Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the rapid detection of Fusarium species, known as harmful fungi in food. One of the hybridoma cell lines (lB8) which produced a monoclonal antibody (Mab) specific to Fusarium extracellular polysaccharide (EPS) was screened and the Mab was produced and purified. A detection limit of the sandwich ELISA against F. moniliforme EPS was $0.001\;\mu\textrm{g}/ml$ in the standard curve. Among the 59 strains tested, most Fusarium species showed hight reactivity with Mab lB8, even when the culture broths were diluted 100,000 times. On the other hand, the other genera, except A. versicolor and Trichoderma viride, had no reactivity. When 1 to $100\;\mu\textrm{g}$ of F. moniliforme EPS was spiked into rice, potato, and mandarine orange, the average recoveries were 151%, 84%, and 94%, respectively, determined by sandwich ELISA. The correlation coefficients between the EPS levels determined by sandwich ELISA and the dry mycelial weight of the liquid culture of F. moniliforme, as well as between the EPS and colony forming unit in solid culture of potato, were 0.97 and 0.91, respectively.
Volatile organic compounds (VOCs) are a major component of urban air pollution. It is documented that low exposure levels of VOCs induce alterations in immune reactivity resulting in a subsequent higher risk for the development of allergic reactivity and asthma. Despite these facts, there are few reports on the affected primary target and the underlying effective causal mechanisms. So in this study, to better understand the risk of BTX (benzene, toluene and o-xylene) which are the major VOCs and to identify novel biomarkers on immune response to these VOCs exposure in human T lymphocytes, we performed the toxicogenomic study by analyzing of gene expression profiles using 35 k human oligo-microarray. BTX generated specific gene expression patterns in Jurkat cell line. By clustering analysis, we identified some genes as potential markers on immuno-modulating effects of BTX. Four genes of these, HLA-DOA, ITGB2, HMGA2 and 5TAT4 were the most significantly affected by BTX exposure. Thus, this study suggests that these differentially expressed immune genes may play an important role in the pathogenesis on BTX exposure and have significant potential as novel biomarkers of exposure, susceptibility and response to BTC.
This study examines the wear behavior of mild steel pins mated against alloyed tool steel discs in a pin-on-disc type sliding test machine and provides specific clarification regarding the effects of disc hardness on the wear behavior of a mating mild steel pin. The analysis confirms these effects through the observation of differences in the wear rates of the mild steel pins at low sliding speed ranges. These differences occur even though the hardness of the mating disc does not affect the wear characteristic curve patterns for the sliding speeds, regardless of the wear regime. In the running-in wear regime, increasing the hardness of the mating disc results in a decrease in the wear rates of the mild steel pins at low sliding speed ranges. However, in the steady-state wear region, the wear rate of a pin mated against the 42DISC is greater than the wear rate of a pin mated against the 30DISC, which has a lower hardness value. This means that the tribochemical reactivity of the mating disc, which is based on hardness value, influences the wear behavior of mild steel at low sliding speed ranges. In particular, oxides with higher oxygen contents, such as $Fe_2O_3$ oxides, form predominantly on the worn surface of the 42DISC. On the contrary, the wear behavior of mild steel pins at high sliding speed ranges is nearly unaffected by the hardness of the mating disc.
The aluminum (Al)/copper oxide (CuO) complex is known as the most promising material for thermite reactions, releasing a high heat and pressure through ignition or thermal heating. To improve the reaction rate and wettability for handling safety, nanosized primary particles are applied on Al/CuO composite for energetic materials in explosives or propellants. Herein, graphene oxide (GO) is adopted for the Al/CuO composites as the functional supporting materials, preventing a phase-separation between solvent and composites, leading to a significantly enhanced reactivity. The characterizations of Al/CuO decorated on GO(Al/CuO/GO) are performed through scanning electron microscopy, transmission electron microscopy, and energy dispersive X-ray spectroscopy mapping analysis. Moreover, the functional bridging between Al/CuO and GO is suggested by identifying the chemical bonding with GO in X-ray photoelectron spectroscopy analysis. The reactivity of Al/CuO/GO composites is evaluated by comparing the maximum pressure and rate of the pressure increase of Al/CuO and Al/CuO/GO. The composites with a specific concentration of GO (10 wt%) demonstrate a well-dispersed mixture in hexane solution without phase separation.
Background: Intracellular antibody specific to hepatitis B virus X protein (HBx) might be useful for studying the role of HBx in hepatocellular carcinogenesis and HBV replication. Methods: With variable region genes for H7 monoclonal anti-HBx Ab, we constructed a vector for bacterial expression of single chain Ab (scFv) and a vector for eukaryotic cell expression of it. The expression of H7 scFv and its binding activity against HBx was examined by immunoblotting and immunofluorescence microscopy. Results: H7 scFv expressed in bacterial cells retained reactivity to HBx. We demonstrated its intracytoplasmic expression in CosM6 eukaryotic cells. Conclusion: This is the first study showing the expression of intracellular anti-HBx Ab in eukaryotic cells. H7 scFv may be a good tool to study the function of HBx in HBV infection.
Helicobacter pylori is the etiologic agent of human gastritis and peptic ulceration and produces urease as the major protein component on its surface. H. pylori urease is known to serve as a major virulence factor and in a potent immunogen. In order to express the recombinant urease at a higher level, a DNA fragment containing the minimal H. pylori urease gene cluster was subcloned into a high copy-number vector. The recombinant H. pylori urease expressed in an E. coli strain that was grown in a rich medium supplemented with added nickel was purified to near homogeneity by using DEAE-Sepharose, Superdex HR200, and Mono-Q (FPLC) columns and the purified enzyme possessed the specific activity of 1255 U/mg. Polyclonal antibodies raised against the purified recombinant H. pylori urease were shown to be very specific when subjected to Western blot analysis, in which crude extracts from the H. pylori ATCC strain and the recombinant E. coli strains expressing various bacterial ureases were exnmined for cross-reactivity.
The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)-inhibition test using a Clonorchis sinensis species-specific mouse monoclonal antibody (MAb) , CsHyb 0605-23, showed increased specificity over the conventional ELISA used for serodiagnosis of clonorchiasis. To characterize the corresponding antigen further, the MAb was tested against polysaccharide, protein and glycolipid fractions obtained from a crude extract of C. slnensis adult worms, using chloroform, methanol and phenol extractions. Only the polysaccharide fraction was recognized by the mb among those fractions. Mild oxidation of the antigen with sodium periodate showed decreased reactivity against the MAb. We concluded that the antigen and antigenic determinants recognized by the MAb are carbohydrates.
Park, Duck-Hwan;Thapa, Shree Prasad;Kim, Won-Sik;Hur, Jang-Hyun;Lim, Chun-Keun
The Plant Pathology Journal
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v.26
no.3
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pp.267-270
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2010
We designed a sensitive and specific PCR-based method with enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC) primer to detect Erwinia pyrifoliae, which cause shoot blight in Asian pear, from a mixed culture and infected plant materials. The primers specifically detected only E. pyrifoliae and showed no cross-reactivity with other bacterial phytopathogens.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.31
no.1
s.256
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pp.62-67
/
2007
Optimization of cathode properties for intermediate temperature-operating SOFC (IT-SOFC) is carried out by using composite-type electrode structure in this study. Composite cathode may lower cathode overpotential by enhancing mixed ionic-electronic conductivity. In this study, particularly, LSM/YSZ, LSF/YSZ, LSCF/CGO, and PSC/CGO were selected as cathode materials. LSM/YSZ composite cathode showed the best performance of about 0.9${\Omega}cm^2$ at $700^{\circ}C$. It is inferred that the resistance is mainly affected by the reactivity between cathode and electrolyte which can cause the formation of resistive phases. Area specific resistance (ASR) characteristics were not changed significantly with decreasing sintering temperature of cathode, because reaction sites were increased even with worse adhesion of cathode on electrolytes.
The ovine squamous cell carcinoma (OSCC)-specific and immunosuppressive properties of OSCC extracts were investigated by using the techniques of lymphocyte blastogenicity, acid dissociation-ultrafiltration and gradient polyacrylamide gel electrophoresis. It was found that OSCC extracts contained two major and one minor protein peaks by Sephadex gel fractionation. Two major peaks bear substantial amount of immunoglobulins, antigen-antibody complex and OSCC-specific fractions, and the minor peak includes immunosuppressive materials. OSCC-specific components were detected at the molecular weights of 10,000 to 100,000 daltons in the major peaks and immunosuppressive materials at the fractions with the molecular weight of 10,000 to 100,000 and < 10,000 daltons in the minor peak. When the fractions were further separated by gradient polyacrylamide gel electrophoresis, the OSCC-specific antigens were found in the slice number 4 to 6 in fraction III, and immunosuppressive materials, in the slice numbers 9 to II in fraction V. The present results were considered to provide a basis for preparation and purification of OSCC-specific and immunosuppressive materials from the crude OSCC extracts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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