출아법으로 분열하는 S. cerevisiae 는 mother cell 과 bud cell 과의 연결부위근처의 원형질막 내부에 10-nm filament ring 이 존재한다. CDC3, CDC10, CDC11, CDC12 유전자가 이 filament 를 암호화할 가능성이 많은 것으로 알려져 있으며, 근래에 CDC3 와 CDC12 유전자의 생성물들이 filament ring 에 존재한다는 것이 형광현미경을 이용하여 밝혀졌으나 그 기능은 밝혀지지 않았다. 이에 본인은 10-nm filament ring 의 지능을 알아보기 위하여 ring을 이루고 있는 S. cerevisiae 의 CDC3유전자와 유사한 S. pombe 유전자의 clone 을 시도하였다. 이를 위하여 .lambda. gt11 expression vector 에 S. pombe genomic library 를 만들고 CDC3 항채를 이용하여 screen 하였다. Screen 된 유전자를 sequencing 하여 본 결과, 2개 이상의 intron 이 존재하는 것이 밝혀졌으나, 일부 부위의 아미노산 서열과 CDC3 아미노산 서열을 비교하여 본 결과, 약 62%의 유사성이 존재하였다.
Saccharomyces cerevisiae STV89와 Kluyveromyces fragilis CBS397의 에탄올 내성에 대한 산소와 불포화 지방산의 첨가 영향을 연구하기 위한 알콜발효를 수행하였다. 실험결과 통기에 의하여 세포성장과 에탄올 생성속도가 촉진되어으며, 세포와 에탄올 생성량도 크게 증가되었다. 특히 균주의 비교에서 cell의 최대 비성장 속도와 에탄올 생성 속도가 S.cerevisiae의 경우 1.7배와 2.3배 증가하였지만, K. fragilis인 경우 6.4배와 4.4배가 증가하여 K. FRAGILIS가 에탄올 생성 및 cellgrowth를 위하여 S. cerevisiae보다 산소가 더 필수적인 요인으로 작용한다. 또한 S. cerevisiae와 K. fragilis 모두 ergosterol, linoleic acid 및 oleic acid의 첨가에 의하여 cell growth와 에탄올 형성이 향상되었다. 따라서 산소와 불포화 지방산은 효모의 에탄올 내성 증가에 중요한 요인으로 작용함을 알 수 있었다.
본 연구는 기존에 과실주 발효 시, non-Saccharomyces 효모를 혼합 발효하여 향기성분을 증가시키는 기술을 확대하여 단독 및 혼합 발효로 제조한 탁주 술덧의 향기성분을 증가시킨 후 증류 과정을 통해 주질을 향상시킬 수 있다는 이론을 검증하고자 한 연구이다. 연구를 진행하기 전, 예상한 것처럼, 혼합 발효 증류식 소주에서 과실향을 나타내는 저분자 ester 계열의 휘발성 향기성분들의 함량이 증가하는 것이 입증되었으며, H. uvarum 계열의 효모를 사용한 경우, HU SJ69 혼합 발효구는 S. cerevisiae 단독 발효구와 비슷한 아미노산 함량을 나타냈으나, HU S6 혼합 발효구의 경우, 아미노산 함량이 감소하는 것으로 나타났다. 관능검사 결과, 휘발성 향기성분이 증가한 HU S6 혼합 발효구에서 SC NY21을 사용한 다른 증류식 소주들과 비교하여 유의적으로 큰 차이를 나타내지는 않았지만, 조금 더 높은 향미 점수를 얻은 것을 통해, 향후 non-Saccharomyces 효모의 혼합 발효를 통한 증류식 소주의 품질을 향상시킬 수 있는 기초연구로써 중요한 의미를 가진다고 판단된다. 또한, H. uvarum 계열 효모의 경우에는 국내에서는 식품 원료로 등재되지 않았기 때문에, 향후 산업적 이용을 위한 안전성 검증 등의 연구가 추가되어야 할 것으로 사료된다.
Saccharomyces cerevisiae ${\Sigma}1278b$ 균주는 FLO8 유전자를 가지고 있는 반면, S288c 균주는 flo8 정지돌연변이를 포함하고 있어서 반수체의 부착 생장, 배수체의 위균사형 생장 및 생물막 형성 현상을 보이지 않는다. S. cerevisiae의 LAMMER kinase인 ScKns1의 기능을 파악하기 위한 온도 감수성 실험을 수행한 결과, S288c 균주와 달리 ${\Sigma}1278b$ 균주가 $37^{\circ}C$의 열 스트레스에 민감함을 발견하였으며, 흥미롭게도 $Sckns1{\Delta}$ 돌연변이가 이러한 감수성을 회복시킴을 확인하였다. 또한 ${\Sigma}1278b$ 균주의 열 감수성은 삼투안정제인 sorbitol의 첨가에 의해 회복되었다. 이러한 결과는 Flo8은 ScKns1이 연관된 열 스트레스를 조절하는 신호전달경로를 구성할 가능성을 제시한다.
염농도가 높은 전통식품인 된장에서 호염성 효모를 분리하였다. 2M NaCl에서도 생육할 수 있는 이 균은 Zygosaccharomyces rouxii로 등정되었으며 생리적 특성, rDNA를 probe로 이용한 RFLP 및 화합성 단핵 동종 효모 균주와 교배 결과에 의하여 이루어졌다. Z. rouxii YDJ 균은 생장속도가 S. cerevisiae 보다 느려 대수기를 완료하는데 $2{\sim}3$일 소요되었다. S. cerevisiae에서는 배지에 염농도가 높아질수록 glycerol보다 trehalose 함량이 크게 증가하였으나 Z. rouxii는 세포 내에 glucosamine, glycerol, trehalose함량이 증가하였다. 따라서 Z. rouxii의 호염성은 glycerol과 같은 polyol이외에도 trehalose과 glucosamine의 효과가 크게 나타났다. Trehalose 생합성 효소인 trehalose phosphate synthase는 S. cerevisiae보다 Z. rouxii에서 낮았으며 trehalose 분해효소인 trehalase도 S. cerevisiae 보다 Z. rouxii에서 낮았다. 그러나 Z. rouxii는 NaCl 처리시 trehalose가 증가하므로 내염성은 glycerol 이외에 trehalose에 의해서도 영향을 받는 것으로 생각된다.
지난 20여년 동안 항생제나 화학 요법의 문제점을 줄이고 외부 환경의 변화에 민감하게 반응하는 장내 미생물들의 균총을 유지시켜주기 위해 살아있는 미생물제제(direct-fed microbial agents, DFM)를 반추가축의 사료에 직접 첨가하고 있다. 반추동물 사료에도 생산성을 개선하기 위하여 여러 종류의 DFM이 널리 이용이 되고 있는데, DFM은 건물섭취량(dry matter intake, DMI)의 증가 및 반추위내에서의 영양소 분해율 향상 그리고 유생산량의 증가와 체온감소 등에 효과적이다(Piva 등, 1993; Higginb- otham 등, 1994; MacGilliard와 Stallings, 1998; Nocek와 Kautz, 2006). 대표적인 DFM으로는 효모균, 곰팡이, 박테리아 및 세포 구성물질 등이 이에 속한다(Beharka와 Nagaraja, 1993; Sullivan과 Martin 1999). 효모 및 효모배양물은 대표적인 DFM의 한 종류인데, 반추가축에게 효모(yeast) 및 효모 배양물(yeast culture)을 급여하였을 때 반추위 내 발효 특성을 변화시키고(Harrison 등, 1988; Martin과 Nisbet, 1990) 반추위 내에서 조단백질과 조섬유의 반추위내 분해율을 개선시키며(Gomez-Alarcon 등, 1990; Williams 등, 1991), 체내 전장소화율(Gomez-Alarcon 등, 1990; Wiede- mier 등, 1987)을 향상시키는 효과가 있다고 보고된 바 있다. 한편, 일반적으로 대부분의 Clostridium 균들은 독소를 생산하거나 인체에 유해한 물질들을 생산하여 사람과 가축에게 좋지 않은 영향을 주고 있으나, Clostridium butyricum은 장내 유익한 균으로서 유산균과의 공생이 가능하고 반추위 내에서 주요 VFA 생산에 관여하기도 하며(Araki 등, 2002a, 2002b) 많은 종류의 비타민 B군을 생산하여 유산균이 이용할 수 있게 한다. 또한 생산되어진 acetic acid와 butyric acid는 장관 상피세포를 흡수되어 상피세포에서 에너지원으로 사용되어진다고 하였다(김 등, 2001). 낙산균은 주로 단위동물에서 사용되어 왔는데, 일부 복합생균제의 형태로 사용하였을 경우 유해세균이 장 점막을 침입하는 것을 방지하고(Fuller와 Brooker, 1974), butyric acid를 생산하여 장내 pH를 저하시키며 항균작용(Under-dahl 등, 1982)을 하는 것으로 알려져 있다. S. cerevisiae는 가장 일반적으로 사용되는 균주로써 이의 효과와 효능에 관한 연구는 비육우와 착유우를 대상으로 많이 이루어져 왔지만, 낙산균은 일부 국내 젖소 사육농가에서 사용되고 있음에도 불구하고 이에 대한 연구는 단위동물 및 어린송아지의 경우(최 등, 1991)를 제외하고는 거의 이루어지지 않았다. 따라서 본 연구는 S. cerevisiae 및 C. butyricum을 단독으로 또는 혼합하여 급여할 때 면양에서의 반추위내 발효성상과 소화율, 그리고 젖소를 이용한 사양시험을 통해 산유량과 유조성에 미치는 효과를 비교하기 위하여 실시되었다.
Kim, Yeon Jin;Yu, Hwan Hee;Park, Yeong Jin;Lee, Na-Kyoung;Paik, Hyun-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권12호
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pp.1854-1861
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2020
Staphylococcus aureus is one of the most common microorganisms and causes foodborne diseases. In particular, biofilm-forming S. aureus is more resistant to antimicrobial agents and sanitizing treatments than planktonic cells. Therefore, this study aimed to investigate the anti-biofilm effects of cell-free supernatant (CFS) of Saccharomyces cerevisiae isolated from cucumber jangajji compared to grapefruit seed extract (GSE). CFS and GSE inhibited and degraded S. aureus biofilms. The adhesion ability, auto-aggregation, and exopolysaccharide production of CFS-treated S. aureus, compared to those of the control, were significantly decreased. Moreover, biofilm-related gene expression was altered upon CFS treatment. Scanning electron microscopy images confirmed that CFS exerted anti-biofilm effects against S. aureus. Therefore, these results suggest that S. cerevisiae CFS has anti-biofilm potential against S. aureus strains.
Starch로부터 ethanol을 직접적으로 발효 생산할 수 있는 새로운 효모 균주를 개발하고자 glucoamylase 생성균으로 알려진 Saceharomyces diastaticus의 glucoamylase gene을 cloning vector를 사용하지 않고 S, cerevisiae에 transformation시켰다. Li$_2$SO$_4$, 처리로써 competent화 한 S, cerevisiae의 Intact cells을 recipient로 하여 BamHI으로 partial digestion한 S, diastaticus의 chromosomal DNA를 transformation시키고 starch를 유일한 탄소원으로 함유한 최소 배지상에서 starch 자화능을 marker로 하여 transformant를 선별한 결과, 8.5$\times$$10^{-7}$ 빈도로 transformant를 얻었다. Transformant의 특성을 recipient 및 donor와 비교하기 위해 copper resistance와 당 발효능을 조사한 결과, donor인 S, diastaticus와 동일한 성질로서 표현된 maltose와 starch 발효능을 제외하고는 800ppm 농도까지 생육 가능한 copper resistance와 galactose 발효능 등에 있어서는 recipent와 동일하게 나타났다. 또한 transformant가 생성하는 glucoamylase의 그 작용에 있어서의 최적온도와 최적pH를 조사하여 본 바 각각 pH5.0, 50C로서 donor의 glucoamylase와 동일함을 알 수 있었다.
Kim, Ran;Jang, Jeong-Hoon;Park, Won-Jong;Kim, Ha-Kun;Kwak, Hahn-Shik;Lee, Jong-Soo
Mycobiology
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제38권3호
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pp.206-209
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2010
To produce bioactive compound enriched yeast using medicinal Gugiga (Lycium chinensis Mill), several edible Saccharomyces species were cultured in Gugija extracts added yeast extract, peptone and dextrose medium (GE - YEPD medium) at $30^{\circ}C$ for 24 hr, and their growth were determined. Growth of Saccharomyces cerevisiae K-7 and Sacchromyces cerevisiae ACTC 7904 were better than those of the other yeasts. Two yeasts were selected and then determined their some physiological functionalities after cultivated the yeasts in the GE - YEPD medium and compared those grown on YEPD medium. Antihypertensive angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity of S. cerevisiae K-7 grown on GE - YEPD medium was about 20% higher than that grown on YEPD medium. Superoxide dismutase-like activity of S. cerevisiae ACTC 7904 was also about 12% more high. However, the other physiological functionalities were almost same or lower. Optimal addition concentration of Gugija extract was 10%, and maximally growth and ACE inhibitory activity of S. cerevisiae K-7 were shown when the strain was cultured in 10% Gugija extracts containing YEPD medium at $30^{\circ}C$ for 12 hr.
Kim, Kyu-Yong;Kim, Myoun-Dong;Han, Nam-Soo;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제12권3호
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pp.411-416
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2002
Bacillus macerans cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) was expressed on the cell surface of Saccharomyces cerevisiae by fusing with Aga2p linked to the membrane-anchored protein, Aga1p. The surface display of CGTase was confirmed by immunofluorescence microscopy and its enzymatic ability to form ${\alpha}$-cyclodextrin from starch. The maximum surface-display of CGTase was obtained by growing recombinant S. cerevisiae at $20^{\circ}C$ and pH 6.0. S. cerevisiae cells displaying CGTase on their surface consumed glucose and maltose, inhibitory byproducts of the CGTase reaction, to enhance the purity of produced cyclodextrins. Accordingly, the experimental results described herein suggest a possibility of using the recombinant S.cerevisiae anchored with bacterial CGTase on the cell surface as a whole-cell biocatalyst for the production of cyclodextrin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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