Sulforhodamine B (SRB) assay is a rapid, sensitive, and inexpensive method for measuring cell proliferation and chemosensitivity. However, the lactate dehydrogenase (LDH) release assay is generally used to measure cytototoxicity of infectious microorganisms against host cells. In this study, we investigated the possibility of applying the SRB assay to determine cytotoxicity for infectious microorganisms, and compared the results with those obtained by the LDH release assay. We used Vibrio vulnificus as a model of infectious microorganisms. The SRB assay showed that V vulnificus strongly induced cytotoxic activity against human intestinal cells, Caco-2 and INT-407 cells. The degree of cytotoxicity closely correlated with infection time and number ratios of V. vulnificus to intestinal cells (MOI, multiplicity of infection). Furthermore, cytotoxicity values obtained by SRB assay correlated well with results obtained by the LDH release assay, and both assays gave a linear response with respect to MOI Heat-inactivation of V. vulnificus for 35 min at $60^{\circ}C$ did not induce cytotoxic activity, indicating that viability of V. vulnificus is crucial for cytotoxic activity against intestinal cells. Although both assays are suitable as cytotoxicity endpoints, the SRB assay is recommended for measuring cytotoxicity of infectious microorganisms against host cells because of its significantly lower cost and more stable endpoint than the LDH release assay.
본 연구는 고서당식이에 첨가된 안정화미강이 혈당조절에 미치는 영향에 대하여 조사하여 향후 안정화미강 첨가 식품을 인체실험에 적용하는데 기초자료로서 이용되고자 하였다. 4주령의 수컷 C57BL/6 mice를 정상식이 대조군 (ND), 고서당식이 대조군 (HSD), 안정화미강 첨가 식이군 (HSD-SRB)으로 배정하였다. 안정화미강 첨가 식이는 선행연구에 근거하여 식이 중량의 20%로 설정하였다. 12주 동안 식이 섭취 후 혈당, 혈청 인슐린, 간 조직의 글리코겐, 혈청 아디포넥틴, 혈청 및 간 조직의 중성지방을 측정하였다. 그 결과 HSD군에 비해 HSD-SRB군에서 체중 및 부고환지방 무게를 감소하는 경향이 있었고 공복혈당과 혈당반응곡선면적을 감소하였다. 또한 안정화미강 첨가 식이를 섭취하였을 때 혈청 및 간의 중성지방 농도가 감소됨에 따라 인슐린 저항성과 췌장의 베타세포 기능을 개선한 것으로 제안한다. 이로써 고서당식이에 안정화미강을 20% 첨가하였을 때 혈당조절 개선효과 가능성을 확인할 수 있었으며, 향후 안정화미강을 첨가한 건강 지향적인 제품 개발과 이 제품을 인체에 적용하기 위한 기초자료로 활용 가능할 것으로 사료된다.
본 연구에서는 전통적으로 담석증, 신장치료 등의 한약제로 많이 사용하는 대왕을 여러 용매를 사용하여 얻은 대왕추출물 분액에 대한 세포독성을 여부를 MTT 정량법, NR 정량법, SRB 정량법을 이용하여 조사하였다. 1. 추출 용매 methylene chloride, ethyl acetate, butanol, water로부터 얻은 대왕추출물 모두 처리농도에 따라 세포에 미치는 영향이 증가하였다. 2. Butanol을 용매로 사용하여 얻은 대왕추출물 분액이 다른 3가지 용매로부터 얻은 대왕추출물보다 세포에 미치는 영향이 크게 나타났고 water를 용매로 사용하여 얻은 추출물이 A498 세포주에 미치는 영향이 가장 낮게 나타났다. 3. Butanol을 추출 용매로 하여 얻은 대왕추출물이 A498 세포주에 미치는 영향이 가장 컸는데 그 추출물에 대한 MTT$_{50}$, NR$_{50}$, SRB$_{50}$값은 각각 0.63mg/ml, 0.65mg/ml, 0.68mg/ml이었고, 가장 영향이 적은 water의 경우 MTT$_{50}$, NR$_{50}$, SRB$_{50}$값은 각각 0.84mg/ml, 0.82mg/ml, 0.80mg/ml이었다. 4. 정량방법 간의 대왕추출물에 대한 반응은 MTT 정량법이 가장 민감하게 나타났다.
The safety of Brucella abortus strain RB51(SRB51) was investigated in dairy cows and Korean native cattle of 4~7th month of gestation. From experimentally inoculated cattle, 18 of 25 (72.0%) dairy cows, and 3 of 10 (30.0%) Korean native cattle were aborted or delivered premature fetus. There were no significant differences in the incidence of abortion depending on the inoculation route (intramuscular and subcutaneous) and dosages ($1{\times}10^9$, $2.8{\times}10^9$, and $4.0{\times}10^9$ CFU). The antibodies to the SRB51 were measured by a dot blot enzyme-linked immunosorbent assay. The highest titers to SRB51 were detected between 5~7 weeks after inoculation and the specitic antibody could be detected up to 28 weeks after inoculation. The SRB51 was isolated from amnio-allantoic fluid, bronchial lymph node, mammary gland, and supramammary lymph node in 5 of 25 dairy cows during 4 weeks after either abortion or delivery. Although SRB51 was isolated from 4 of 24 aborted fetus or normally delivered calves at parturition time, it was not isolated during 4 weeks afterward. Eleven of twentyfive dairy cows showed the endometritis and/or necrosis until 6 weeks after delivery, no lesions were seen at 8 weeks after delivery and uterus from control dairy cows. The results of present study revealed that SRB51 might induce the clinical signs of brucellosis in the pregnant cattle at 4~7th month of gestation.
혼합균에서 분리 배양한 황환원균에 의해 발생되는 황화수소가 염소계유기오염물질인 트리클로로에틸렌의 환원에 어떠한 영향을 미치는지, 또한 염소계유기오염물질에 대한 환원력이 있다고 알려진 2가철은 황화수소가 존재할 경우 트리클로로에틸렌의 환원과 어떠한 관계에 있는지를 알아보기 위하여 본 실험을 수행하였다. 황환원균에 독성을 나타내지 않는 수준의 트리클로로에틸렌의 농도에서 황화수소 발생 및 트리클로로에틸렌의 분해 실험을 수행한 결과 황산염의 환원으로 발생한 황화수소의 농도는 4.38 mM, 트리클로로에틸렌의 농도는 큰 변화가 없는 것으로 관찰되었으며 이를 통하여 황환원균에 의해 발생되는 황화수소의 농도가 트리클로로에틸렌을 환원시키기에는 부족하다는 것을 알 수 있었다. 그러나 황화수소의 농도가 위 실험에서 발생된 농도보다 100배 정도 높을 경우(438 mM)에는 트리클로로에틸렌에 대한 환원력이 있음을 확인하였다. 대표적인 산화철인 $Fe_2O_3$(3가철)를 첨가하였을 경우, 황환원균의 생장에 따라 황화수소, 2가철 및 트리클로로에틸렌의 농도변화를 관찰하였으며 이를 통하여 황환원균에 의해서 발생된 황화수소가 산화되면서 3가의 산화철을 2가철로 환원시키고 황화수소에 의하여 환원된 2가철이 트리클로로에틸렌을 분해하여 농도를 감소시키는 것을 확인하였다. 위의 실험결과를 바탕으로 낮은 농도의 황화수소는 트리클로로에틸렌의 환원에 영향을 미치지 못하며 다만, 황화수소에 의해 환원된 2가철이 트리클로로에틸렌을 분해시키는 주요한 요인임을 알 수 있었다. 또한 실제 해수중에서 황환원균과 $Fe_2O_3$가 공존할 경우의 트리클로로에틸렌의 제거 효과를 살펴보기 위한 실험을 한 결과 황환원균이 황화수소를 생성하여 트리클로로에틸렌의 제거에 영향을 줄 수 있는 반응들은 황환원균 생장에 필수적인 탄소원의 농도가 확보될 때 가능하다는 결론을 얻을 수 있었다.
Purpose: For aesthetic reasons, composite resin brackets are widely used. However, related studies are rare. This pilot study sought to compare the stress distributions in two commercially available composite resin brackets with metal slot. Materials and Methods: Two commercially available resin brackets -- full-metal slot resin bracket (fSRB) and partial-metal slot resin bracket (pSRB) with straight wire appliance dimension of $0.022{\times}0.028$ in -- were selected. In each bracket, 3-dimensional finite element models were constructed, and stress level was evaluated using finite element analysis. By loading the tipping force and torsion moment, which are similar to those applied by the stainless steel rectangular wire ($0.019{\times}0.025$ -in), stress distributions were calculated, and von Mises stress values were obtained. Results: In pSRB and fSRB, the stress value of the torque moment was much higher than that of the tipping force. The pSRB showed higher stress value than fSRB in both tipping force and torque moment because of the difference in size and configuration of the metal frame inserted into the slot. More stress was also found to be concentrated on the slot area than the wing area in fSRB. Conclusion: The slot form of fSRB was found to be more resistant to the stress of tipping and torque than the slot form of pSRB. In addition, the slot areas -- rather than the wing areas -- of the bracket showed breakage susceptibility. Therefore, resistance to the torque moment on the slot area should be considered in bracket design.
Sediments collected from the Jungnang-cheon and its tributaries were used to enumerate anaerobic bacteria by most probable number (MPN) methods. A simple method was developed to detect ferrous ion in the culture fluid in order to count the number of iron ion reducers, and sulfate-reducing bacteria (SRB) and methanogens were detected by the presence of FeS precipitate in the culture or methane in the head space, respectively. The numbers of iron reducer was in the range of 10$^{7}$ - 10$^{8}$ /g in the sediment of the stream containing higher organic content than the tributaries. The sediments of tributaries were analyzed to contain iron reducers less than 10$^{7}$ cells/g. With one exception the numbers of SRB and methanogens were less than 10$^{3}$ cells/g in the sediment. From these results it is concluded that organics in the sediment support the growth of iron reducers, which out-compete SRB and methanogens.
The performance of three tubular materials (C-90, L-80, and N-80) was evaluated in a synthetic brine inoculated with sulfate-reducing bacteria (SRB) in the absence and presence of biocides. A flow loop was used in the evaluation of the three alloys. Morphological examination of the alloy surfaces after exposure to SRB and after biocide treatment was performed by scanning electron microscopy (SEM) to determine the nature of any localized corrosion. The SE images of the coupon samples showed a marked difference between the biocide-treated and untreated samples. Small pits were observed on the ultrasonically cleaned surfaces of the three alloys after exposure to SRB. The biocide treatment reduced the number of SRB on the surfaces of the alloys. Results indicated that C-90 and L-80 alloys exhibited better MIC resistance than N-80 under the conditions used in this study.
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.100-100
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2003
We have reported that oral administration of Saiko-Ka-Ryukotsu-Borei-To (SRB), a traditional Chinese formulation, inhibited the intimal thickening in carotid artery after balloon injury in cholesterol-fed rats. To elucidate its mechanism, the effects of SRB on migration and proliferation of vascular smooth muscle cell (VSMC) were examined in vivo and in vitro. We have reported that oral administration of Saiko-ka-Ryukotsu-Borei-To (SRB), a traditional Chinese formulation, inhibited the intimal thickening in carotid artery after balloon injury in cholesterol-fed rats. To elucidate its mechanism, the effects of SRB on migration and proliferation of vascular smooth muscle cell (VSMC) were examined in vivo and in vitro.
XTT assay와 SRB assay를 이용하여 Hep3B와 L929 세포에서 생활하수처리장과 농공단지폐수처리장 방류수의 세포독성을 알아본 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1) XTT, SRB 실험법에 적용하여 대표적인 발암성 물질인 Benzo(a)Pyrene의 세포독성을 평가 할 수 있었다. Benzo(a)Pyrene 30uM농도는 Hep 3B와 L929 세포에서 약 50%의 세포독성을 나타내었다. 2) 단백질합성과 세포호흡의 활성도로 세포독성을 평가할 수 있는 실험법인 XTT와 SRB 실험법에 적용하여 방류수를 추출 농축한 실제 시료에 대한 세포독성을 평가할 수 있었다. 3) 생활하수처리장의 방류수에 비해 다종 고농도의 화학물질로 오염되어있는 농공단지폐수처리장 방류수에서의 독성발현이 더 높았다. 4) 생활하수처리장 방류수와 농공단지폐수처리장 방류수 중 오염도가 가장 심각한 4지점의 화학물질 분석 결과와 in vitro bio-assay에 의한 세포독성 결과가 일치하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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