정액의 품질은 정자의 운동학적 특성 및 첨체의 온전성 등에 의해서 결정된다. 이전 연구들에서 정액 품질 검사는 현미경을 이용하여 사람이 직접적으로 수행하기 때문에 오차가 컸다. 최근에는 이러한 기법을 보완하고자 분자생물학적 방법을 통한 검사 방법이 새로이 대두되고 있다. ZAR1 유전자는 척추동물의 초기 배아 발달에 영향을 미치는 유전자로 알려져 있지만 정액과 연관성 연구는 진행되어 있지 않다. 본 연구는 ZAR1 유전자의 SNP을 탐색하고 정액의 운동학적 특성과의 연관성을 규명하였다. SNP을 탐색 및 연관성 분석을 하고자 두록 수퇘지 105두의 혈액으로부터 추출한 DNA로 부터 ZAR1 유전자의 전체 염기서열 분석을 실시하였고, 105두의 정액의 운동학적 특성을 분석하였다. 그 결과, ZAR1의 염색체 2540번째 T 서열이 C로 변환되는 것을 확인하였고, ZAR1 SNP의 유전자형을 분석한 결과 major allel은 T 서열이며 minor allele은 C로 확인되었다. ZAR1의 유전자형과 정액의 운동학적 특성과의 연관성 분석 결과 MOT (Motility) (p<0.01)와 VSL (Straight-line Velocity) (p<0.05)에서 유의적인 차이가 나타났다. 또한, 운동학적 특성과 ZAR1 SNP을 비교하였을 때, T allele을 가진 유전자형이 C allele에 비해 MOT와 VSL을 감소시키는 것으로 확인하였다. 따라서 C allele을 가진 돼지가 정액의 MOT와 VSL에서 더 좋은 것으로 판단된다. 이러한 결과들은 우수한 정액을 생산하는 돼지를 판별하는 유전자 진단 기법의 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 사료된다.
BPA, a diphenyl compound containing groups, that make it structurally similar to synthetic estrogen and is considered as one of the major endocrine disruptors. Silymarin has extensively been used to prevent and/or alleviate some human disease, especially for the treatment of adverse liver conditions. It has an antioxidative efficacy and cancer preventive efficacy. Therefore, we examined the hypothesis that silymarin can inhibit BPA-induced toxicity in boar sperm duing in vitro storage. Sperm characteristics (motility, viability, membrane integrity and mitochondrion activity) in semen exposed to BPA (10~200 uM) were sharply lowered, while it increase in a dose and time dependent manner due to silymarin addition (50~200 uM) into semen extender in the presence of BPA (100 uM). All of the evaluated characteristics were gradually improved in the groups that were treated with silymarin (50~200 uM) in the presence of BPA (100 uM) in comparison to BPA 100 uM alone group, irrespective of incubation periods (3 and 6 h). These results demonstrate that silymarin can ameliorate the toxicity of BPA on boar sperm characteristics during in vitro storage, suggesting that silymarin indirectly act as an antioxidant.
Lee, Hyo Serk;Park, Yong-Seog;Lee, Joong Shik;Seo, Ju Tae
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제43권2호
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pp.97-101
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2016
Objective: Growth hormone and its mediator, insulin-like growth factor-1 (IGF-1), have been suggested to exert gonadotropic actions in both humans and animals. The present study was conducted to assess the relationship between serum IGF-1 concentration, seminal plasma concentration, and sperm parameter abnormalities. Methods: A total of 79 men were enrolled in this study from December 2011 to July 2012 and were prospectively analyzed. Patient parameters analyzed included age, body mass index, smoking status, urological history, and fertility history. Patients were divided into four groups based on their semen parameters: normal (A, n=31), abnormal sperm motility (B, n=12), abnormal sperm morphology (C, n=20), and two or more abnormal parameters (D, n=16). Patient seminal plasma and serum IGF-1 concentrations were determined. Results: Patient baseline characteristics were not significantly different between any of the groups. The serum IGF-1 levels in groups B, C, and D were significantly lower than the levels in group A; however, the seminal plasma IGF-1 levels were not significantly different between any of the groups. Conclusion: Men with abnormal sperm parameters had significantly lower levels of serum IGF-1 compared with men with normal sperm parameters. Seminal plasma IGF-1 levels, however, did not differ significantly between the groups investigated here. Further investigations will be required to determine the exact mechanisms by which growth hormone and IGF-1 affect sperm quality.
본 연구는 추출물 농도에 따른 생리활성물질의 용출량을 측정하기 위해 전자공여능과 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과이다. 전자공여능은 추출물의 첨가 농도가 15%인 경우는 21.81%로 나타났고, 35% 농도에서 40.45%로 가장 높았다. 한약재의 첨가 농도가 증가함에 따라 전자공여능은 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 가장 높은 35% 첨가 농도에서의 40.45% 공여능은 이보다 더 낮았으므로 전자공여능은 미약한 것으로 생각된다. 총 폴리페놀함량은 한방약술 15%에서는 $113.89{\pm}1.79{\mu}g\;GAE/m{\ell}$로 나타났고, 한방약술 35% 에서는 $274.24{\pm}0.71{\mu}g\;GAE/m{\ell}$로 나타나서 첨가물의 농도 증가에 따라 총 폴리페놀의 함량도 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 추출물 농도가 30%에서 총 폴리페놀 함량의 증가 폭이 $61.75{\mu}g\;GAE/m{\ell}$로 가장 높았다.
Background: The indiscriminate use of pesticides in Nigeria may have harmful effects on reproductive health of farmers. Objectives: This study assessed the awareness of reproductive health, serum follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), testosterone, estradiol, progesterone and sperm characteristics of male farmers occupationally exposed to pesticides. Methods: Eighty four male farmers were recruited for the study. Structured questionnaire was used to obtain the socio-demographic data. Blood and semen samples were collected from the subjects in the morning for hormonal assays and semen analysis using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method and SQAV sperm quality analyzer. Data were analyzed using chi square, Student's-t-test, and Regression analysis. Results: Serum FSH (p<0.01), LH (p<0.005) and Estradiol (p<0.001) were significantly higher while prolactin (p<0.02) and testosterone (p<0.001) were significantly lower among pesticides exposed farmers than nonexposed subjects. Some 34/84 (40.5%) of the pesticides exposed farmers had serum testosterone levels below the lower limit of the reference range. Those with low testosterone levels (p<0.001), also had FSH (p<0.05), LH (p<0.001) and Estradiol (p<0.002) significantly lower than those with normal testosterone levels. The sperm count among pesticides exposed farmers; total motility and percentage morphology were significantly lower than non-pesticides exposed subjects. Some 14/84 (16.7%) of the pesticides exposed farmers had sperm count below 15 million/mL (oligozoospermia). More than 70% of the farmers were not aware of the reproductive health risks associated with pesticides and only 23.8% of the farmers were using protective devices. Conclusions: Deliberate efforts to improve awareness, knowledge, personal hygiene, and interventions necessary to lessen both pesticides exposure and health risks by adopting safe practices are suggested.
Objective: The purpose of this study was to explore the effect of sodium salicylate (SS) on semen preservation and metabolic regulation in goats. Methods: Under the condition of low temperature, SS was added to goat semen diluent to detect goat sperm motility, plasma membrane, acrosome, antioxidant capacity, mitochondrial membrane potential (MMP) and metabonomics. Results: The results show that at the 8th day of low-temperature storage, the sperm motility of the 20 μM SS group was 66.64%, and the integrity rates of the plasma membrane and acrosome were both above 60%, significantly higher than those of the other groups. The activities of catalase and superoxide dismutase in the sperm of the 20 μM SS group were significantly higher than those of the control group, the contents of reactive oxygen species and malondialdehyde were significantly lower than those in the control group, the MMP was significantly higher than that in the control group, and the contents of Ca2+ and total cholesterol were significantly higher than those in the control group. Through metabonomics analysis, there were significant metabolic differences between the control group and the 20 μM SS group. Twenty of the most significant metabolic markers were screened, mainly involving five metabolic pathways, of which nicotinic acid and nicotinamide metabolic pathways were the most significant. Conclusion: The results indicate that SS can effectively improve the low-temperature preservation quality of goat sperm.
의이인과 염주는 동속 근연종으로 외부형태가 유사하고 종피를 깎아 유통하기 때문에 육안으로 식별하기에는 한계가 있다. 특히, 염주는 일부 수입품에서 의이인과 비슷한 크기로 염주 종피를 깎아 유통시키고 있어 진 위 판별에 논란이 되고 있다. 본 연구에서는 의이인의 유통품을 외부 형태적 특징으로만 식별하기 어려운 문제를 해결하고자 내부형태 특성조사와 정색반응, RAPD등을 이용하여 감별을 위한 기초자료로 이용하고자 한다. 1. 의이인의 과피는 석세포로 구성된 층과 대보강세포와 섬유상 보강세포로 이루어진 2층 구조로 구분되는 반면, 염주의 과피는 외과피와 내과피는 석세포로 이루어져 있고 중앙의 중과피는 대보강세포와 섬유상 보강세포로 구성되어 뚜렷한 3층의 구조로 이루어진다. 2. TLC를 이용한 확인시험에서 Hexane : EtoAc = 10 : 1의 조건으로 전개하였을때 중국산 염주에서는 Rf가 0.2에서만 밴드가 형성되었다. 3. 중국의 "상용중약감정대전(常用中藥鑑定大典)"에서 제시된 요오드반응법에 의한 의이인과 염주의 정색반응은 구별이 어려웠다. 4. RAPD 분석에서 8개 primer에서 품종간 다형성 밴드가 관찰되었고, UBC primer 355와 362에서 중국 염주와 의성 염주의 특이 밴드(500bp, 1300bp)가 관찰되었다.
Objective: Oxidative stress plays a key role in the pathogenesis of male infertility. But, the adverse effects of oxidative biomarkers on sperm quality remain unclear. This study aimed to investigate the levels of nitric oxide (NO), 8-hydroxydesoxyguanosine (8-OHdG), and total antioxidant capacity (TAC) oxidative biomarkers in seminal plasma and their relationship with sperm parameters. Methods: A total of 77 volunteers participated in the study, including fertile (n = 40) and infertile men (n = 37). NO, 8-OHdG, and TAC levels were measured using the ferric reducing ability of plasma, Griess reagent method and an enzyme-linked immunosorbent assay kit, respectively. Results: The mean values of sperm parameters in the infertile group were significantly lower than those in the fertile group (p< 0.001). The mean 8-OHdG in the seminal plasma of infertile men was significantly higher (p= 0.013) than those of controls, while the mean TAC was significantly lower (p= 0.046). There was no significant difference in NO level between the two groups. The elevated seminal 8-OHdG levels were negatively correlated with semen volume, total sperm counts and morphology (p< 0.001, p= 0.001 and p= 0.052, respectively). NO levels were negatively correlated with semen volume, total sperm counts and morphology (p= 0.014, p= 0.020 and p= 0.060, respectively). Positive correlations between TAC and both sperm count and morphology (p= 0.043 and p= 0.025, respectively) were also found. Conclusion: These results suggested that increased levels of NO and 8-OHdG in seminal plasma could have a negative effect on sperm function by inducing damage to the sperm DNA hence their fertility potentials. Therefore, these biomarkers can be useful in the diagnosis and treatment of male infertility.
Clomiphene citrate. antiestrogen, was given to 39 infertile males whose spermatogenesis were disturbed and the efficacy of the drug was evaluated at the Department of Urology in 1980. (Table 1). Patients were divided into 3 clinical observation groups such as group I composed of 19 cases of idiopathic azoospermia, group II consisted of 15 cases of oligospermia following the vasovasostomy, and group III comprised 5 cases of testicular azoospermia. (Table 2). Clinical characteristics of these patients were as follows: Age of the patients ranged from 26 to 43 years old with mean of 34, and that of their wives ranged from 24 to 41 years old with mean of 31. Duration of marital life ranged from 1 to 21 years with mean of 5 years. Sizes of testis ranged from 6 to 25 ml with mean of 16 ml. Coital frequency ranged from 0.5 to 6 per week with mean of 2.4 per week. Levels of plasma FSH ranged from 3.15 to 23.06 lU/1 with mean of 8.15 lU/1, those of LH ranged from 2.98 to 19.89 lU/1 with mean of 8.18 lU/1 and those of testosterone ranged from 3.09 to 9.97 ng/ml with mean of 6.48 ng/ml. (Table 3). Clomiphene citrate was given in dosage of 50 mg per day (in d.) orally to 31 patients for 3 to 9 months and in dosage of 100 mg per day (b.i.d.) orally to 8 patients for 3 to 9 months. (Table 8). Semen samples were analysed monthly on each patient by routine analysis techniques. For the assessment of the efficacy of Clomiphene citrate on faulty spermatogenesis following empirical criteria were used: For semen quality: Improvement (I) represents that semen parameter increased more than 25% from basal level after the treatment, Unchange (U) expresses that semen parameter increased less than 25% of basal level or not changed after the treatment and Deterioration (D) means that semen parameter decreased from basal level after the treatment. For fertility unit (total counts ${\times}$ motility ${\times}$ morphology ${\div}10^6$): Improvement (I) represents that fertility unit increased more than 10 units after the treatment, Unchange (U) expresses that fertility unit increased less than 10 units or not changed after the treatment, and Deterioration (D) means that fertility unit decreased after the treatment. (Table 4). Results obtained from the Clomiphene therapy were as follows: Changes of spermiograme before and after the Oomiphene therapy shown in the Table 5. Sperm counts increased from 23 to 31 ${\times}10^6$/ml in group I, from 17 to 29 ${\times}10^6$/ml in group II. Other parameters of spermiogramme were not changed significantly after the treatment. Fertility units increased from 14 to 18 units after the treatment in group I, and from 16 to 18 units after the treatment in group II. Effectiveness of Clomiphene citrate on spermatogenesis was summarised in the Tables 6 and 7. After the treatment, sperm count increased in 11 patients, motility increased in 6 patients, morphology increased in 4 patients and fertility units increased in 9 patients. No sperm could be produced by Clomiphene citrate in group III of testicular azoospermia. Dosage of 50 mg of Clomiphene citrate per day for 3 to 6 months was proved to be the most effective in the present series. (Table 8). Pregnancy occurred in 2 patients after the treatment. No particular side effects were noted by the treatment. Pharmacologic compounds used for male infertility were shown in the Table 9. Reported results of Clomiphene citrate were shown in the Table 10.
Objectives : HPL-1, a novel herbal medicine which is composed of five herbs such as Kalopanacis Cortex, Chaenomelis Fructus, Raphani Semen, Atractylodis Rhizoma and Pulvis Aconiti Tuberis Purificatum, was developed for treatment of osteoarthritis. This study is aimed to develop analytical method for consistent quality control of HPL-1 and validate chromatographic method. Methods : Chromatographic analysis was performed using ultra-high performance liquid chromatography - diode array detector (UHPLC-DAD) equipped with RP-amide column, column oven, and auto sampler. Marker compounds [protocatechuic acid, chlorogenic acid, liriodendrin, 3,5-dicaffeoylquinic acid, ${\beta}$-D-(3-O-sinapoyl)-fructofuranosyl-$\alpha$-D-(6-O-sinapoyl)glucopyranoside and benzoylmesaconine] were separated by step gradient elution of acetonitrile and 0.1% phosphoric acid/water. The method validation was evaluated by quantitative validation parameters of linearity, accuracy, precision, limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) according to KFDA guideline.Results : An optimized method for six marker compounds in HPL-1 was established by UHPLC-DAD. The correlation coefficient (R2) with each calibration curve was greater than 0.99. The LOD and LOQ were within the range of 0.008-0.090 and $0.023-0.274{\mu}g/mL$, respectively. The relative standard deviation (RSD) of intra- and inter-day variability were less than 4.0%. The result of recovery test was range from 93.3-106.3% with RSD < 4.0%.Conclusions : These results suggest that the quantitative UHPLC method is precise, accurate, effective for quality evaluation of HPL-1. The method may also contribute to improve quality of crude drug preparations used for treatment of various diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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