Anti-lipopolysaccharide (LPS) antibody administration has the potential benefits of neutralizing and consequently controlling rumen-derived LPS during subacute ruminal acidosis. Four Holstein bulls were used in this crossover study with a 2-week wash-out period. Anti-LPS antibody (0 or 4 g) was administered once daily for 14 days. Significantly lower ruminal LPS and higher 1-h mean ruminal pH were identified in the 4 g group. However, blood metabolites, acute-phase proteins, cytokines, and hepatic transcriptomes were not different between the two groups. Therefore, anti-LPS antibody administration mitigated ruminal LPS release and pH depression without accompanying responses in acute-phase inflammation or hepatic transcriptomic expression.
본 시험은 젖소 4두에 대하여 제1위체류형 센서(Indwelling probe)를 정치시키고 이를 이용하여 아급성제1위과산증(SARA)의 강도를 조사함과 동시에 pH가 혈 중 내독소(Lipopolysaccharide; LPS)의 농도에 미치는 효과를 알아보기 위하여 수행되었다. 비섬유성탄수화물(Non-fiber carbohydrates, NFC)을 기준으로 적정 수준의 NFC를 포함하고 있는 정상 사료군(Normal diet, ND)과, 아급성제1위과산증(Subacute ruminal acidosis, SARA) 유발가능 사료군(Acidogenic diet, AD)의 2개 처리구에 각 2두씩 배치하여 Cross-over 설계로 사양실험을 반복 실시하였다. 제1위체류형 센서는 장시간에 걸친 제1위 내 pH의 변화를 추적하는 데 효과적이었다. 얻어진 결과에서 AD 급여는 반추위내용물의 pH를 낮추는 데 커다란 영향을 주었으며, 반추위 내 pH의 저하는 혈 중 LPS의 농도가 증가로 이어짐을 확인할 수 있었다. 따라서 혈 중 LPS 농도는 급성 또는 만성형을 불문하고 과산증을 확인하는 지표로 사용 가능할 것으로 판단된다. 또한 착유우용 사료첨가물로 많이 이용되는 소디움벤토나이트(NaB)와 프로필렌글리콜(PG)의 급여는 반추위 내 pH의 저하를 완충시켜 궁극적으로 SARA의 강도를 완화시키고 혈 중 Lipopolysaccharides (LPS) 농도의 증가를 줄여 줌으로써 내독소에 의해 발생하기 쉬운 제엽염 등의 부작용을 완화시키는 데 도움을 줄 수 있을 것으로 사료된다.
The aim of this study was to evaluate protein expression patterns of liver in response to subacute ruminal acidosis (SARA) induced by high-concentrate diet. Sixteen healthy mid-lactating goats were randomly divided into 2 groups and fed either a high-forage (HF) diet or a high-concentrate (HC) diet. The HC diet was expected to induce SARA. After ensuring the occurrence of SARA, liver samples were collected. Proteome analysis with differential in gel electrophoresis technology revealed that, 15 proteins were significantly modulated in liver in a comparison between HF and HC-fed goats. These proteins were found mainly associated with metabolism and energy transfer after identified by matrix-assisted laser desorption ionization/time of flight. The results indicated that glucose, lipid and protein catabolism could be enhanced when SARA occurred. It prompted that glucose, lipid and amine acid in the liver mainly participated in oxidation and energy supply when SARA occurred, which possibly consumed more precursors involved in milk protein and milk fat synthesis. These results suggest new candidate proteins that may contribute to a better understanding of the mechanisms that mediate liver adaptation to SARA.
In feedlot cattle the abrupt change of diet from roughage to a large quantity of grain for the purpose to improve production often results in increased occurrence of rumen acidosis or acute carbohydrate encouragement enterotoxemia, bloats diarrhea liver abscess and laminitis or robot disease. The common management practice to control these problem is to increase the amount of concentrates in the diet in a stepwise manner until the animals are adapted to a high-grain ration. However this practice requires at least about 3 weeks adaptation period and specially prepared adaptation rations which contain various amount of concentrates. Present experiment was undertaken in order to findout the more simple and rapid adaptation method of cattle to a high grain ration. Nineteen Korean calves aging from four to six month were fed artifical hay (Youngchoun Chuk-Hyup, Korea) which contains 10% of concentrates or alfalfa and rye grass hays for two months and randomly alloted to three experimental groups and two control groups. The experimental group-1 was inoculated by stomach tube for two days with li500 ml/day of ruminal fluid fished from Korean beef cattle that had been previously adapted to a high-energy ration. The experimental group-2 was inoculated by trocalization for two days with the same ruminal fluid. The experimental group-3 was inoculated by trocalization with 1,500 ml/day of bacterial culture which contained 2$\times $10$^{9}$/m1 of Gram-negative bacteria derived from adapted luminal fluid. The two control groups were treated with normal saline solution by the same methods. All animals were fed high-energy ration that contained 80% of grain ad libitum for 30-74 days beginning on the third of the treatment. The effect of the inoculation on the adaptation was observed clinicopathologically with the following results; All of the experimental calves inoculated with the ruminal fluid or Gram-negative bacterial culture derived from adapted cattle did not show any signs of rumen acidosis or other related diseases, while most of the control calves did show diarrhea and bloat and a calf laminitis. The average daily weight gain and feed efficiency of experimental calves were slightly improved compared with control calves. Following the feeding of high-grain rational the pH of the ruminal fluid was lowered in both the experimental and control groups. However severe acidosis with the pH of below 5.0 was observed in only a control group-2. The protozoal number in ruminal fluid was markedly decreased during the high-grain feeding in both the experimental and control calves. However the decrease was mere severe in control calves compared with the experimental calves. The activation of the protozoa were completely disappeared within nine hours at the refrigerator temperature (4"C). No significant differences in heamatological and blood chemical values between the experimental and control calves were recognized. However in one control calf which showed clinically laminitis marked elevations of serum glutamic oxaloacetate transaminase and lactic dehydrogenase activities and a decrease of serum glucose level were observed. From these results it would be concluded the intraruminal transplantation of unadapted calves with the adapted ruminal fluid from cattle previously adapted to a high-energy ration prevents disease problem associated with high-grain feeding and improve weight gain and feed efficiency.ency.
Objective: In this study, metabolites that changed in the rumen fluid, urine and feces of dairy cows fed different feed ratios were investigated. Methods: Eight Holstein cows were used in this study. Rumen fluid, urine, and feces were collected from the normal concentrate diet (NCD) (Italian ryegrass 80%: concentrate 20% in the total feed) and high concentrate diet (HCD) groups (20%: 80%) of dairy cows. Metabolite analysis was performed using proton nuclear magnetic resonance (NMR) identification, and statistical analysis was performed using Chenomx NMR software 8.4 and Metaboanalyst 4.0. Results: The two groups of rumen fluid and urine samples were separated, and samples from the same group were aggregated together. On the other hand, the feces samples were not separated and showed similar tendencies between the two groups. In total, 160, 177, and 188 metabolites were identified in the rumen fluid, urine, and feces, respectively. The differential metabolites with low and high concentrations were 15 and 49, 14 and 16, and 2 and 2 in the rumen fluid, urine, and feces samples, in the NCD group. Conclusion: As HCD is related to rumen microbial changes, research on different metabolites such as glucuronate, acetylsalicylate, histidine, and O-Acetylcarnitine, which are related to bacterial degradation and metabolism, will need to be carried out in future studies along with microbial analysis. In urine, the identified metabolites, such as gallate, syringate, and vanillate can provide insight into microbial, metabolic, and feed parameters that cause changes depending on the feed rate. Additionally, it is thought that they can be used as potential biomarkers for further research on subacute ruminal acidosis.
Hyun Sang Kim;Jun Sik Eom;Shin Ja Lee;Youyoung Choi;Seong Uk Jo;Sang Suk Lee;Eun Tae Kim;Sung Sill Lee
Animal Bioscience
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제36권8호
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pp.1199-1208
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2023
Objective: The purpose of this study was to perform a comparative analysis of metabolite levels in serum and milk obtained from cows fed on different concentrate to forage feed ratios. Methods: Eight lactating Holstein cows were divided into two groups: a high forage ratio diet (HF; 80% Italian ryegrass and 20% concentrate of daily intake of dry matter) group and a high concentrate diet (HC; 20% Italian ryegrass and 80% concentrate) group. Blood was collected from the jugular vein, and milk was sampled using a milking machine. Metabolite levels in serum and milk were estimated using proton nuclear magnetic resonance and subjected to qualitative and quantitative analyses performed using Chenomx 8.4. For statistical analysis, Student's t-test and multivariate analysis were performed using Metaboanalyst 4.0. Results: In the principal component analysis, a clear distinction between the two groups regarding milk metabolites while serum metabolites were shown in similar. In serum, 95 metabolites were identified, and 13 metabolites (include leucine, lactulose, glucose, betaine, etc.) showed significant differences between the two groups. In milk, 122 metabolites were identified, and 20 metabolites (include urea, carnitine, acetate, butyrate, arabinitol, etc.) showed significant differences. Conclusion: Our results show that different concentrate to forage feed ratios impact the metabolite levels in the serum and milk of lactating Holstein cows. A higher number of metabolites in milk, including those associated with milk fat synthesis and the presence of Escherichia coli in the rumen, differed between the two groups compared to that in the serum. The results of this study provide a useful insight into the metabolites associated with different concentrate to forge feed ratios in cows and may aid in the search for potential biomarkers for subacute ruminal acidosis.
Yoshiyuki Tsuchiya;Ena Chiba;Atsushi Kimura;Kenji Kawashima;Toshiya Hasunuma;Shiro Kushibiki;Yo-Han Kim;Shigeru Sato
Journal of Veterinary Science
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제24권2호
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pp.27.1-27.15
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2023
Background: The relationships between the postpartum subacute ruminal acidosis (SARA) occurrence and predicted bacterial functions during the periparturient period are still not clear in Holstein cows. Objectives: The present study was performed to investigate the alterations of rumen fermentation, bacterial community structure, and predicted bacterial functional pathways in Holstein cows. Methods: Holstein cows were divided into the SARA (n = 6) or non-SARA (n = 4) groups, depending on whether they developed SARA during the first 2 weeks after parturition. Reticulo-ruminal pH was measured continuously during the study period. Reticulo-ruminal fluid samples were collected 3 weeks prepartum, and 2 and 6 weeks postpartum, and blood samples were collected 3 weeks before, 0, 2, 4 and 6 weeks postpartum. Results: The postpartum decline in 7-day mean reticulo-ruminal pH was more severe and longer-lasting in the SARA group compared with the non-SARA group. Changes in predicted functional pathways were identified in the SARA group. A significant upregulation of pathway "PWY-6383" associated with Mycobacteriaceae species was identified at 3 weeks after parturition in the SARA group. Significantly identified pathways involved in denitrification (DENITRIFICATION-PWY and PWY-7084), detoxification of reactive oxygen and nitrogen species (PWY1G-0), and starch degradation (PWY-622) in the SARA group were downregulated. Conclusions: The postpartum SARA occurrence is likely related to the predicted functions of rumen bacterial community rather than the alterations of rumen fermentation or fluid bacterial community structure. Therefore, our result suggests the underlying mechanisms, namely functional adaptation of bacterial community, causing postpartum SARA in Holstein cows during the periparturient period.
Objective: To investigate changes in rumen fermentation characteristics and bacterial community by a sudden change to a high concentrate diet (HC) in Korean domestic ruminants. Methods: Major Korean domestic ruminants (each of four Hanwoo cows; $545.5{\pm}33.6kg$, Holstein cows; $516.3{\pm}42.7kg$, and Korean native goats; $19.1{\pm}1.4kg$) were used in this experiment. They were housed individually and were fed ad libitum with a same TMR (800 g/kg timothy hay and 200 g/kg concentrate mix) twice daily. After two-week feeding, only the concentrate mix was offered for one week in order to induce rapid rumen acidosis. The rumen fluid was collected from each animals twice (on week 2 and week 3) at 2 h after morning feeding using an oral stomach tube. Each collected rumen fluid was analyzed for pH, volatile fatty acid (VFA), and $NH_3-N$. In addition, differences in microbial community among ruminant species and between normal and an acidosis condition were assessed using two culture-independent 16S polymerase chain reaction (PCR)-based techniques (terminal restriction fragment length polymorphism and quantitative real-time PCR). Results: The HC decreased ruminal pH and altered relative concentrations of ruminal VFA (p<0.01). Total VFA concentration increased in Holstein cows only (p<0.01). Terminal restriction fragment length polymorphism and real-time quantitative PCR analysis using culture-independent 16S PCR-based techniques, revealed rumen bacterial diversity differed by species but not by HC (p<0.01); bacterial diversity was higher in Korean native goats than that in Holstein cows. HC changed the relative populations of rumen bacterial species. Specifically, the abundance of Fibrobacter succinogenes was decreased while Lactobacillus spp. and Megasphaera elsdenii were increased (p<0.01). Conclusion: The HC altered the relative populations, but not diversity, of the ruminal bacterial community, which differed by ruminant species.
Objective: This study aimed to assess the impact of a hydroethanolic extract of walnut green husks (WGH) on rumen fermentation and the diversity of bacteria, methanogenic archaea, and fungi in sheep fed a high-concentrate diet. Methods: Five healthy small-tailed Han ewes with permanent rumen fistula were selected and housed in individual pens. This study adopted a self-controlled and crossover design with a control period and an experimental period. During the control period, the animals were fed a basal diet (with a ratio of concentrate to roughage of 65:35), while during the treatment period, the animals were fed the basal diet supplemented with 0.5% hydroethanolic extract of WGH. Fermentation parameters, digestive enzyme activities, and microbial diversity in rumen fluid were analyzed. Results: Supplementation of hydroethanolic extract of WGH had no significant effect on feed intake, concentrations of total volatile fatty acids, isovalerate, ammonia nitrogen, and microbial protein (p>0.05). However, the ruminal pH, concentrations of acetate, butyrate and isobutyrate, the ratio of acetate to propionate, protozoa count, and the activities of filter paper cellulase and cellobiase were significantly increased (p<0.05), while concentrations of propionate and valerate were significantly decreased (p<0.05). Moreover, 16S rRNA gene sequencing revealed that the relative abundance of rumen bacteria Christensenellaceae R7 group, Saccharofermentans, and Ruminococcaceae NK4A214 group were significantly increased, while Ruminococcus gauvreauii group, Prevotella 7 were significantly decreased (p<0.05). The relative abundance of the fungus Pseudomonas significantly increased, while Basidiomycota, Fusarium, and Alternaria significantly decreased (p<0.05). However, there was no significant change in the community structure of methanogenic archaea. Conclusion: Supplementation of hydroethanolic extract of WGH to a high-concentrate diet improved the ruminal fermentation, altered the structure of ruminal bacterial and fungal communities, and exhibited beneficial effects in alleviating subacute rumen acidosis of sheep.
This study investigated the effects of acarbose addition on changes in ruminal fermentation characteristics and the composition of the ruminal bacterial community in vitro using batch cultures. Rumen fluid was collected from the rumens of three cannulated Holstein cattle fed forage ad libitum that was supplemented with 6 kg of concentrate. The batch cultures consisted of 8 mL of strained rumen fluid in 40 mL of an anaerobic buffer containing 0.49 g of corn grain, 0.21 g of soybean meal, 0.15 g of alfalfa and 0.15g of Leymus chinensis. Acarbose was added to incubation bottles to achieve final concentrations of 0.1, 0.2, and 0.4 mg/mL. After incubation for 24 h, the addition of acarbose linearly decreased (p<0.05) the total gas production and the concentrations of acetate, propionate, butyrate, total volatile fatty acids, lactate and lipopolysaccharide (LPS). It also linearly increased (p<0.05) the ratio of acetate to propionate, the concentrations of isovalerate, valerate and ammonia-nitrogen and the pH value compared with the control. Pyrosequencing of the 16S rRNA gene showed that the addition of acarbose decreased (p<0.05) the proportion of Firmicutes and Proteobacteria and increased (p<0.05) the percentage of Bacteroidetes, Fibrobacteres, and Synergistetes compared with the control. A principal coordinates analysis plot based on unweighted UniFrac values and molecular variance analysis revealed that the structure of the ruminal bacterial communities in the control was different to that of the ruminal microbiota in the acarbose group. In conclusion, acarbose addition can affect the composition of the ruminal microbial community and may be potentially useful for preventing the occurrence of ruminal acidosis and the accumulation of LPS in the rumen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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