A gene encoding streptodornase(sdc) from Streptococcus equisimilis H46A was expressed in S. equisimilis H64H sdc under the control of the streptokinase gene promoter. Secretion of the streptodornase was directed by the signal sequences of streptokinase or streptodornase. The expressed streptodornase activity from S. equisimilis H46A sdc transformant with streptokinase promoter - streptodornase coding sequence fusion vector was 2.3 fold higher than that from wild type. Construct of signal sequence region replaced by streptokinase ones was similarly expressed as a wild type. But constructs of skc or lrp core regions of streptokinase promoter streptodornase fusion were similarly expressed as in sdc mutant. In conclusion, improved expression of streptodornase by use of streptokinase promoter required the full length of promoter.
Oh, Sang-Ik;Kim, Jong Wan;Kim, Jongho;So, Byungjae;Kim, Bumseok;Kim, Ha-Young
Journal of Veterinary Science
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제21권4호
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pp.57.1-57.11
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2020
Background: Streptococcus dysgalactiae subspecies equisimilis (SDSE) acts as an etiological agent for lameness, neurological signs, and high mortality in pigs. Despite its importance in pig industries and zoonotic potential, little is known about the effects of this pathogen. Objectives: This study aimed to determine the molecular characteristics and antimicrobial resistance of SDSE strains isolated from diseased pigs. Methods: A total 11 SDSE isolates were obtained from diseased pigs. Bacterial identification, PCR for virulence genes, emm typing, and antimicrobial resistance genes, multilocus sequence typing, and antimicrobial susceptibility test were performed. Results: Nine isolates were from piglets, and 8 showed lameness, sudden death, or neurological signs. The isolates were PCR-positive for sla (100%), sagA (100%), and scpA (45.5%), and only 1 isolate amplified the emm gene (stL2764). Eight different sequence types were detected, categorized into 2 clonal complexes and 4 singletons. All the isolates in this study were included in a small cluster, which also contained other strains derived from humans and horses. The minimum inhibitory concentrations for the tested beta-lactams were low, while those for macrolides, tetracyclines, and fluoroquinolones were relatively high. PCR analysis of the macrolide and tetracycline resistance genes demonstrated that the isolates carried erm(B) (18.2%, n = 2), mef(A/E) (9.1%, n = 1), tet(M) (18.2%, n = 2), and tet(O) (90.2%, n = 10). Two isolates presented a mutation in parC, which is associated with fluoroquinolone resistance. Conclusion: This study provided insight into swine-derived SDSE, as it is related to veterinary medicine, and elucidated its zoonotic potential, in the context of molecular epidemiology and antimicrobial resistance in public health.
Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae (SDSD)에 의한 사람 감염병을 보고한 사례가 많지 않으며, S. dysgalactiae subsp. equisimilis (SDSE)에 의한 감염병이 대부분이다. 저자들은 생후 22일 된 신생아에서 SDSD와 단순포진 바이러스의 동시감염에 의한 수막염을 경험하였으며, 뇌경색 및 경막하삼출 등이 합병되어 총 4주간의 항균제를 투여하고 치료를 완료하였다. 본 증례의 원인 균주가 소아의 침습감염의 원인으로 알려진 바가 없으나, 오염된 동물을 통한 감염 뿐 아니라, 돌발 감염의 원인균이 될 수 있을 것으로 생각되어 1예를 보고하는 바이다.
Objectives: The aim of this study was to determine the prevalence of asymptomatic carriers of group A ${\beta}-hemolytic$ streptococci (GAS) in children living in a rural community and to investigate the association between episodes of acute pharyngitis and carrier status. Methods: Throat swabs were collected from September to November 2013 among children 5-13 years of age from a rural community (Maria Ignacia-Vela, Argentina). The phenotypic characterization of isolates was performed by conventional tests. Antimicrobial susceptibility was assayed for penicillin, tetracycline, chloramphenicol, erythromycin, and clindamycin (disk diffusion). The minimum inhibitory concentration was determined for penicillin, cefotaxime, tetracycline, and erythromycin. Results: The carriage of ${\beta}-hemolytic$ streptococci was detected in 18.1% of participants, with Streptococcus pyogenes in 18 participants followed by S. dysgalactiae ssp. equisimilis in 5. The highest proportion of GAS was found in 8 to 10-year-old children. No significant association between the number of episodes of acute pharyngitis suffered in the last year and the carrier state was detected (p>0.05). Tetracycline resistance (55.5%) and macrolide-resistant phenotypes (11.1%) were observed. Resistance to penicillin, cefotaxime, or chloramphenicol was not expressed in any streptococcal isolate. Conclusions: The present study demonstrated significant throat carriage of GAS and the presence of group C streptococci (S. dysgalactiae ssp. equisimilis) in an Argentinian rural population. These results point out the need for continuous surveillance of GAS and non-GAS carriage as well as of antimicrobial resistance in highly susceptible populations, such as school-aged rural children. An extended surveillance program including school-aged children from different cities should be considered to estimate the prevalence of GAS carriage in Argentina.
This study carried out to investigate the pathogenic Streptococcus spp. isolated from respiratory tract of Thoroughbred in Jeju province. The specimens were collected from nasal mucosa using a culture swab from 113 Thoroughbred horses. Suspected colonies were selected onto blood and MacConkey agar plate, and identified by standard biochemical properties using Vitek 2 system and PCR method. In this study, we isolated S. equi (n=6), S. zooepidemicus (n=31), S. equisimilis (n=5), S. dysgalactiae (n=2), S. agalctiae (n=1), non identified ${\beta}$-hemolytic Streptococcus spp. (n=1) from Thoroughbred horses. In antimicrobial susceptibility test, it showed a high sensibility in the most of antimicrobial except for neomycin, streptomycin, spectinomycin, erythromycin and clindamycin. These results will provide the basic information to establish control measures for the treatment and prevention of respiratory disease by pathogenic Streptococcus spp. in Thoroughbred horses in Korea.
The skc gene encoding streptokinase (SK) with a molecular mass of approximately 47.4 kDa was cloned from Streptococcus equisimilis ATCC 9542 and heterologously overexpressed in Streptomyces lividans TK24 and E. coli using various strong promoters. When the promoter for sprT [Streptomyces griseus trypsin (SGT)] was used in the host S. lividans TK24, a 47.4-kDa protein was detected along with a smaller hydrolyzed protein (44 kDa), suggesting that posttranslational hydrolysis had occurred as has been reported in other expression systems. The casein/plasminogen plate assay revealed that the plasmid construct containing the SGT signal peptide was superior to that containing the SK signal peptide in terms of SK production. Maximal production of SK was calculated to be about 0.25 unit/ml of culture broth, a value that was five times higher than that obtained with other expression systems using ermE and tipA promoters in the same host. When the skc gene was expressed in E. coli BL21(${\Delta}DE3$)pLys under the control of the T7 promoter, a relatively large amount of SK was expressed in soluble form without hydrolysis. SK activity in E. coli/pET28a-$T7_pSK_m$ was more than 2 units/ml of culture broth, even though about half of the expressed protein formed an inactive inclusion body.
Beta-hemolytic streptococci (BHS) are frequently isolated pathogens in clinical microbiology laboratories. Among them, Group C, G and F streptococci infrequently cause respiratory infections, but they often invade other sites. Patients with underlying diseases are prone to be infected by the organisms and some of them can be fatal. Therefore, combination tests of serological and biochemical tests are needed to correct the identification of non-A, B streptococci because to various species belong to this species. The aim of this study was to investigate the isolation rates of strains and distribution of serogroup C, G and F streptococci at Wonju Hospital during the period of 2003-2004. 133 clinical isolates of group C, G and F streptococci were examined. Of them, 13 (9.8%) were group C, 41 (31.8%) were group F, 79 (59.4%) were group G. The prevalent isolation of the strains by serogroup were: group C, Streptococcus constellatus (38.5%); group F, Streptococcus anginosus (56.1%), Streptococcus constellatus (26.9%); group G, Streptococcus anginosus (54.4%), Streptococcus dysgalatiae subsp. equisimilis (26.5%). Overall, the most frequently isolated BHS was Streptococcus anginosus (51.2%).
This study carried out to investigate the genital tract bacterial flora of Thoroughbred mare in Jeju province during March and July, 2006. The specimens were collected from vaginal ucosa and clitorial fossa using a culture swab (BBL, USA) from 100 Thoroughbred mares. Colonies were selected blood and MacConkey agar plate, and identified as standard biochemical properties using Biolog system (Thermo, USA). In this study, 470 gram-negative strains were isolated more frequently than 249 gram-positive strains. We were Isolated Escherichia coli (19.8%), Proteus mirabillis (14.9%), Enterobacter nimipressuralis (7.4%), Enterobacter mobilis (4.7%), Aeromonas encheleia (4.3%), Pseudomonas aeroginosa (3.0%), Staphylococcus aureus (14.9%), Staphylococcus epidermidis (11.2%), Coagulasenegative Staphylococcus spp. (10.0%), Enterococcus faecalis (9.2%), Enterococcus faecium (8.0%), Actinomyces viscosus (7.2%), Micoroccus diversus(6.8%), Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis(5.2%), Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (3.2%), Other non-beta hemolytic Streptococcus spp. (2.0%) and many others from vaginal mucosa and clitorial fossa in Thoroughbred mares. No significant bacteria (Taylorella equigenitalis and Klebsiella pneumonia) were isolated from the mare genital tract. In antimicrobial agents susceptibility test, it shows a high sensibility in the antibiotics of the most which excepts the streptomycin and neomycinm, kanamycin, spectinomycin, compound sulfonamides. Especially, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus spp. and Streptococcus spp. were visible a high sensibility in the all antibiotics. However, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus spp. and E. coli were showed a high antibiotic resistance patterns. These results may provide the basic information to establish strategies for the treatment and prevention of reproductive disease in Thoroughbred mares in Korea.
This study was carried out to investigate the genital tract bacterial flora of riding mare in Jangsu stud farm during March to September, 2014. The specimens were collected from vaginal and uterus using a swab from 104 riding mares. Colonies were selected on blood and MacConkey agar plates, and identified as standard biochemical properties and Maldi-Tof MS. From this study, we isolated 148 strains including Escherichia (E.) coli (14.19%), Streptococcus (S.) equi subsp. zooepidemicus (2.7%), Streptococcus (S.) dysgalactiae subsp. equisimilis (2.03%), Klebsiella (K.) pneumonia (1.35%) and other strains from riding mares. In antimicrobial agents susceptibility test, it showed a high sensibility to the antibiotics of the most. E. coli and S. zooepidemicus were visible to have a high sensibility to almost antibiotics used in this study. However, K. pnemoniae showed a high antibiotic resistance patterns. These results may provide the basic information to establish strategies for the treatment and prevention of reproductive diseases in riding mares in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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