본 실험은 볍씨에 염화망간의 농도를 2500, 3500 및 4,500ppm을 처리하여 벼의 초기생육에 대한 생육반응, 엽록소 함량, 유리 proline 및 SOD활성변화를 자포니카형인 일품벼를 실험재료로하여 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 근장은 무처리보다 망간농도 4,500ppm에서는 0.3cm로 망간농도가 증가할수록 뿌리 생장이 억제되었다. 2. 발아율은 망간농도 3,500ppm에서 68%였으나 망간농도 4,500ppm에서 는 43%로 가장 낮았다. 3, 엽록소 함량은 무처리보다 고농도인 4,500ppm 에서 1.16mg으로 가장 낮았다. 4. 유리 proline 함량은 무처리에서는 발아 후 3일과 8일에서 큰 차이를 보이지 않았고 발아 후 3일째 망간농도2,500ppm과 4,500ppm에서 각각 3,286$\mu$mole과 5,872$\mu$mole로 망간농도가 높아질수록 유리 proline 함량이 증가하였다. 5. SOD 활성은 발아 후 2일째 무처리가 762EU인 것에 비해 망간농도 4,500ppm에서는 1,693EU로 가장 높았다.
This study has examined the effects of Aralia elata Seemann ethanol extract on antioxidant enzyme systems inrats along with benzo($\alpha$) pyrene(B(a)P) administration . The ethanol extract of Aralia elata Seemann (50mg/kg body wt.) was fed to rats for 4 weeks by stomach tubing. The extract administration increased antioxidant activities of glutathione sulfur transferase(GST) comparing to the control. also total superoxide dismutase(SOD) and Cu, Zn-SOD activities were stimulated. Catalase activities were increased by 50% with the extract feeding compared to the control . Combined administration of B($\alpha$)P and the extract increased GST activity in B($\alpha$) P group. Although total SOD acitivity was decreased , Cu, Zn-SOD was greately increased from 0.10unit to 0.18 unit and catalase activity also was increased compared to the group of B($\alpha$) P. GST activity in CLE group was 1.32 unit, increased by 33% comparing to the group CL of 0.99unit. Cu, Zn-SOD and catalase activities in thegroup fed high fat and ethanol extracts were increased by 25% and 39%, respectivley comparing to the group of high fat. In addition , total SOD was decreased but, Cu, Zn-SOD acitivity was increased from 0.09 unit to 0.18unit. Catalase activity was 76.05 unit in the group of B($\alpha$) P and extract comparing to 65.26 units in B($\alpha$)P group. Serum $\alpha$-tocopherol of rat was markedly increased by theextract. Administration of B9$\alpha$)P reduced $\alpha$-tocopherol levels in the serum, on the other hand, lard in the diet increased $\alpha$-tocopherol levels in the serum. The above results indicate that Aralia bud exerts antioxidant functions in vivo against B($\alpha$)P. Further research may be necessary for the identification fo the biologically active material.
The strains of Panax ginseng C.A. Mey., P. quinquefolius L. and selected strains P. ginseng-B, P.ginseng-A, P. quinquefolius-C were investigated. Activities of SOD, catalase and peroxydase were determined by methods of Fridovich et al. (1979), Komov et al.(1975), Bovaird et al.(1982) respectively. Activities of SOD, catalase, peroxydase were investigated every day 5 in cycle of cultivation. For P. ginseng it was the 35 days, P. quinquefolius the 70 days, P. quinquefolius-C 90 days. P. ginseng-B 90 days, P. ginseng-A 60 days. The P. quinquefolius, P. quinquefolius-C, P. ginseng-B had clear differentiation and developed tracheid elements, which are absent in strain of P. ginseng. The peaks of protein content for P. ginseng (4.5 units/g) and for P. quinquefolius (3.5 units/g) were on day 10 and remained unchanged till the last cultivation. The strain P. ginseng-A had two peaks of protein content (2.5 mg/g) on day 15 and on day 30. For P. ginseng-B strain these peaks were on day 5 and day 40 (3.5 mg/g). Peroxydase activity peak (60 units/g) in P. ginseng strain was on day 10. This activity in P. ginseng-B had two peaks on day 15 and day 35 and reached 95 units/g , increasing to 150 units/g to day 80. In strain of P. ginseng-A was only one maximum of this activity -130 units/g on day 45. In P. quinquefolius peroxydase activity was 103 units/g on day 40, increasing to 135 units/g to day 90. For P. quinquefolius-C this activity peak was 136 units/g on day 60. Peroxydase activities for the upper and lower layers of biomass was different and varied considerably from 28-35 units/g in lower to 270-290 units/g for upper layer. The SOD activity had two peaks in P. ginseng strain the 80 units/g and the 70 units/g on day 20 and day 35 respectively. Activity of SOD in P. quinquefolius strain reached 53 units/g on day 40 and increased up to 83 units/g to day 60.The similar increase of SOD activity was marked for P. ginseng-B to 85 units/g on day 90. In P. ginseng strain the 6 molecular isoforms SOD was defined. One of them with RfO,6 was determined in all days of cycle, three other (Rf-0.43; 0.54;0.80) only on day 10 and day 20. The isoform of SOD with Rf-0,29 was detected only on day 10 and with Rf-0,35 only on day 35. The catalase activity decreased in all strains to the last days of cultivation. The changes of SOD, catalase and peroxydase activities reflect the differences between the strains of Panax ginseng and Panax quinquefolius and their selected forms. The correlation between maximum life span of strains and activities of their antioxydant enzymes were detected.
In an attempt to develop a variety of expression vector systems for Corynebacterium glutamicum, six types of promoters, including $P_{tac}$, $P_{sod}$, $P_{sod}$ with a conserved Shine-Dalgarno (SD) sequence from C. glutamicum, $P_{ilvC}$, $P_{ilvC}$ with a conserved SD-1 ($P_{ilvC-M1}$), and $P_{ilvC}$ with a conserved SD-2 ($P_{ilvC-M2}$), were cloned into a modified shuttle vector, pCXM48. According to analysis of promoter strength by quantitative reverse transcription PCR, $P_{sod}$ and $P_{sod-M}$ were superior to tac and ilvC promoters in terms of transcription activity in C. glutamicum. All of the promoters have promoter activities in Escherichia coli, and $P_{sod-M}$ displayed the highest level of transcriptional activity. The protein expression in constructed vectors was evaluated by measuring the fluorescence of green fluorescent protein (GFP) and SDS-PAGE. C. glutamicum harboring plasmids showed GFP fluorescence with an order of activity of $P_{ilvC}$ > $P_{ilvC-M1}$ > $P_{sod}$ > $P_{ilvC-M2}$ > $P_{sod-M}$, whereas all plasmids except pCSP30 with $P_{sod}$ displayed fluorescence activities in E. coli. Of them, the strongest level of GFP was observed in E. coli with $P_{sod-M}$, and this seems to be due to the introduction of the conserved SD sequence in the translational initiation region. These results demonstrate that the expression vectors work well in both C. glutamicum and E. coli for the expression of target proteins. In addition, the vector systems harboring various promoters with different strengths, conserved SD sequences, and multiple cloning sites will provide a comfortable method for cloning and gene expression, and consequently contribute to the metabolic engineering of C. glutamicum.
대부분의 열대 식물은 chilling에 민감하게 반응한다. 대표적 열대 식물인 벼 잎에 대한 light-chilling 처리와 이 후의 회복기(post-chilling) 동안 일어나는 반응들을 알아보았다. Chilling 시 벼 잎에서의 광합성 효율($F_v/F_m$)은 대조구보다 50% 감소하였고, 상대적으로 $H_2O_2$ 양은 48% 증가하였다. 항산화 효소들 중 SOD와 GR 활성은 chilling과 post-chilling 시 증가하였다. 특히 SOD isoforms의 경우 CuZn-SOD와 Mn-SOD 가 발현된 반면 Fe-SOD는 발현되지 않았다. CAT 활성은 chilling 시 감소하였으며, 반면에 APX는 크게 증가하였다. Chilling 시 CAT의 isoforms의 변화를 보면, CAT-2와 -3의 활성이 감소한 것과 대조적으로 post-chilling 시 이들 isoforms의 활성은 증가하였다. 이처럼 APX와 CAT 활성은 벼 잎이 chilling stress를 겪게 될 때 상반되는 변화를 보여주었다.
본 연구에서는 절대적 호기성인 Vitreoscilla가 지닌 FeSOD의 특성을 밝히고자 paraquat와 iron을 사용하여 실험하였다. Vitreoscilla에서 FeSOD의 활성도는 초산화 음이온을 생성하는 paraquat에 대해 커다란 영향 없이 일정하게 발현되었다. 이 결과는 Vitreoscilla는 호기적인 물질대사 동안 생성되어지는 초산화 음이온에 대해 방어할 수 있을 만큼 충분한 FeSOD를 평상시 지니고 있음을 의미한다. 또한 다른 요소에 의한 FeSOD의 발현 가능성이 고려되어졌다. 보조 인자인 Fe 를 처리한 결과 활성도가 증가됨을 알 수 있었다. 이는 CN-resistant respiration을 증가시키는 초산화 음이온에 대한 조절 기작과는 달리 apoenzyme 상태가 보조 인자인 금속 이온 (Fe)에 의해 holoenzyme 상태로 전환되었음을 의미한다. PQ와 Fe를 함께 처리하였을 경우, FeSOD의 증가는 PQ에 의해서 생성된 초산화 음이온에 의해 apo 상태에서 hole 상태로 FeSOD의 활성이 증진되는 synergism effect로 설명되어진다. 결론적으로 metalloenzyme인 SOD의 경우는 이런 전환이 활성 속도를 제한하거나 조절할 수도 있는 posttranslational 수준의 조절 기작이 존재함을 알 수 있었다.
In order to research the anti-oxidative activity of methanol extract of Phellinus baumii Pilat (Hymenochaetaceae), Caenorhabditis elegans model system was used. Ethyl acetate soluble fraction of the methanol extract showed the most potent DPPH radical scavenging activity. The ethyl acetate fraction was measured on its activities of superoxide dismutase (SOD), catalase, and oxidative stress tolerance with reactive oxygen species (ROS) level in C. elegans. Furthermore, to see if regulation of stress-response gene is responsible for the increased stress tolerance of C. elegans which treated by the ethyl acetate fraction, we checked SOD-3 expression using a transgenic strain. Consequently, the ethyl acetate fraction of P. baumii increased SOD and the catalase activities in a dose-dependent manner in C. elegans, reduced ROS accumulation dose-dependently. Besides, the ethyl acetate fraction-treated CF1553 worms showed higher SOD-3::GFP intensity than the control worms.
1. Objectives: The purpose of this study is to find out the Anti-Oxidative effects of Soyangin Hyeongbangpaedok-san(HBP) in kidney and spleen cells of aged rats. 2. Methods: Aged rats used in this experiment were 6, 52, 68 weeks old. Each age group was divided into three groups again. One group was given no treatment, another group was dosed normal saline and the other group was dosed HBP decoction. The antioxidant effects of HBP decoction were measured by the levels of SOD, GSH, MDA and NO. 3. Results: and Conclusions: 1) The activity of SOD was significantly increased in kidney cells of 68w-HBP group. Deterioration of the activity of SOD in kidney cells was significantly suppressed according to increasing in age of the week. 2) The level of NO was significantly decreased in kidney cells of 68w-HBP group. Deterioration of The level of NO in kidney cells was significantly suppressed according to increasing in age of the week. 3) The activity of SOD was increased in spleen cells of 52w and 68w-HBP group. 4) The level of GSH was significantly increased in spleen cells of 68w-HBP group.
Methanol extract of Helianthus tuberosus L. (Compositae) flower was investigated to research the anti-oxidative activity by using a Caenorhabditis elegans model system. Ethyl acetate soluble fraction of the methanol extract showed the most potent DPPH radical scavenging activity. The ethyl acetate fraction was measured on its activities of superoxide dismutase (SOD), catalase, and oxidative stress tolerance with reactive oxygen species (ROS) level in C. elegans. Furthermore, in order to verify if regulation of stress-response gene is responsible for the increased stress tolerance of C. elegans which treated by the ethyl acetate fraction, we checked SOD-3 expression using a transgenic strain. Consequently, the ethyl acetate fraction of H. tuberosus flower increased the catalase and SOD activities in a dose-dependent manner in C. elegans, reduced ROS accumulation dose-dependently. Besides, the ethyl acetate fraction-treated CF1553 worms showed higher SOD-3::GFP intensity than the control group.
목적: 본 연구는 안구에 존재하는 항산화효소인 superoxide dismutase(SOD)와 catalase(CAT)가 UV-A에 반복적으로 노출되었을 때 이들의 구조 및 활성의 변화가 유발되는지 알아보고 이들의 상관관계를 밝히고자 수행되었다. 방법: SOD와 CAT의 표준품으로 각각의 효소용액을 제조하고 하루 30분, 1시간 및 2시간씩 365 nm의 UV-A에 노출시키는 조건으로 1, 2, 3, 4 및 5일 동안 UV-A에 반복적으로 노출시켰다. UV-A 반복노출에 따른 SOD와 CAT의 구조변성은 전기영동분석으로 확인하였으며, 이들 효소의 활성은 분석키트를 이용하여 비색분석법으로 측정하였다. 결과: UV-A에 반복노출된 SOD는 일일 1시간 이상 조건으로 반복노출되었을 때 전기영동분석에서 효소의 다중화(polymerization)가 관찰되었으나 활성의 변화는 12% 이내로 나타났다. 반면 UV-A에 반복노출된 CAT는 전기영동 시 효소의 밴드크기가 감소하여 구조변성이 나타났음을 알 수 있었으며, 효소활성 또한 유의하게 감소됨을 확인하였다. 반복노출시간이 긴 경우 CAT은 전기영동분석에서는 효소밴드를 보임에도 불구하고 그 활성은 완전히 소실됨을 알 수 있었다. 결론: 이상의 결과로 UV-A 반복노출에 따른 항산화효소의 구조변성은 효소의 종류에 따라 그 정도와 양상이 다르게 나타나며, 구조변성이 효소활성의 감소정도와 반드시 일치하는 것은 아님을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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