Kim, Hye-Min;Han, Saem;Lee, Yeon-Sil;Chung, Jae-Min;Lee, Sang-Hyun
Natural Product Sciences
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제16권1호
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pp.54-57
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2010
Effects of the species Scrophularia takesimensis, S. kakudensis, S. boreali-koreana, and S. buergeriana on rat lens aldose reductase inhibition have been investigated. Among them, the extracts of S. kakudensis and S. boreali-koreana were exhibited good inhibitory potencies compared with those of S. takesimensis and S. buergeriana. The $IC_{50}$ values of the aerial part extracts from S. kakudensis and S. boreali-koreana were demonstrated 0.46 and 0.35 mg/ml, respectively.
Scrophularia buergeriana Miquel (Scrophulariaceae) has been used as an anti-inflammatory drug in the folk medicine recipe and been proved its anti-inflammatory effect in the oriental medicine. Since nitric oxide (NO) and superoxide anion (O/sub 2//sup -/) are ones of the major inflammatory parameters, we studied the effect of aqueous extracts of Scrophularia buergeriana (SB) on NO and O/sub 2//sup -/ production in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated mouse peritoneal macrophages. NO, O/sub 2//sup -/production and inducible NO synthase (iNOS) level were significantly reduced in LPS-activated macrophages by SB compared to those without. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) indicated that SB blocked the activation of NF-kB, which was considered to be a potential transcription factor for the iNOS expression. SB also blocked degradation of IkBα. Furthermore, IkB kinase alpha (IKKα), which phosphorylates serine residues of IkB directly, is inhibited by SB. These results suggest that SB could exert its anti-inflammatory actions by suppressing the activation of NF-kB through inhibition of IKK activity.
The present study was performed to investigate the putative anxiolytic-like effects of the aqueous extract of the roots of Scrophularia buergeriana (SB-W) using elevated plus-maze (EPM) and hole-board apparatus in mice. SB-W was orally administered at doses of 50, 100, 200 or 400 mg/kg to ICR mice, 1 h before the behavioral evaluation. Control group were administered with an equal volume of saline, and positive control group with buspirone (2 mg/kg, i.p.). The administration of SB-W significantly increased the percentage of time spent in open arms and entries into the open arms of the EPM compared with saline-treated control group (P < 0.05). Futhermore, those anxiolytic-like activities of SB-W were antagonized by flumazenil (a $GABA_A$ antagonist, 10 mg/kg), but not by WAY-100635 (a 5-$HT_{1A}$ antagonist, 0.3 mg/kg). Moreover, there were no changes in the locomotor activity and myorelaxant effects in any group compared with saline-treated control group. In the hole-board test, the administration of SB-W (200 and 400 mg/kg) significantly increased the number of head-dipping compared with saline-treated control group (P < 0.05). Therefore, these findings suggest that Scrophularia buergeriana promotes the anxiolytic-like activity mediated by GABAergic nervous system in mice.
지황과 현삼을 대상으로 저장 온도와 기간이 직접 체세포배 발생에 미치는 영향을 조사하였다. 지황은 $4^{\circ}C$에서 저장한 후 배양한 경우보다 $8^{\circ}C$에서 저장하여 배양한 경우 직접 체세포배 생성율이 높았으며, 저장 조직 간에 차이가 있어, 잎이 12주간 저장 후에도 거의 일정한 체세포배 발생율을 보여 줄기나 엽병보다 장기 저장에 적합한 것으로 나타났다. 현삼의 각 조직을 전배양 없이 바로 $4^{\circ}C$와 $8^{\circ}C$에서 저장하였을 때, 줄기와 엽병 조직이 저장기간의 경과와 무관하게 신초의 발생율이 유지되었는데 경제적인 면으로 볼 때 $4^{\circ}C$ 조건보다는 $8^{\circ}C$ 조건이 적절할 것으로 판단되었다. 한편 현삼의 각 조직을 $25^{\circ}C$에서 10일 동안 전배양한 후에 저장하기 위해서는 줄기와 잎 조직은 $8^{\circ}C$에서, 엽병 조직은 $4^{\circ}C$ 조건에서 저장하는 것이 유리한 것으로 나타났다.
The study was carried out to establish an improved protocol for shoot organogenesis and plant regeneration from leaf explant cultures of Scrophularia buergeriana M. with the treatment of ethylene inhibitors [silver nitrate (AgNO$_3$), aminoethox-yvinylglycine (AVG), Cobalt chloride (CoCl$_2$)]. The regenerated shoots obtained from leaf explant cultures on MS medium containing 2 mg/l BAP, The additions of AgNO$_3$. AVG and CoC1$_2$ substantially improved the shoot regeneration frequency, at the optimal concentration of 7 mg/L, 7 mg/L, and 3 mg/L respectively, The regenerated shoots could be easily rooted with 0.1 mg/L IBA treatment. The noted plants were hardened and transferred to vermiculite with a 85% survival rate where they grew normally.
As a part of the on-going effort to conserve endangered Scrophularia takesimensis Nakai in Korea, its genetic structure and diversity from 3 population, consisted of 14 subpopulations in Ulleung Island were analyzed using RAPD band patterns. Out of 60 primers tested, 33 generated amplified bands with its genome, including 149 polymorphic and 67 monomorphic bands. The highest number (146) was found in northern population, especially, 64 in HY subpopulation; the smallest (40) in eastern population. An examination of its genetic structure with AMOVA revealed that about 60% of all variations could be assigned to among subpopulations within populations. Population differentiation among populations and subpopulations is seriously going now because of habitat fragmentation due to human activities, such as road and small port construction. Although the habitats of S. takesimensis in Ulleung Island, Korea are disappeared at an alarming rate, significant levels of genetic variation still exist at species level, and population level, especially northern population. Therefore, three conservation strategies should be needed urgently; 1) preservation of populations as it stands, 2) establishment of recovery plan to connect population and subpopulations genetically, and 3) long-term monitoring.
현삼의 기내배양에서 TDZ처리가 비교적 재분화에 효율적이었고 형질전환 식물체를 선발하기 위하여 선발표지 유전자로 사용되는 NPTII gene이 항생제 kanamycin에 대한 저항성은 50 mg/L가 적당하였다. 선발배지에서 자란 현삼 식물체에서 DNA를 추출하여 PCR 분석을 통하여 특정 유전자 Gh-5 gene을 검정한 결과 형질전환되지 않은 식물체에서는 볼수가 없는 988 bp의 band가 형질전환된 식물체에서는 관찰되어 GST 유전자가 현삼의 염색체 안으로 삽입되었음을 확인하였다. 형질전환 효율 증진을 위하여 선발과정에서 암상태를 30일까지 유지할 경우 높은 형질전환 효율을 나타내었으나 그 이상의 처리는 오히려 형질전환 효율이 감소하는 결과를 나타내었다 (Table 5). 형질전환 식물체에서 GST의 활성이 형질전환 되지 않은 식물체의 2배로 나타났고 유도체의 적정 처리 농도는 50$\mu$M이며 유도체 처리 시간에 따라서는 12시간까지는 점차적으로 높아지는 경향이었으나 그 이상의 시간에서는 활성이 저하됨이 확인되었다. Fungus 피검균인 Asperigillus awamori에서 6, 12시간 처리 시 비교적 높은 활성을 보여주었으며 그 이상의 시간처리에서는 명확한 균사 억제를 나타내지 못하였으며, 특히 12시간에서 상대적으로 높은 활성을 나타내었다. Cladosporium herbarum에서 형질전환된 식물체의 활성이 훨씬 높게 나타났으며 6시간 처리에서 다른 처리에 비하여 높은 활성을 나타내었다. 피검균인 Saccharomyces cerevisiae에서는 형질전환 식물체에서 높은 활성을 보여주었으며 6, 12시간 처리에서 비슷하게 높은 활성을 보여 주었다. 박테리아 피검균 Bacillus subtillis에서는 50$\mu$M 이하의 유도체 처리에서 비교적 높은 활성을 나타내었다.
현삼(Scrophularia buergeriana) 뿌리를 80% Methanol수용액으로 추출한 뒤, 감압 농축한 추출물을 EtOAc, n-BuOH과 H2O층으로 계통 분획을 실시하였다. n-BuOH분획에 대하여 silica gel, octadecyl SiO2 column chromatograph 및 중압분취(MPLC) 장비를 반복 실시하여 4종의 phenylethanoid glycoside 및 iridoid glycoside계의 화합물을 분리하였다. NMR 및 Mass데이터를 해석하여, harpagoside (1), angoroside C (2), aucubin (3) 및 acetoside (4)로 구조 동정하였다. 분리한 4종의 화합물에 대하여 HPLC 분석법을 이용하여 정량분석한 결과, 11.5 mg/g (1), 7.6 mg/g (2), 41.2 mg/g (3), 및 4.8 mg/g (4) 이 현삼 뿌리에 함유된 것을 확인하였다. 현삼으로부터 분리된 화합물 중 angoroside C 및 acetoside는 에탄올에 의해 저해된 세포 성장률을 검증한 결과, 간암세포종인 HepG2세포에 대해서 간세포를 보호하는 효과가 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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