 7일된 오이 (Cucumis sativus L.) F$_1$ 5품종과 순계 4품종의 하배축 절편을 1mg/L 2,4-D가 첨가된 MS고체배지에 치상하여 3주간 배양하였다. F$_1$ 1품종과 순계 2품종에서 발달한 캘러스의 8%이하에서 체세포배가 발생하였다. 체세포 배 절편을 동일한 배지에 4주간 배양하여 배발생캘러스를 유도하였다. 배발생캘러스는 동일조성의 MS액체배지에 현탁되어 증식하였다. 액체배지에서 배발생캘러스는 수많은 체세포 배로 발달하였으며, 생장조절제가 첨가되지 않은 MS기본배지에서 95%이상의 체세포배가 식물체로 발아하였다. 재분화된 식물체는 화분에서 생육되어 개화 후 착과하였다.

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Effects of Silkworm Hemolymph on Cell Viability and hCTLA4Ig Production in Transgenic Rice Cell Suspension Cultures

  • Cheon, Su-Hwan;Lee, Kyoung-Hoon;Kwon, Jun-Young;Ryu, Hyun-Nam;Yu, Da-Hyun;Choi, Yong-Soo;Kim, Dong-Il
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권12호
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    • pp.1944-1948
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    • 2007
  • Silkworm hemolymph (SH), prepared from fifth-instar larvae of Bombyx mori and heat-treated at $60^{\circ}C$ for 30 min, was used to improve cell viability and the production of human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig) in transgenic Oryza sativa L. cell suspension cultures. Even though SH could not elevate cell viability at the concentrations up to 3% (v/v), addition of 0.3% (v/v) SH to a culture medium enhanced the production of hCTLA4Ig by 36.8% over an SH-free medium. Moreover, the production period of hCTLA4Ig could be shortened in a 0.3% (v/v) SH-added medium compared with that in an SH-free culture. As a result, addition of 0.3% (v/v) SH improved the productivity of hCTLA4Ig significantly in transgenic rice cell cultures.

딸기 시들음병균에 대한 Trichoderma속 균의 길항작용에 관한 연구 V. 중복기생균 Trichoderma harzianum에 의한 딸기 시들음병의 생물적 방제 (Studies on Antagonism of Trichoderma Species to Fusrium oxysporum f. sp. fragariae V. Biological Control of Fusarium Wilt of Strawberry by a Mycoparasite, Trichoderma harzianum)

  • 문병주;정후섭;박현철
    • 한국식물병리학회지
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    • 제11권4호
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    • pp.298-303
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    • 1995
  • The biological control effect of Trichoderma harzianum on the Fusarium wilt of strawberry and several factors affecting on its efficacy were examined through pot experiments. T. harzianum grown on wheat barn, rice straw, rice hull, sawdust or barley straw was respectively incorporated into the pathogen-infected soil, and significantly suppressed the strawberry wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae. The wheat bran or rice straw culture of T. harzianum suppressed the disease incidence more effectively than other substrates for culture, decreasing it to 68% of the untreated control. The conidial suspension of T. harzianum alone or the suspension mixed with crab shell also effectively reduced the disease incidence. The control effectiveness of T. harzianum was high in acid soil (pH 3.5~5.5). In sandy loam soil, the disease incidences and population densities of the pathogen were decreased by the treatment of T. harzianum, while there was no significant effect of T. harzianum on the pathogen in loam soil.

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당근 현탁 배양세포의 생장과 분화에 관한 연구 I. 배형성 과정에서 Peroxidase 활성, Polyamine 함량 및 Ethylene 성성의 변화 (Studies on Growth and Differentiation of Suspension-Cultured Carrot Cells I. Alterations in Peroxidase Activity, Polyamine Content and Ethylene Production during Somatic Embryogenesis)

  • 김응식
    • Journal of Plant Biology
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    • 제33권4호
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    • pp.259-269
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    • 1990
  • Changes of peroxidase activity, polyamine content and ethylene production during somatic embryogenesis in suspension-cultured carrot (Daucus carota L.) cells were investigated. As compared with nonembyrogenic cells and their medium, embryogenic cells and their medium were characterized by higher levels of peroxidase at all times of culture period. Peroxidase in embryogenic cells showed higher oxidation activity of IAA than in nonembryogenic cells at the torpedo stage, but the IAA oxidation activity of peroxidase released into embryogenic medium was lower than that of peroxidase released into nonembryogenic medium. Peroxidase patterns of embryogenic and nonembryogenic cells showed three cathodic bands, and one anodic band, while peroxidase patterns released into embryogenic and nonembryogenic media did not show any anodic bands and the isoelectric points of cathodic peroxidase were pH 7.7, 7.5 and 6.6. Compared with nonembryogenic cells, polyamine content in embryogenic cells was increased by 15% at the torpedo stage, but polyamine ratio was constant, and ethylene production was extremely low at all times of culture period. Therefore, it is suggested that the peroxidase in embryogenic cells is correlated with embryogenesis by regulating hormone ratios through IAA oxidation, while the peroxidase isozyme patterns may be used as a biochemical marker of embryogenesis. The increase of polyamine content and the decrease of ethylene production suggest an interaction between polyamine and ethlyene during embryogenesis.

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벼의 수화겔 인공종자 생산 (Production of Artificial Seeds by Alginate-encapsulation of Rice Somatic Embryos)

  • 정원중;민성란;송남희;유장렬
    • 식물조직배양학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.183-186
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    • 1994
  • 태백벼의 현탁배양세포주로부터 유도된 체세포배를 낱개로 알진산 캡슐화하여 인공종자화하였다. 인공종자는 1/2 MS 고체배지에서 73%의 발아율을 나타내었으며 알진산 캡슐은 체세포배의 발아율에 영향을 주지 않았다. 그러나 멸균되지 않은 여과지에서는 발아율이 60%로 낮아졌다. 캡슐화된 진정종자는 무균상태여부에 관계없이 높은 발아율을 나타내었다. 이상의 결과로 무균상태가 유지되지 않을 때 인공종자 발아율이 낮아지는 것은 체세포배가 진정종자의 접합자배보다 오염을 견디기 어렵기 때문인 것으로 사료된다.

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